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電針耳穴對(duì)硫酸卡那霉素慢性致聾豚鼠蝸神經(jīng)背核微小RNA表達(dá)影響的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-05 00:30

  本文選題:硫酸卡那霉素 切入點(diǎn):耳聾 出處:《西南醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:第一部分電針翳風(fēng)和聽宮穴對(duì)硫酸卡那霉素慢性致聾后豚鼠蝸神經(jīng)背核mi R-188及Nrp-2表達(dá)的影響目的:探討硫酸卡那霉素慢性致聾后豚鼠蝸神經(jīng)背核mi R-188及靶蛋白Nrp-2表達(dá)的變化,以及電針翳風(fēng)和聽宮穴對(duì)其表達(dá)的影響。方法:1、動(dòng)物分組:將無耳毒性藥物史且耳廓反射正常的65只成年雜色豚鼠隨機(jī)分為3組:對(duì)照組5只,硫酸卡那霉素模型組30只,硫酸卡那霉素+電針組30只。硫酸卡那霉素模型組和硫酸卡那霉素+電針組給予頸背部皮下注射硫酸卡那霉素(500mg/kg·day),每日1次,連續(xù)7日;電針組硫酸卡那霉素注射結(jié)束30min后予以電針刺激雙側(cè)翳風(fēng)、聽宮穴,每次15min,每日1次,連續(xù)7日;模型和電針組上述處理結(jié)束后常規(guī)飼養(yǎng)豚鼠,均分別于第1、7、14、28、56和140天采集蝸神經(jīng)核標(biāo)本并相應(yīng)分為6組。對(duì)照組給予頸背部皮下注射相同時(shí)間等劑量生理鹽水。2、對(duì)照組、模型組及電針組豚鼠分別提取蝸神經(jīng)背核總RNA后,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組標(biāo)本miR-188的相對(duì)表達(dá)量。3、對(duì)照組、模型組及電針組豚鼠分別提取蝸神經(jīng)背核總蛋白后,用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組標(biāo)本Nrp-2蛋白的表達(dá)。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(`x±s)表示;以方差分析比較多樣本均數(shù),以t檢驗(yàn)比較組間差異,P0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、對(duì)照組蝸神經(jīng)背核中miR-188的表達(dá)量為1.00±0.00,模型組第1、7、14、28、56和140天mi R-188的相對(duì)表達(dá)量分別為0.81±0.11、1.14±0.09、0.97±0.16、1.02±0.07、0.73±0.13和0.96±0.10;電針組第1、7、14、28、56和140天miR-188的相對(duì)表達(dá)量分別為1.17±0.13、1.13±0.07、1.31±0.12、1.06±0.10、0.93±0.15和1.29±0.14。2、硫酸卡那霉素可影響mi R-188的表達(dá)(F=85.95,P0.001),與對(duì)照組比較,模型組第1和56天miR-188表達(dá)減少(P0.05);電針耳穴可影響miR-188的表達(dá)(F=212.46,P0.001),與模型組比較,電針組第1、14、56和140天miR-188表達(dá)增加(P0.05)。3、對(duì)照組蝸神經(jīng)背核中Nrp-2表達(dá)相對(duì)灰度值為1.01±0.04,模型組第1、7、14、28、56和140天Nrp-2蛋白的表達(dá)相對(duì)灰度值分別為1.11±0.11、0.98±0.10、1.02±0.16、0.85±0.07、1.16±0.13和0.79±0.10;電針組第1、7、14、28、56和140天Nrp-2蛋白的表達(dá)相對(duì)灰度值分別為0.41±0.03、0.33±0.07、0.44±0.11、0.78±0.10、0.53±0.12和0.44±0.12。4、硫酸卡那霉素可影響Nrp-2的表達(dá)(F=32.95,P0.001),與對(duì)照組比較,模型組第1和56天Nrp-2蛋白表達(dá)增加(P0.05);電針耳穴可影響Nrp-2的表達(dá)(F=548.11,P0.001),與模型組比較,電針組第1、7、14、56和140天Nrp-2蛋白表達(dá)減少(P0.05)。結(jié)論:1.硫酸卡那霉素可能作用于miR-188/Nrp-2信號(hào)通路,通過下調(diào)miR-188的表達(dá),增加Nrp-2的表達(dá),參與硫酸卡那霉素慢性致聾的發(fā)生和發(fā)展過程。2.電針翳風(fēng)和聽宮穴可能作用于miR-188/Nrp-2信號(hào)通路,通過上調(diào)mi R-188的表達(dá),減少Nrp-2蛋白的表達(dá),促進(jìn)硫酸卡那霉素慢性致聾豚鼠DCN神經(jīng)元和突觸的重塑。第二部分電針翳風(fēng)和聽宮穴對(duì)硫酸卡那霉素慢性致聾后豚鼠蝸神經(jīng)背核mi R-132及p250GAP表達(dá)的影響目的:探討硫酸卡那霉素慢性致聾后豚鼠蝸神經(jīng)背核mi R-1328及靶蛋白p250GAP表達(dá)的變化,以及電針翳風(fēng)和聽宮穴對(duì)其表達(dá)的影響。方法:1、動(dòng)物分組:將無耳毒性藥物史且耳廓反射正常的65只成年雜色豚鼠隨機(jī)分為3組:對(duì)照組5只,硫酸卡那霉素模型組30只。硫酸卡那霉素+電針組30只硫酸卡那霉素模型組和硫酸卡那霉素+電針組給予頸背部皮下注射硫酸卡那霉素(500mg/kg·day),每日1次,連續(xù)7日;電針組硫酸卡那霉素注射結(jié)束30min后予以電針刺激雙側(cè)翳風(fēng)、聽宮穴,每次15min,每日1次,連續(xù)7日;模型和電針組上述處理結(jié)束后常規(guī)飼養(yǎng)豚鼠,均分別于第1、7、14、28、56和140天采集蝸神經(jīng)核標(biāo)本并相應(yīng)分為6組。對(duì)照組給予頸背部皮下注射相同時(shí)間等劑量生理鹽水。2、對(duì)照組、模型組及電針組豚鼠分別提取蝸神經(jīng)背核總RNA后,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組標(biāo)本mi R-132的相對(duì)表達(dá)量。3、對(duì)照組、模型組及電針組豚鼠分別提取蝸神經(jīng)背核總蛋白后,用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組標(biāo)本p250GAP蛋白的表達(dá)。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(`x±s)表示;以方差分析比較多樣本均數(shù),以t檢驗(yàn)比較組間差異,P0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、對(duì)照組蝸神經(jīng)背核中mi R-132的表達(dá)量為1.00±0.00,模型組第1、7、14、28、56和140天mi R-132的相對(duì)表達(dá)量分別為1.04±0.09、0.96±0.14、1.24±0.11、1.21±0.07、1.16±0.11和1.41±0.07;電針組第1、7、14、28、56和140天mi R-132的相對(duì)表達(dá)量分別為1.02±0.04、0.92±0.11、1.19±0.12、0.80±0.05、0.31±0.08和0.25±0.10。2、硫酸卡那霉素可影響mi R-132的表達(dá)(F=640.00,P0.001),與對(duì)照組比較,模型組第14、28、56和140天mi R-132表達(dá)增加(P0.05);電針耳穴可影響mi R-132的表達(dá)(F=275.63,P0.001),與模型組比較,電針組第28、56和140天mi R-132表達(dá)減少(P0.05)。3、對(duì)照組蝸神經(jīng)背核中p250GAP蛋白的表達(dá)相對(duì)灰度值為1.14±0.07,模型組第1、7、14、28、56和140天p250GAP蛋白的表達(dá)相對(duì)灰度值分別為1.12±0.06、1.01±0.11、0.83±0.15、0.79±0.07、0.77±0.13和0.72±0.10;電針組的第1、7、14、28、56和140天p250GAP蛋白的表達(dá)相對(duì)灰度值分別為1.01±0.03、1.08±0.07、0.76±0.11、1.13±0.10、1.12±0.12和0.87±0.12。4、硫酸卡那霉素可影響p250GAP的表達(dá)(F=510.42,P0.001),與對(duì)照組比較,模型組第14、28、56和140天p250GAP蛋白表達(dá)減少(P0.05);電針耳穴可影響p250GAP的表達(dá)(F=275.63,P0.001),與模型組比較,電針組第28、56和140天p250GAP蛋白表達(dá)增加(P0.05)。結(jié)論:1.硫酸卡那霉素可能作用于mi R-132/p250GAP信號(hào)通路,通過上調(diào)mi R-132的表達(dá),減少p250GAP的表達(dá),參與硫酸卡那霉素慢性致聾的發(fā)生和發(fā)展過程。2.電針翳風(fēng)和聽宮穴可能作用于mi R-132/p250GAP信號(hào)通路,通過下調(diào)mi R-132的表達(dá),增加p250GAP的表達(dá),影響硫酸卡那霉素慢性致聾后豚鼠蝸神經(jīng)背核的重塑過程。
[Abstract]:Methods : The expression of miR - 188 and target protein Nrp - 2 in the cochlear nerve of guinea pigs after chronic deafness were analyzed by Western blotting . The results showed that the relative expression of miR - 188 in the rats of control group , model group and EA group were 0.81 鹵 0.11 , 1.14 鹵 0.09 , 0.97 鹵 0.16 , 1.02 鹵 0.07 , 0.73 鹵 0.13 and 0.96 鹵 0.10 , respectively . In the control group , the relative expression of mi R - 132 was 1 . 02 鹵 0 . 09 , 0 . 96 鹵 0 . 14 , 1 . 19 鹵 0 . 12 , 0 . 80 鹵 0 . 07 , 0 . 31 鹵 0 . 11 and 0 . 25 鹵 0 . 10 . 2 .

【學(xué)位授予單位】:西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R245.97

【參考文獻(xiàn)】

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3 鄧力強(qiáng);電針耳穴對(duì)年齡相關(guān)性聾豚鼠聽覺中樞老化的影響及機(jī)制研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2013年

4 王s,

本文編號(hào):1712414


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