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針刺調(diào)節(jié)焦慮模型大鼠下丘腦C型利鈉肽受體的機制研究

發(fā)布時間:2018-04-02 12:30

  本文選題:針刺 切入點:焦慮模型大鼠 出處:《成都中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文


【摘要】:目的:本課題在前期本研究組證實針刺抗焦慮及其對中樞C型利鈉肽受體(natriuretic peptide receptor B, NPR-B)表達水平有下調(diào)作用的基礎(chǔ)上,應(yīng)用神經(jīng)化學(xué)激動劑激活中樞下丘腦室旁核(paraventricular nucleus of hypothalam us, PVN)的C型利鈉肽受體,觀察NPR-B激活是否可以阻斷針刺對焦慮模型大鼠焦慮行為和HPA軸的調(diào)節(jié)作用,反證下丘腦NPR-B受體是否參與了針刺抗焦慮作用,擬為臨床運用針刺治療焦慮障礙再提供部分科學(xué)實驗依據(jù)。方法:選用健康清潔級SD (Sprague-Dawley)雄性大鼠,馴化一周后測量體重,剔除體重不合要求的大鼠,運用SPSS 17.0.統(tǒng)計分析軟件將經(jīng)過篩選后的大鼠按照其行為學(xué)隨機分為6組,將其中三組合并為手術(shù)組,即空白(1組)、模型(1組)、針刺(1組)、手術(shù)(3組);隨后空白、模型、針刺三組繼續(xù)馴養(yǎng)一周,同時對手術(shù)組進行側(cè)腦室埋管手術(shù),即采用腦立體定位儀,根據(jù)PaXinos和Watson大鼠腦定位圖譜將注射導(dǎo)管植入大鼠腦部特定位置,后加以固定,術(shù)后恢復(fù)一周,按其行為學(xué)將手術(shù)組再次分為3組,即側(cè)腦室注射生理鹽水組(假注射組)、側(cè)腦室注射NPR-B激動劑組(模藥組)、側(cè)腦室注射NPR-B激動劑針刺組(針藥組)。其中模藥組、針藥組運用神經(jīng)化學(xué)受體激活技術(shù),即于側(cè)腦室微量注射NPR-B激動劑CNP22 (2μg/2μl),假注射組則于側(cè)腦室微量注射0.9%生理鹽水2μl。同時參照改良后文獻在15天的時間內(nèi)隨機安排7種刺激方法,建立不可預(yù)知的慢性情緒應(yīng)激(CUS)焦慮模型。針刺組選用手針針刺方法,即選取大鼠單側(cè)“內(nèi)關(guān)”、“神門”穴進行針刺治療,左右交替進行,隔日一次,每穴每次捻轉(zhuǎn)0.5min,每5min捻針1次,行平補平瀉手法,治療30min,針刺治療從造模開始至造模結(jié)束。造模結(jié)束后運用高架十字迷宮(elevated plus maze test, EPM)測試各組大鼠行為學(xué),同時運用免疫組化法(immunohistochemistry,IHC)檢測大鼠下丘腦室旁核C型利鈉肽(C-type natriuretic peptide, CNP)與其受體NPR-B,以及下丘腦室旁核促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)的表達情況,利用酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzymelin-ked immunosorbent assay, Elisa)來檢測血漿皮質(zhì)酮(corticosterone, CORT)的水平。結(jié)果:1、行為學(xué)測試結(jié)果:(1)OT%值:模型組較空白組顯著降低(P0.01),提示造模成功大鼠行為呈焦慮狀態(tài)。針刺組OT%值明顯高于模型組(P0.01),提示針刺能夠緩解焦慮癥狀。假注射組、模藥組、針藥組OT%值明顯低于針刺組(P0.01),針藥組OT%值與模藥組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)OE%值:針刺組與模型組相比有明顯升高(P0.05),其他組間比較未見統(tǒng)計學(xué)差異。2、下丘腦CNP、NPRB指標檢測結(jié)果:(1)CNP:與空白組相比,模型組、假注射組、模藥組、針藥組下丘腦CNP平均光密度明顯升高(均P0.01);與模型組比較,針刺組下丘腦CNP平均光密度值明顯降低(均P0.01);模藥組與針藥組下丘腦CNP平均光密度較假注射組均呈明顯增高趨勢,但不具統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);針藥組與模藥組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2) NPR-B:與空白組相比,除針刺組外其余各組下丘腦NPR-B表達均明顯升高(P0.01);針刺組較模型組則顯著降低(P0.01);與假注射組比,模藥組、針藥組下丘腦NPR-B表達呈顯著升高趨勢,但不具統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),針藥組低于模藥組,但差異不具顯著性(P0.05)。3、HPA軸相關(guān)指標檢測結(jié)果:(1)下丘腦CRH:模型組、假注射組、模藥組、針藥組下丘腦CRH水平均較空白組均明顯增高(P0.05),針刺組相比模型組降低明顯(P0.05);模藥組、針藥組較假注射組CRH均有升高,且針藥組升高明顯(P0.05)。(2)血漿CORT:模型組、模藥組較空白組明顯升高(P0.01),針刺組與模型組相比明顯降低(P0.01):針藥組較模藥組有所降低,但未顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1、針刺治療焦慮障礙效應(yīng)明顯,其作用可能與調(diào)節(jié)下丘腦CNP及其受體,抑制HPA軸的活性有關(guān),CNP-HPA軸可能為針刺治療焦慮障礙的又一重要作用途徑。2、下丘腦室旁核NPR-B受體激動劑能夠削弱針刺的抗焦慮效應(yīng),同時影響針刺對HPA軸的調(diào)節(jié)作用,進而證實中樞下丘腦室旁核NPR-B可能是針刺發(fā)揮抗焦慮效應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R245;R-332

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4 李曉U,

本文編號:1700430


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