本文選題：培土生金 + 慢性阻塞性肺疾病��； 參考：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：目的：1.介紹導(dǎo)師治療慢性阻塞性肺疾病的學(xué)術(shù)思想和臨證經(jīng)驗,總結(jié)其用藥規(guī)律及臨證化裁。2.觀察不同濃度培土生金法中藥對COPD模型大鼠體重,肺與膈肌組織形態(tài)學(xué)、動脈血氣(PH、PO2、PCO2)、膈肌細胞凋亡率、增殖率與凋亡率的比值、細胞凋亡途徑(Fas、FasL、Bax、Bcl-2)、核轉(zhuǎn)錄因子-κB (NP-κB P65)的影響,試從膈肌細胞增殖與凋亡角度探討培土生金法對COPD膈肌結(jié)構(gòu)的保護作用,并從細胞凋亡途徑及NP-κB通路探討該治法在調(diào)節(jié)膈肌細胞增殖/凋亡平衡方面的作用及機制,為臨床辯證應(yīng)用培土生金法防治COPD提供實驗依據(jù)。方法：1.通過仔細閱讀導(dǎo)師多年來發(fā)表論文、學(xué)術(shù)講稿,以及收集學(xué)生跟診過程中導(dǎo)師對慢阻肺的辨證論治、遣方用藥,整理總結(jié)孫志佳教授治療慢阻肺的學(xué)術(shù)思想、辨證思路和處方規(guī)律。2.取Wistar大鼠為研究對象,采用氣管內(nèi)注入脂多糖(LPS)聯(lián)合香煙煙熏法建立COPD大鼠模型,觀察不同濃度培土生金法方藥對大鼠一般情況,體重的影響。通過HE染色鏡下觀察大鼠肺和膈肌的組織形態(tài)學(xué)改變,結(jié)合動脈血氣分析(PH、PO2、 PCO2)共同評估COPD大鼠模型建立情況和培土生金法對COPD大鼠整體保護作用。3.通過免疫組化法檢測PCNA在膈肌中的表達,并計算增殖指數(shù)(PI),采用TUNEL方法檢測膈肌細胞凋亡情況,并計算凋亡指數(shù)(AI)及PI/AI值,評估COPD大鼠膈肌細胞增殖/凋亡平衡情況和培土生金法對其影響。4.通過免疫組化法檢測細胞凋亡途徑相關(guān)蛋白Fas、FasL、Bax、Bcl-2及NF-κB通路相關(guān)蛋白P65在膈肌中的表達,并采用RT-PCR技術(shù)檢測NF-κB P65 mRNA的表達,擬從細胞增殖與凋亡角度探討培土生金法對COPD的治療療效和對膈肌保護作用的作用機制。結(jié)果：1.導(dǎo)師孫志佳教授治療慢阻肺的學(xué)術(shù)思想可概括為3點：辨別虛實,治病求本,尤重脾土；審明疾病階段及病在何臟,重視臟腑相關(guān)；注重體質(zhì),防病傳變。臨證導(dǎo)師應(yīng)用培土生金法代表方六君子湯的基礎(chǔ)上多有發(fā)揮：做到分期辨治,急則治標,以祛邪為主,重清熱行氣,兼顧痰、瘀,不禁猛藥；穩(wěn)定治本,補虛為主,尤重培土生金；同時注意生活飲食調(diào)攝,增強肺康復(fù)鍛煉。導(dǎo)師臨證應(yīng)用六君子湯基礎(chǔ)上多有發(fā)揮,臨床療效顯著,進一步總結(jié)出導(dǎo)師培土生金基礎(chǔ)方進行下一步實驗驗證。2. COPD大鼠模型復(fù)制成功,肉眼觀察COPD模型組出現(xiàn)肺臟色暗紅偏紫,無光澤,有些夾蒼白色,肺體積增大；HE染色觀察肺組織有明顯氣道炎癥,肺泡結(jié)構(gòu)破壞,肺皰腔擴大等表現(xiàn)；膈肌組織出現(xiàn)不同程度的膈肌纖維排列紊亂、間隙增寬,部分出現(xiàn)膈肌纖維斷裂、溶解等。培土生金法能改善上述COPD肺和膈肌組織結(jié)構(gòu)的破壞。3. COPD模型組大鼠體重及動脈PO：明顯低于空白組,PCO2明顯高于空白組；而培土生金法高劑量中藥能明顯升高COPD大鼠體重,同時增加動脈血PO：,降低PCO2。4. COPD模型組大鼠膈肌細胞凋亡指數(shù)(AI)明顯高于空白組,增殖指數(shù)與凋亡指數(shù)的比值(PI/AI)明顯低于空白組；培土生金法中藥高劑量方藥能降低大鼠膈肌AI,同時能增高PI/AI。5. COPD模型組大鼠膈肌組織Fas、FasL、Bax、及NF-κ B P65蛋白表達升高,Bcl-2蛋白表達降低；培土生金法能明顯降低Fas、FasL、Bax、及NF-κ B P65蛋白的表達,同時能升高Bc卜2蛋白表達。NF-κB P65 mRNA基因在空白組、模型組、中藥組中的表達未見明顯差異。結(jié)論：1.導(dǎo)師孫志佳教授治療COPD注重辨別虛實及疾病所處階段,尤重脾土對COPD發(fā)病及治療的關(guān)鍵作用,同時兼顧各臟腑之間的整體聯(lián)系,關(guān)注個體體質(zhì)對COPD傳變的重要意義�；谝陨媳孀C思想,導(dǎo)師提出COPD的治療急性期以祛邪為主,重清熱行氣,兼顧痰瘀,用藥應(yīng)效專力宏,不能過于拘泥于老年體虛而妄用滋補；穩(wěn)定期以補虛為主,尤重培土生金。注意情志疏導(dǎo)與飲食調(diào)控相結(jié)合,加強氣息鍛煉、傳統(tǒng)功法等肺康復(fù)訓(xùn)練。2.培土生金法能減輕COPD大鼠肺和膈肌組織的損傷,改善大鼠體重、精神、活動度,呼吸道癥狀等整體狀態(tài)。3.培土生金法能有效改善COPD大鼠低氧血癥和高碳酸血癥發(fā)展趨勢,提高肺通氣和換氣功能,改善呼吸功能。4.培土生金法能通過抑制Fas/FasL死亡受體途徑和線粒體途徑相關(guān)蛋白在膈肌的表達,減少膈肌細胞的凋亡,從而起到對COPD肌的保護和呼吸功能的改善作用。5.培土生金法能通過抑制NF-κB通路關(guān)鍵蛋白P65的表達減少膈肌細胞的凋亡,維持膈肌細胞增殖與凋亡的平衡,此過程可能通過對NF-κB P65蛋白抑制減少,而使NF-κB P65蛋白的相對增多而產(chǎn)生,并不是通過增加NF-κB P65 mRNA轉(zhuǎn)錄表達而引起相應(yīng)效應(yīng)。
[Abstract]:Objective : 1 . To observe the effects of different concentrations of Chinese traditional medicine on the control of chronic obstructive pulmonary disease ( COPD ) in rats with chronic obstructive pulmonary disease ( COPD ) . To distinguish the deficiency , cure the disease and seek the book , especially the spleen soil ;
To examine the stage of disease and how the disease is in the viscera , and attach importance to the viscera - related ;
The present invention focuses on the constitution and the disease prevention and transmission , and the application of the Linzheng Shengjin method on the basis of the present invention has the advantages that the treatment of stages can be realized , the treatment is urgent , the symptoms are eliminated , the pathogenic factors are the main , the heat and heat circulation is heavy , the phlegm , the blood stasis , and the like are taken into account ;
stabilizing the constitution and tonifying deficiency , especially the cultivation of gold ;
At the same time , attention should be paid to life diet adjustment , to enhance the exercise of pulmonary rehabilitation . The clinical curative effect is remarkable , and the clinical curative effect is remarkable , and the next experimental verification is carried out on the basis of the foundation of the tutor cultivation . The model of COPD rats was successfully replicated , the visual observation of COPD model group showed that the lungs were dark red and purple , dull , some were white , the volume of lung increased ;
HE staining was used to observe the manifestations of airway inflammation , alveolar structure destruction and blister cavity enlargement .
The diaphragm muscle fibers were disordered in different degrees , the gaps were widened , and the rupture and dissolution of diaphragm muscle fibers appeared in some parts . The results showed that the structure of the above COPD lung and diaphragm muscle tissue could be improved . Body weight and arterial PO in COPD model group were significantly lower than those in blank group , and PCO2 was significantly higher than that in blank group .
However , the high - dose Chinese traditional medicine could obviously increase the weight of COPD rats and increase the PO of arterial blood , and reduce PCO2 . 4 . The apoptosis index ( AI ) was significantly higher in COPD model group than in blank group , and the ratio of proliferation index to apoptosis index ( PI / AI ) was significantly lower than that in blank group .
Traditional Chinese medicine high - dose prescription can reduce the AI of rat diaphragm while increasing PI / AI . 5 . The expression of Fas , FasL , Bax and NF - 魏B P65 protein in the diaphragm muscle tissue of COPD model group increased , and the expression of Bcl - 2 protein decreased .
The expression of Fas , FasL , Bax and NF - 魏B P65 protein can be significantly reduced by means of the cultivation method . The expression of NF - 魏B P65 mRNA in the blank group , the model group and the traditional Chinese medicine group is not obvious . Conclusion : 1 . Professor Sun Zhijia ' s treatment of COPD is a key role in the pathogenesis and treatment of COPD .
3 . The method can effectively improve the development trend of lung and diaphragm muscle in COPD rats , improve the lung ventilation and ventilation function , and improve the respiratory function .

【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259

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本文編號：1748152