本文選題：咳嗽變異性哮喘　切入點：抗支糖漿　出處：《黑龍江中醫(yī)藥大學》2016年博士論文

【摘要】：目的：探討抗支糖漿抑制咳嗽變異性哮喘氣道炎癥的作用及機制,為進一步深入研究及其臨床推廣應用提供依據(jù)。方法：將75只SPF級雄性豚鼠,體重200±30g,采用隨機數(shù)字均衡法分為5組：空白對照組(簡稱空白組)、模型對照組(簡稱模型組)、地塞米松組、抗支糖漿組、CAPE(咖啡酸苯乙酸酯)組,每組15只,適應性飼養(yǎng)1周后開始實驗。致敏方法：除空白組外其余各組于實驗的第1天肌注4%OVA溶液0.5m1,同時腹腔注射2％Al(OH)30.2ml；空白組以生理鹽水代替OVA致敏。藥物干預方法：各組于實驗的第15天起進行藥物干預,每日1次,持續(xù)14天。其中,抗支糖漿組每次按5g/kg體重的劑量給予灌胃,給藥體積設為1ml/100g體重；CAPE組以腹腔注射15mg/kg代替藥物灌胃：地塞米松組給予0.5mg/kg體重灌胃；空白組和模型組以生理鹽水代替藥物灌胃。霧化激發(fā)方法：從實驗第16天開始,除空白組外其余各組,藥物干預半小時后用1%OVA溶液霧化攻擊,隔日一次,共7次；空白組以生理鹽水代替OVA激發(fā)。末次霧化結束24小時內(nèi)取材,通過HE、ELISA、Western blot和Real-time PCR等技術,從組織學水平、細胞水平及分子水平分別觀察抗支糖漿對動物模型氣道及肺組織病理變化,細胞因子、炎癥介質(zhì),NF-κB信號通路上相關因子的蛋白及基因表達的影響。結果：1.咳嗽次數(shù)：與空白組比較,模型組明顯增多(P0.01)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組及CAPE組動物的咳嗽次數(shù)明顯減少(P0.01)。2.BALF中細胞分類與計數(shù)：與空白組比較,模型組BALF中白細胞總數(shù)顯著增多(P0.01),同時EOS絕對計數(shù)明顯增多(P0.01)；MAC比例減少,但絕對計數(shù)增多(P0.05)；BALF中EOS、LYM的比例均明顯增高(P0.05),其中尤以EOS比例增高最為明顯(p0.01)�？怪菨{組、地塞米松組、CAPE組BALF中白細胞總數(shù)、EOS絕對計數(shù)及EOS分類比例較模型組均有明顯降低(P0.01)；與空白組比較無顯著性差異(P0.05)。3.病理組織HE染色：模型組肺組織存在較多的炎性細胞,如嗜酸性粒細胞、淋巴細胞等浸潤,管腔內(nèi)可見上皮細胞脫落及分泌物增多,抗支糖漿組、地塞米松組與模型組比較,炎癥明顯減輕；CAPE組與模型組比較,炎癥減輕但不顯著。4.ELISA檢測顯示：與空白組比較,模型組BALF中細胞因子IL-1p. TNF-α、TGF-β1和血清中炎癥介質(zhì)ECP的含量明顯升高,BALF中IFN-γ的含量明顯降低(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組IL-1β、TNF-α、TGF-β1和ECP的含量明顯降低,IFN-γ的含量明顯升高(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,細胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1、IFN-γ和炎癥介質(zhì)ECP,無顯著性差異(P0.05)。5.免疫組化結果顯示：與空白組比較,模型組IKB表達明顯減少(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組IkB表達明顯增多(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,IκB表達無顯著性差異(P0.05)。6.Western BlOt檢測結果顯示：與空白組比較,模型組肺組織中NF-κB和TGF-β1蛋白表達明顯增多(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組NF-κB口TGF-β1蛋白表達明顯減少(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,無顯著性差異(P0.05)。7.Real-time PCR檢測結果顯示：與空白組比較,模型組肺組織中NF-κB和TGF-β 1的mRNA表達明顯增多(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組NF-κB和TGF-β1的mRNA表達明顯減少(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,無顯著性差異(P0.05)。結論：1.抗支糖漿可以改善CVA豚鼠的咳嗽等一般狀況,減輕其肺組織的炎性浸潤,減少粘膜下水腫及分泌物的產(chǎn)生,從而減輕氣道狹窄及氣道高反應性。2.抗支糖漿可以降低CVA豚鼠BALF中細胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1的含量,升高IFN-γ的含量；降低血清中炎癥介質(zhì)ECP的含量,從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。3.抗支糖漿可以上調(diào)CVA豚鼠肺組織中IκB的蛋白表達,下調(diào)NF-KB和TGF-β1的蛋白表達,從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。4.抗支糖漿可以下調(diào)CVA豚鼠肺組織中NF-κB和TGF-β1的mRNA表達,從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R272

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