本文選題：高血壓病 + 微小RNA(microRNA　； 參考：《福建中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的通過對(duì)比肝陽上亢證高血壓患者、非肝陽上亢證高血壓患者及正常人血清中微小RNA(microRNA,miRNA)的表達(dá)譜的不同,明確高血壓病肝陽上亢證與miRNA之間是否存在相關(guān)性,探索高血壓肝陽上亢證患者血清中是否存在特異性表達(dá)的一個(gè)miRNA或幾個(gè)miRNAs。方法1.在本院體檢中心及心內(nèi)科門診收集初發(fā)高血壓病或非初發(fā)但是未服用降壓藥的高血壓患者及健康體檢者的空腹血清,將所收集的病例分為三組,分別是肝陽上亢組、非肝陽上亢組、健康組。2.分別抽取肘靜脈血5m1,存于無抗凝的干燥試管,3000r/min離心10分鐘,抽取血清,-30℃凍存。采用Trizol LS法提取血清中RNA,按照miRNeasy Mini Kit操作手冊(cè),使用吸附柱進(jìn)行RNA的富集。3.利用Solexa測序方法對(duì)以上3組樣本進(jìn)行基因測序分析,檢測出肝陽上亢組與非肝陽上亢組、肝陽上亢組與正常人群組、非肝陽上亢組與正常組之間差異表達(dá)的基因。4.利用miRNA在線預(yù)測軟件miRWalk2.0整合肝陽上亢組與非肝陽上亢組、肝陽上亢組與正常人群組中共有的差異表達(dá)miRNA,篩選出可能與肝陽上亢證相關(guān)的miRNAs。5.使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測篩選出的miRNAs在各組的表達(dá)量,包括其濃度及總量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)肝陽上亢組與正常組的miRNA的表達(dá)量均存在明顯差異(P0.01)；肝陽上亢組與非肝陽上亢組比較miRNA的表達(dá)量也存在明顯差異(P0.01)；非肝陽上亢組與正常組比較miRNA的表達(dá)量無差異(P=0.26,P0.05)。肝陽上亢組與非肝陽上亢組miRNA的濃度比較存在明顯差異(P0.01)；肝陽上亢組與正常組miRNA的濃度比較也存在明顯差異(P0.01)；非肝陽上亢組與正常組miRNA的濃度比較無明顯差異,(P=0.15,P0.05)。肝陽上亢組與正常組：共檢測到miRNA1037個(gè),其中差異表達(dá)的miRNA有653個(gè)(P0.05),表達(dá)下調(diào)的miRNA223個(gè),表達(dá)上調(diào)的miRNA430個(gè)；非肝陽上亢組與正常組：共檢測到miRNA963個(gè),其中差異表達(dá)的miRNA有573個(gè),表達(dá)下調(diào)的miRNA256個(gè),表達(dá)上調(diào)的miRNA317個(gè)；肝陽上亢組與非肝陽上亢組：共檢測到miRNA957個(gè),其中差異表達(dá)的miRNA有720個(gè),表達(dá)下調(diào)的miRNA277個(gè),表達(dá)上調(diào)的miRNA433個(gè)。結(jié)果在高表達(dá)的基因群中發(fā)現(xiàn)miR-126。熒光定量結(jié)果顯示肝陽上亢組miR-126的表達(dá)顯著高于非肝陽上亢組與正常組(P0.01)。結(jié)論高血壓肝陽上亢證形成與miRNAs有關(guān),miR-126可能是高血壓肝陽上亢證形成的特異性miRNAs之一。
[Abstract]:Objective to compare the expression profiles of small RNA (microRNA, miRNA) in serum of hypertensive patients with hyperactivity of non liver yang hyperactivity syndrome and normal people, and to find out whether there is a correlation between hyperhyperhyperactivity of liver yang hyperactivity and miRNA in hypertension, and to explore whether there is a specific expression in the serum of hyperhyperhyperactivity of hypertension. MiRNA or several miRNAs. methods 1. in the medical center of the hospital and the Department of Cardiology in the Department of Cardiology to collect the fasting serum of patients with essential hypertension or non primary but not antihypertensive drugs and health examiners. The collected cases were divided into three groups: the liver yang hyperactivity group, the non liver yang hyperactivity group, and the healthy group.2., respectively, to extract the 5m of the elbow vein blood. 1, stored in a dry test tube without anticoagulant, 3000r/min centrifugation for 10 minutes, extraction of serum and cryopreservation at -30 C. Trizol LS was used to extract RNA in serum. According to the miRNeasy Mini Kit operation manual, the adsorption column was used to enrich the RNA.3. using the Solexa sequencing method, and the above 3 groups of samples were sequenced and analyzed to detect the liver yang hyperactivity group and the non liver yang. The difference expression gene.4. between the liver yang hyperactivity group and the normal group, the non liver yang hyperactivity group and the normal group was expressed by the miRNA online prediction software miRWalk2.0 integration of the liver Yang hyperhyperactivity group and the non liver yang hyperactivity group, the liver yang hyperactivity group and the normal group expressed miRNA, and selected the miRNAs.5. related to the liver yang hyperactivity syndrome in the hyperhyperactivity group. The expression of miRNAs in each group was detected by real time fluorescence quantitative PCR, including its concentration and total amount. The results showed that the expression of miRNA in the liver yang hyperactivity group was significantly different from that of the normal group (P0.01). The expression of miRNA in the liver yang hyperactivity group and the non liver yang hyperactivity group was also significantly different (P0.01); the non liver yang hyperactivity group and the non liver yang hyperactivity group were significantly different from those in the non liver yang hyperactivity group. There was no difference in the expression of miRNA in the normal group (P=0.26, P0.05). The concentration of miRNA in the liver yang hyperactivity group and the non liver yang hyperactivity group was significantly different (P0.01); the concentration of miRNA in the liver yang hyperactivity group and the normal group was also significantly different (P0.01), and there was no significant difference in the concentration of miRNA between the non liver yang hyperactivity group and the normal group (P=0.15, P0.05). MiRNA1037 was detected in the liver yang hyperactivity group and the normal group, in which there were 653 different expressions of miRNA (P0.05), down regulated miRNA223, and up regulated miRNA430; miRNA963 was detected in the non liver yang hyperactivity group and the normal group, of which there were 573 miRNA differentially expressed, down regulated miRNA256, and up regulated miRNA317 A total of miRNA957 were detected in the liver yang hyperactivity group and the non liver yang hyperactivity group, of which there were 720 different expressions of miRNA, the expression of down regulated miRNA277, and the up regulation of miRNA433. Results in the highly expressed gene group, the miR-126. fluorescence quantitative results showed that the expression of miR-126 in the liver yang hyperactivity group was significantly higher than that in the non liver yang hyperactivity group and the positive group. Chang Group (P0.01). Conclusion the formation of hypertension with hyperactivity of liver Yang is related to miRNAs. MiR-126 may be one of the specific miRNAs of hypertension with hyperactivity of liver yang.
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R259

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本文編號(hào)：1989475