基因芯片篩選電針預(yù)處理心肌缺血再灌注大鼠細(xì)胞色素P450代謝通路相關(guān)差異表達(dá)基因
本文選題:基因芯片技術(shù) + 電針預(yù)處理。 參考:《遼寧中醫(yī)雜志》2017年04期
【摘要】:目的:利用基因芯片技術(shù)篩選電針預(yù)處理心肌缺血再灌注(MIR)大鼠心肌組織中細(xì)胞色素P450代謝通路相關(guān)差異表達(dá)的基因,尋找電針預(yù)處理對MIR大鼠產(chǎn)生保護(hù)作用的可能發(fā)生機(jī)制。方法:72只成年Wistar大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(IR)、夾脊組(JJ)、內(nèi)關(guān)組(NG)、陽陵泉組(YLQ)、曲池組(QC),每組12只。電針預(yù)處理組每天針刺30 min,連續(xù)針刺7 d。采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支的方法復(fù)制心肌缺血再灌注損傷模型。提取心肌組織總RNA并進(jìn)行評估,根據(jù)Agilent One-Color Microarray-Based Gene Expression Analysis實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行樣品標(biāo)記和芯片雜交,使用Agilent Feature Extraction、Gene Spring GX v12.1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,使用標(biāo)準(zhǔn)的富集計算方法進(jìn)行GO分析和Pathway分析。結(jié)果:電針預(yù)處理能夠調(diào)控缺血再灌注大鼠的基因表達(dá),其中夾脊穴組和內(nèi)關(guān)穴組對細(xì)胞色素P450代謝通路相關(guān)基因影響顯著,上調(diào)CYP450表氧化酶基因Cyp2b3、Cyp2c11、Cyp2b2、Cyp2s1,同時下調(diào)ω-羥化酶基因Cyp4a2、Cyp1a1、Cyp1b1,陽陵泉組和曲池組無顯著性差異。結(jié)論:多個基因參與心肌缺血再灌注過程,涉及多條信號通路,電針夾脊穴和內(nèi)關(guān)穴能夠上調(diào)CYP2家族基因,下調(diào)CYP1和CYP4家族基因,從分子水平闡明了其對MIRI的保護(hù)作用機(jī)制。
[Abstract]:Aim: to screen the differentially expressed genes related to cytochrome P450 metabolic pathway in myocardial tissue of rats with electroacupuncture preconditioning myocardial ischemia reperfusion (MIR) by gene chip technique, and to find out the possible mechanism of protective effect of electroacupuncture preconditioning on MIR rats. Methods Seventy-two adult Wistar rats, half male and half female, were randomly divided into sham-operated group, model group, JJN group, Neiguan group, Yanglingquan group and Quchi group, 12 rats in each group. The electroacupuncture preconditioning group was treated with acupuncture for 30 minutes per day for 7 days. The model of myocardial ischemia reperfusion injury was established by ligating the anterior descending branch of left coronary artery. Total RNA of myocardial tissue was extracted and evaluated. According to the experimental scheme of Agilent One-Color Microarray-Based Gene Expression Analysis, sample labeling and chip hybridization were carried out, data were processed with Agilent Feature exactionator Gene Spring GX v12.1, go analysis and Pathway analysis were carried out using standard enrichment calculation method. Results: electroacupuncture preconditioning could regulate the gene expression of ischemia reperfusion rats, including Jiaji group and Neiguan point group, which had significant effects on the genes related to cytochrome P450 metabolic pathway. The gene Cyp2b3, Cyp2c11, Cyp2b2Cyp2s1, and the down-regulation of 蠅 -hydroxylase gene, Cyp4a2Cyp1a1 and Cyp1b1, were up-regulated, but there was no significant difference between Yanglingquan group and Quchi group in the up-regulation of Cyp2b3, Cyp2c11, Cyp2b2, Cyp2s1 and Cyp1b1b1. Conclusion: multiple genes are involved in the process of myocardial ischemia-reperfusion. Electroacupuncture at Jiaji point and Neiguan point can up-regulate CYP2 family genes and down-regulate CYP1 and CYP4 family genes. The mechanism of its protective effect on MIRI is elucidated at molecular level.
【作者單位】: 山東中醫(yī)藥大學(xué);山東中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院;山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院針灸科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81373722) 山東省自然科學(xué)基金聯(lián)合專項(xiàng)(ZR2014HL100)
【分類號】:R245
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