本文選題：右歸丸 + 滋陰、溫陽拆方　； 參考：《首都醫(yī)科大學》2016年博士論文

【摘要】：第一部分:右歸丸對EAE小鼠神經(jīng)導向因子及Rho GTP酶信號分子的調(diào)節(jié)作用目的:觀察右歸丸對小鼠腦和脊髓netrin1/DCC、slit2/Robo1和Rho A/Rac1/Cdc42等神經(jīng)因子的調(diào)節(jié)作用,以探討右歸丸促進實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠神經(jīng)再生的作用機制。方法:70只C57BL/6雌性小鼠,隨機分為七組,分別為正常組(NC)、模型組(MO)、激素組(PA)、梓醇組(CA)和右歸丸組(1.2,2.4,4.8 g/kg)。皮下注射MOG35-55建立EAE小鼠模型。每日灌胃給藥,記錄體重和神經(jīng)功能評分。40天后處死小鼠,取腦和脊髓,蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色光鏡觀察小鼠腦和脊髓組織病理改變,透射電鏡觀察小鼠腦和脊髓軸突和髓鞘的損傷變化。免疫熒光法(immunofluorescent staining,IF)觀察MAP-2的表達。免疫組化法(immunohistochemistry,IHC)、實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應(real-time quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)和蛋白印跡法(Western blot,WB)檢測小鼠腦和脊髓netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rho A、Rac1和Cdc42的表達水平。結果:右歸丸能減低EAE小鼠的神經(jīng)功能評分、減輕腦和脊髓炎性細胞浸潤、減少軸突損傷和髓鞘脫失。右歸丸可提高MAP-2的表達。IHC、q RT-PCR和WB顯示,右歸丸可提高netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rac1、Cdc42的表達水平,降低Rho A的表達水平。結論:右歸丸對MOG35 55誘導的EAE小鼠具有一定的神經(jīng)保護作用,能促進神經(jīng)再生修復,該作用與調(diào)節(jié)netrin1/DCC、slit2/Robo1和Rho家族Rho A、Rac1、Cdc42相關。酶信號分子的調(diào)節(jié)作用第二部分:右歸丸及其滋陰、溫陽拆方對EAE小鼠神經(jīng)導向因子及Rho GTP目的:進一步研究右歸丸“陰中求陽”配伍對EAE小鼠神經(jīng)再生的調(diào)節(jié)作用。方法:C57BL/6雌性小鼠分為NC、MO、PA、CA、右歸丸(YGPs)、滋陰填精方(NY)和溫陽化氣方(WY)七組。造模和處理方法同實驗第一部分,檢測指標和方法亦同前。結果:右歸丸及其NY、WY拆方均能減低EAE小鼠的神經(jīng)功能評分、減輕腦和脊髓中的炎性細胞浸潤、緩解軸突損傷和髓鞘脫失。右歸丸及其拆方可提高MAP-2表達,IHC、q RT-PCR和WB結果顯示,右歸丸及其拆方可提高netrin1、DCC、slit2、Robo1、Rac1、Cdc42的表達水平,降低Rho A表達水平。在拆方研究中,NY在減輕EAE小鼠急性期神經(jīng)功能評分以及EAE緩解期病理損傷效果較好,對EAE緩解期排斥性導向因子slit2、Robo1以及信號分子Rho A具有調(diào)節(jié)作用;WY對EAE緩解期吸引性神經(jīng)導向因子netrin1、DCC以及信號分子Rho A、Rac1、Cdc42具有調(diào)節(jié)作用,而右歸丸方對上述各方面均具有較顯著的調(diào)節(jié)作用。結論:右歸丸方及其拆方均對EAE小鼠有神經(jīng)保護作用,可通過調(diào)節(jié)slit2/Robo1、netrin1/DCC和Rho A/Racl/Cdc42促進EAE小鼠神經(jīng)修復。滋陰和溫陽拆方在神經(jīng)保護和神經(jīng)修復等方面各有側重,右歸丸在神經(jīng)保護和神經(jīng)修復等方面均具有較為顯著的調(diào)節(jié)作用。第三部分:右歸丸方及其滋陰、溫陽拆方的主要化學成分指認與定量分析目的:為右歸丸方及兩個拆方的質(zhì)量控制與發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎提供依據(jù)。方法:采用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS對右歸丸方及其拆方的化學成分進行研究,應用LC-ESI-MS/MS法對右歸丸樣品中的馬錢苷與金絲桃苷進行定量測定。結果:本研究從右歸丸方中指認出宋果靈、綠原酸、附子靈、馬錢苷、尼奧靈、獐牙菜苷、金絲桃苷、槲皮素8個化合物;滋陰方中主含綠原酸、馬錢苷、獐牙菜苷、金絲桃苷、槲皮素等5個化合物,溫陽方中主含宋果靈、綠原酸、附子靈、尼奧靈、金絲桃苷、槲皮素等6個化合物。定量測定右歸丸方中馬錢苷的含量是51.8 mg/g,金絲桃苷的含量是43 mg/g。結論:右歸丸方及其滋陰、溫陽拆方的化學成分指認及主要化學成分含量測定為藥理實驗提供了質(zhì)量控制及相應的作用物質(zhì)基礎。綜上,本課題研究證實右歸丸對EAE小鼠具有明顯的神經(jīng)保護作用,能夠促進EAE小鼠神經(jīng)修復,其作用機制可能與調(diào)節(jié)神經(jīng)導向因子netrin1、slit2和其受體DCC、Robo1,以及細胞內(nèi)Rho GTP酶Rho A、Rac1、Cdc42相關。滋陰、溫陽拆方作用各有側重,全方在神經(jīng)保護和神經(jīng)再生等方面均具有較為顯著的作用,揭示了右歸丸“陰中求陽”配伍的部分科學內(nèi)涵。
[Abstract]:In the first part , the effects of Yougui Pill on the neurogenesis of mouse brain and spinal cord netrin1 / DCC , bcl 2 / Robo1 and rho A / Rac1 / Cdc42 were investigated . 鐨笅娉ㄥ皠MOG35-55寤虹珛EAE灝忛紶妯″瀷.姣忔棩鐏岃儍緇欒嵂,璁板綍浣撻噸鍜岀緇忓姛鑳借瘎鍒，

本文編號：1950790