本文選題：BMP-Smad通路 + 骨碎補(bǔ)總黃酮　； 參考：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：目的：通過(guò)回顧既往病例,分析牽張成骨技術(shù)對(duì)骨缺損的治療效果,探討牽張成骨技術(shù)臨床應(yīng)用存在的不足。通過(guò)構(gòu)建一種新型的大鼠脛骨牽張成骨(Distraction Osteogenesis DO)模型,為后期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供基礎(chǔ)。基于 BMP-smad通路各關(guān)鍵因子的表達(dá),觀察骨碎補(bǔ)總黃酮對(duì)大鼠脛骨牽張成骨的影響。方法：牽張成骨病例回顧：通過(guò)對(duì)2013年1月至2016年2月我院7例使用牽張成骨技術(shù)治療的患者的回顧,利用影像學(xué)資料定性分析,觀察牽張成骨新骨生長(zhǎng)速度、骨缺損愈合時(shí)間及總結(jié)常見(jiàn)并發(fā)癥的發(fā)生情況。建立一種新型SD大鼠脛骨牽張成骨模型的方法：40只雄性SD大鼠右側(cè)脛骨截骨并短縮4mm,以自行研究設(shè)計(jì)的環(huán)狀牽張外固定器固定,于骨折修復(fù)期予以牽張外固定器恢復(fù)脛骨高度,術(shù)后通過(guò)大體觀察、影像學(xué)觀察以及組織形態(tài)學(xué)方法觀察截骨部位的愈合與恢復(fù)情況。80只SD大鼠,按照實(shí)驗(yàn)一的造模方法造模成功后,隨機(jī)分為模型組、中藥組、阻遏劑組及中藥加阻遏劑組。從牽張期開始,各組予以藥物干預(yù),中藥組及中藥加阻遏劑組予以骨碎補(bǔ)總黃酮灌胃、模型組及阻遏劑組予以等量生理鹽水灌胃；阻遏劑組及中藥加阻遏劑組腹腔注射LDN193189HC1,用量3mg/kg,中藥組及中藥加阻遏劑組予以等量生理鹽水腹腔注射。每日一次,給藥30天,即牽張完成后10天。牽張及用藥完成后進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。通過(guò)比較各組影像檢查、mi cro-CT骨掃描檢測(cè)觀察和比較牽張成骨后各組成骨的大體情況；通過(guò)qPCR檢測(cè)牽張成骨區(qū)域骨組織中BMP-smad通路相關(guān)基因的表達(dá)情況；通過(guò)Western blot分析牽張成骨區(qū)域骨組織中BMP-smad通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。各組間相關(guān)指標(biāo)的差異采用單因素方差分析。結(jié)果：臨床病例回顧：7例骨缺損均達(dá)到骨性愈合,平均隨訪時(shí)間18±5.6個(gè)月；1例出現(xiàn)針道感染,經(jīng)處理后骨性愈合；隨訪期間未發(fā)生拆除支架后再發(fā)骨折。SD大鼠牽張成骨模型的建立：40只SD大鼠全部進(jìn)行手術(shù)造模,通過(guò)對(duì)外固定器每天定期定量調(diào)節(jié),牽張成骨完成60天后觀察,外固定器仍穩(wěn)定有效,對(duì)大鼠功能活動(dòng)無(wú)明顯影響。造模側(cè)的脛骨高度恢復(fù),骨性愈合�；贐MP-Smad通路探討骨碎補(bǔ)總黃酮調(diào)節(jié)牽張成骨效能的機(jī)制研究：通過(guò)X線、micro-CT骨掃描大體評(píng)估,與模型組、阻遏劑組比較,中藥組在牽張成骨后期成骨質(zhì)量和速度提高,而中藥加阻遏劑組的成骨效能也明顯強(qiáng)于阻遏劑組。與模型組比較,中藥組中BMP-Smad通路的各主要因子,包括BMP2、BMP4、BMPR1A、Smadl的基因表達(dá)明顯增高(P0.05)；與模型組比較,阻遏劑組中BMP-Smad通路的各主要因子,包括BMP2、BMP4、BMPR1A、Smadl的基因表達(dá)明顯降低(P0.05); Western blot檢測(cè)BMP-Smad通路的各主要因子的蛋白表達(dá),包括BMP2、BMP4、BMPR1A、p-Smadl,與模型組比較,中藥組中各蛋白表達(dá)無(wú)顯著差異(P0.05)：而與模型組比較,阻遏劑組中BMP2、BMPR1A、p-Smadl蛋白表達(dá)明顯降低(P0.05)。結(jié)論：牽張成骨病例回顧：通過(guò)牽張成骨技術(shù)治療骨缺損臨床療效確切,但治療周期長(zhǎng),可能出現(xiàn)相關(guān)并發(fā)癥。SD大鼠牽張成骨模型的建立：SD大鼠脛骨牽張成骨動(dòng)物造模的構(gòu)建：實(shí)驗(yàn)所建立的大鼠脛骨牽張成骨模型可靠實(shí)用,具有可重復(fù)性�；贐MP-Smad通路探討骨碎補(bǔ)總黃酮調(diào)節(jié)牽張成骨效能的機(jī)制研究：骨碎補(bǔ)總黃酮能促進(jìn)大鼠牽張成骨模型的成骨、礦化,這可能與其通過(guò)提高BMP-Smad通路因子的mRNA的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of distraction osteogenesis on bone defects by reviewing previous cases and to investigate the effect of distraction osteogenesis on bone defects in rats .
The rats were injected intraperitoneally with the same amount of normal saline by intraperitoneal injection of the inhibitor group and the traditional Chinese medicine plus blocker group , and the dosage of 3 mg / kg , the traditional Chinese medicine group and the traditional Chinese medicine plus blocker group were injected intraperitoneally . Once daily , the drug was administered for 30 days , that is , 10 days after the completion of the administration . After the drafting and the medication were completed , the indexes were detected . By comparing the images of each group , the gross conditions of the components after distraction osteogenesis were observed and compared .
The expression of BMP - smad pathway related genes was detected by qPCR .
The expression of BMP - smad pathway related protein in bone tissue was analyzed by Western blot . The difference of correlation between each group was analyzed by single factor analysis . Results : The clinical cases showed that 7 cases of bone defect had bony union , and the mean follow - up time was 18 鹵 5.6 months ;
1 case with needle tract infection , treated with bone union after treatment ;
The results showed that the bone quality and velocity of bone fragments were improved by X - ray and micro - CT bone scanning . The main factors of BMP - Smad pathway in traditional Chinese medicine group were higher than those in model group .
In comparison with model group , the expression of BMP2 , BMP4 , BMPR1A and Smadl decreased significantly ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R274.9

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本文編號(hào)：1881123