本文選題：標(biāo)本配穴　切入點(diǎn)：電針　出處：《湖北中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：目的以鹽酸異丙腎上腺素(ISO)制作大鼠心肌缺血模型,在課題組前期對內(nèi)關(guān)穴防治心肌缺血研究成果的基礎(chǔ)上,根據(jù)心肌缺血中醫(yī)病因病機(jī),采用“標(biāo)本配穴”法(內(nèi)關(guān)、足三里、關(guān)元),對照常規(guī)配穴法(內(nèi)關(guān)、膻中、神門),觀察不同腧穴配伍法電針對大鼠心肌缺血損傷的防治效應(yīng);從氧化應(yīng)激損傷線粒體相關(guān)信號通路途徑,探討“標(biāo)本配穴”法電針防治心肌缺血的可能作用機(jī)制,為臨床防治及選穴配伍提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法選用50只體重在180~220g的SPF級雄性Wistar大鼠分成5組,每組各10只。正常組:每日上午以5mg/kg/d劑量大鼠背部皮下注射0.9%氯化鈉溶液,連續(xù)7d;模型組:每日上午以5mg/kg/d劑量大鼠背部皮下注射ISO溶液制作模型,連續(xù)7d,以心電圖S-T段變異振幅≥0.1m V為模型評價指標(biāo);標(biāo)本配穴組和常規(guī)配穴組:造模同模型組,從第一次皮下注射造模前兩組即分別電針大鼠雙內(nèi)關(guān)、雙足三里、關(guān)元穴和雙內(nèi)關(guān)、雙神門、膻中穴(HANS-200電針治療儀,疏密波、2-100Hz、1m A、10 min),以后每日上午皮下注射前電針處理,持續(xù)到造模后2周,共電針21次;白藜蘆醇組:造模同模型組,從第一次皮下注射造模前以5mg/kg/d劑量給予白藜蘆醇溶液灌胃處理,以后每日上午皮下注射前灌胃處理,持續(xù)到造模后2周,共灌胃21次。實(shí)驗(yàn)中觀察并記錄大鼠日常活動情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢測各組大鼠心電圖、血清心肌肌鈣蛋白T(c Tn T)及心肌超微結(jié)構(gòu)的變化,觀察“標(biāo)本配穴”法電針對心肌缺血的防治作用及腧穴配伍間的差異性;檢測各組大鼠心肌組織抗氧化活性酶及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的情況,觀察“標(biāo)本配穴”法電針抗心肌細(xì)胞氧化損傷的作用;采用蛋白免疫印跡和實(shí)時熒光定量PCR相關(guān)技術(shù),觀察各組大鼠心肌線粒體DNA(mt DNA)相關(guān)調(diào)控因子,從線粒體相關(guān)信號通路途徑探討“標(biāo)本配穴”法電針防治心肌缺血的可能作用機(jī)制;采用蛋白免疫印跡和免疫組化技術(shù)檢測大鼠心肌SIRT1的表達(dá),從SIRT1途徑探討“標(biāo)本配穴”法電針防治心肌缺血的可能作用機(jī)制。結(jié)果1.對各組大鼠日常情況的觀察:正常組一般情況良好。模型組實(shí)驗(yàn)造模第1d出現(xiàn)心跳加快,呼吸氣促、神倦嗜睡等現(xiàn)象;連續(xù)造模7d,模型組大鼠出現(xiàn)不同程度皮毛稀疏枯燥暗黃、鼠尾淡白、口唇紫紺、瞇眼萎靡,反應(yīng)遲鈍,日常進(jìn)食減少等癥狀。標(biāo)本配穴組、常規(guī)配穴組、白藜蘆醇組造模7d,大鼠皮毛輕微脫落且缺乏光澤,精神、飲食及反應(yīng)能力稍差,繼續(xù)電針和灌胃處理14d,三組日常情況明顯好轉(zhuǎn)。2.對大鼠心電圖S-T段和心率的影響:與正常組比較,模型組大鼠心電圖S-T段振幅明顯抬高,心率明顯加快,兩組間比較具有極顯著性差異(P0.01);電針和白藜蘆醇干預(yù)后,大鼠心電圖S-T段抬高幅度明顯下降,心率明顯減慢,與模型組間具有顯著性差異(P0.05)。其余三組間比較:兩電針組和白藜蘆醇組三組間心電圖S-T段振幅的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),兩電針組心率均較白藜蘆醇組明顯下降(P0.05),兩電針組間心率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.對大鼠血清c Tn T的影響:與正常組比較,模型組血清c Tn T明顯升高,兩組間比較具有極顯著性差異(P0.01);與模型組比較,兩電針組與白藜蘆醇組血清c Tn T明顯下降(P0.05)。其余三組比較:標(biāo)本配穴組與白藜蘆醇組血清c Tn T較常規(guī)配穴組下降更明顯(P0.05),標(biāo)本配穴組與白藜蘆醇組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.對大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)的影響:正常組心肌肌原纖維排列整齊規(guī)則,肌節(jié)結(jié)構(gòu)清晰可見,心肌線粒體結(jié)構(gòu)與形態(tài)清晰完整,雙層膜清楚;模型組心肌肌絲排列雜亂,肌節(jié)各帶模糊不清,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,線粒體數(shù)量明顯減少,大部分線粒體腫脹變形,嵴變疏變短,方向不規(guī)則,嵴丟失,空泡化。其余三組電鏡結(jié)果均較模型組明顯改善:大部分心肌肌絲排列整齊,線粒體數(shù)量明顯增加,線粒體空泡化減少,腫脹變形程度減輕,而標(biāo)本配穴組和白藜蘆醇組的損傷程度較常規(guī)配穴組輕。5.對大鼠心肌組織MDA、SOD、GSH-Px的影響:與正常組比較,模型組大鼠心肌組織MDA含量明顯升高,而SOD、GSH-Px含量明顯減少,兩組間比較具有極顯著性差異(P0.01);在經(jīng)過電針和白藜蘆醇干預(yù)后,兩電針組和白藜蘆醇組大鼠心肌組織MDA含量較模型組明顯下降(P0.05),SOD、GSH-Px含量明顯上升(P0.05)。其余三組間比較:標(biāo)本配穴組大鼠心肌MDA含量比常規(guī)配穴組明顯下降(P0.05),SOD、GSH-Px含量比常規(guī)配穴組明顯升高(P0.05);白藜蘆醇組大鼠心肌組織MDA含量與標(biāo)本配穴組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其SOD、GSH-Px值與常規(guī)配穴組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.對大鼠心肌mt DNA相關(guān)調(diào)控因子的影響:與正常組比較,模型組大鼠心肌PGC-1α、NRF-1、mt TFA表達(dá)明顯減少,兩組間比較具有極顯著性差異(P0.01);與模型組比較,兩電針組和白藜蘆醇組大鼠心肌PGC-1α、NRF-1、mt TFA表達(dá)明顯上升,與模型組比較具有顯著性差異(P0.05)。其余三組間比較:標(biāo)本配穴組PGC-1α表達(dá)與常規(guī)配穴組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),但其NRF-1和mt TFA表達(dá)高于常規(guī)配穴組(P0.05);白藜蘆醇組PGC-1α表達(dá)高于兩電針組(P0.05),但其NRF-1和mt TFA蛋白表達(dá)明顯高于常規(guī)配穴組(P0.05),與標(biāo)本配穴組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。7.對大鼠心肌SIRT1的影響:與正常組比較,模型組大鼠心肌SIRT1表達(dá)明顯減少,兩組間比較具有極顯著性差異(P0.01);與模型組比較,兩電針組和白藜蘆醇組大鼠心肌SIRT1表達(dá)明顯上升(P0.05)。其余三組間比較:標(biāo)本配穴組大鼠心肌SIRT1表達(dá)明顯高于常規(guī)配穴組(P0.05);標(biāo)本配穴組大鼠心肌SIRT1表達(dá)與白藜蘆醇組之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.電針能有效防治心肌缺血,“標(biāo)本配穴”法電針的防治作用優(yōu)于常規(guī)配穴法電針。2.“標(biāo)本配穴”法電針抗心肌缺血損傷的作用機(jī)制可能是通過激活抗氧化酶,抑制大量氧自由基釋放途徑,減輕心肌mt DNA氧化損傷,提高心肌細(xì)胞抗氧化損傷能力;同時通過上調(diào)內(nèi)源性SIRT1途徑,激活其下游PGC-1α/NRF-1/mt TFA信號通路,穩(wěn)定心肌mt DNA,減輕心肌線粒體功能損傷。
[Abstract]:Objective To study the effects of different acupuncture points on myocardial ischemia injury in rats with different acupuncture points . The rats were divided into 5 groups by subcutaneous injection of 0 . 9 % sodium chloride solution at 5 mg / kg / day . The changes of serum cardiac troponin T ( cTn T ) and myocardial ultrastructure were observed in rats . The effects of electric acupuncture on myocardial ischemia were observed by means of Western blot and immunohistochemistry . The contents of MDA , SOD and GSH - Px in myocardium of rats were significantly higher than those in normal group ( P0.05 ) . There was no significant difference between the expression of NRF - 1 and mt TFA ( P0.05 ) , but the expression of NRF - 1 and mt TFA increased significantly ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R245

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1667686