本文選題：咳嗽變異性哮喘　切入點(diǎn)：抗支糖漿　出處：《黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：目的：探討抗支糖漿抑制咳嗽變異性哮喘氣道炎癥的作用及機(jī)制,為進(jìn)一步深入研究及其臨床推廣應(yīng)用提供依據(jù)。方法：將75只SPF級(jí)雄性豚鼠,體重200±30g,采用隨機(jī)數(shù)字均衡法分為5組：空白對(duì)照組(簡(jiǎn)稱空白組)、模型對(duì)照組(簡(jiǎn)稱模型組)、地塞米松組、抗支糖漿組、CAPE(咖啡酸苯乙酸酯)組,每組15只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。致敏方法：除空白組外其余各組于實(shí)驗(yàn)的第1天肌注4%OVA溶液0.5m1,同時(shí)腹腔注射2％Al(OH)30.2ml；空白組以生理鹽水代替OVA致敏。藥物干預(yù)方法：各組于實(shí)驗(yàn)的第15天起進(jìn)行藥物干預(yù),每日1次,持續(xù)14天。其中,抗支糖漿組每次按5g/kg體重的劑量給予灌胃,給藥體積設(shè)為1ml/100g體重；CAPE組以腹腔注射15mg/kg代替藥物灌胃：地塞米松組給予0.5mg/kg體重灌胃；空白組和模型組以生理鹽水代替藥物灌胃。霧化激發(fā)方法：從實(shí)驗(yàn)第16天開(kāi)始,除空白組外其余各組,藥物干預(yù)半小時(shí)后用1%OVA溶液霧化攻擊,隔日一次,共7次；空白組以生理鹽水代替OVA激發(fā)。末次霧化結(jié)束24小時(shí)內(nèi)取材,通過(guò)HE、ELISA、Western blot和Real-time PCR等技術(shù),從組織學(xué)水平、細(xì)胞水平及分子水平分別觀察抗支糖漿對(duì)動(dòng)物模型氣道及肺組織病理變化,細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì),NF-κB信號(hào)通路上相關(guān)因子的蛋白及基因表達(dá)的影響。結(jié)果：1.咳嗽次數(shù)：與空白組比較,模型組明顯增多(P0.01)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組及CAPE組動(dòng)物的咳嗽次數(shù)明顯減少(P0.01)。2.BALF中細(xì)胞分類與計(jì)數(shù)：與空白組比較,模型組BALF中白細(xì)胞總數(shù)顯著增多(P0.01),同時(shí)EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯增多(P0.01)；MAC比例減少,但絕對(duì)計(jì)數(shù)增多(P0.05)；BALF中EOS、LYM的比例均明顯增高(P0.05),其中尤以EOS比例增高最為明顯(p0.01)�？怪菨{組、地塞米松組、CAPE組BALF中白細(xì)胞總數(shù)、EOS絕對(duì)計(jì)數(shù)及EOS分類比例較模型組均有明顯降低(P0.01)；與空白組比較無(wú)顯著性差異(P0.05)。3.病理組織HE染色：模型組肺組織存在較多的炎性細(xì)胞,如嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等浸潤(rùn),管腔內(nèi)可見(jiàn)上皮細(xì)胞脫落及分泌物增多,抗支糖漿組、地塞米松組與模型組比較,炎癥明顯減輕；CAPE組與模型組比較,炎癥減輕但不顯著。4.ELISA檢測(cè)顯示：與空白組比較,模型組BALF中細(xì)胞因子IL-1p. TNF-α、TGF-β1和血清中炎癥介質(zhì)ECP的含量明顯升高,BALF中IFN-γ的含量明顯降低(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組IL-1β、TNF-α、TGF-β1和ECP的含量明顯降低,IFN-γ的含量明顯升高(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1、IFN-γ和炎癥介質(zhì)ECP,無(wú)顯著性差異(P0.05)。5.免疫組化結(jié)果顯示：與空白組比較,模型組IKB表達(dá)明顯減少(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組IkB表達(dá)明顯增多(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,IκB表達(dá)無(wú)顯著性差異(P0.05)。6.Western BlOt檢測(cè)結(jié)果顯示：與空白組比較,模型組肺組織中NF-κB和TGF-β1蛋白表達(dá)明顯增多(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組NF-κB口TGF-β1蛋白表達(dá)明顯減少(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,無(wú)顯著性差異(P0.05)。7.Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：與空白組比較,模型組肺組織中NF-κB和TGF-β 1的mRNA表達(dá)明顯增多(P0.05)；與模型組比較,抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組NF-κB和TGF-β1的mRNA表達(dá)明顯減少(P0.05)；抗支糖漿組、地塞米松組、CAPE組之間比較,無(wú)顯著性差異(P0.05)。結(jié)論：1.抗支糖漿可以改善CVA豚鼠的咳嗽等一般狀況,減輕其肺組織的炎性浸潤(rùn),減少粘膜下水腫及分泌物的產(chǎn)生,從而減輕氣道狹窄及氣道高反應(yīng)性。2.抗支糖漿可以降低CVA豚鼠BALF中細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1的含量,升高IFN-γ的含量；降低血清中炎癥介質(zhì)ECP的含量,從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。3.抗支糖漿可以上調(diào)CVA豚鼠肺組織中IκB的蛋白表達(dá),下調(diào)NF-KB和TGF-β1的蛋白表達(dá),從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。4.抗支糖漿可以下調(diào)CVA豚鼠肺組織中NF-κB和TGF-β1的mRNA表達(dá),從而起到抑制CVA氣道炎癥的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R272

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