外周穴位電針對(duì)燒傷大鼠早期鎮(zhèn)痛效果及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2018-03-08 13:20
本文選題:燒傷 切入點(diǎn):電針 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:觀察外周穴位電針對(duì)淺Ⅱ度燒傷大鼠早期的鎮(zhèn)痛效果并且探討相關(guān)機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)包括兩個(gè)部分:(一)將80只SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為假傷組、單純燒傷組、電針組、假電針組,每組20只。假傷組大鼠右后足模擬致傷,余3組大鼠右后足建立淺Ⅱ度燙傷(下稱燒傷)模型。傷后12 h開始,對(duì)電針組和假電針組大鼠右后足分別進(jìn)行相當(dāng)于人體解剖部位的"足三里"和"三陰交"外周穴位電針和模擬電針治療,每天1次,每次治療30 min,連續(xù)治療3 d。每組取5只大鼠,于傷前及傷后12、24、36、48、60、72 h進(jìn)行機(jī)械痛閾值檢測(cè);每組另取5只大鼠,于前述時(shí)相點(diǎn)進(jìn)行熱痛閾值檢測(cè)。傷后48 h,各組取5只大鼠腦組織,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,觀察中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)區(qū)域膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及分布并計(jì)數(shù);同時(shí)取每組余下5只大鼠腦組織,進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)PAG區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP表達(dá)。對(duì)數(shù)據(jù)行重復(fù)測(cè)量方差分析、單因素方差分析和SNK檢驗(yàn)。(二)按隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為正常組、單純燒傷組、0.05FC打藥組、0.1FC打藥組,每組10只。分別采用尼式染色法、免疫熒光技術(shù)對(duì)大鼠PAG置管位置及FC藥效進(jìn)行驗(yàn)證。分別于燒傷前以及燒傷后12h、24h、36h、48h時(shí)相點(diǎn),檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠MWT,隔12h檢測(cè)一次,共計(jì)5次。然后余每組5只大鼠,收集大鼠PAG新鮮腦組織,進(jìn)行炎性因子序列檢測(cè)。結(jié)果:(一)與假傷組比較,單純燒傷組和假電針組大鼠傷前及傷后12 h機(jī)械痛閾值無(wú)明顯變化(P0.05),傷后24~72h機(jī)械痛閾值顯著降低(P0.05);電針組大鼠傷后36~72 h機(jī)械痛閾值顯著降低(P0.05)。電針組大鼠傷后24 h機(jī)械痛閾值較單純燒傷組和假電針組均顯著升高(P值均小于0.05)。(2)與假傷組比較,單純燒傷組和假電針組大鼠傷前熱痛閾值無(wú)明顯變化(P0.05),傷后12~72 h熱痛閾值顯著降低(P0.05);電針組大鼠傷后12~60 h熱痛閾值顯著降低(P0.05)。電針組大鼠傷后24~48 h熱痛閾值較單純燒傷組和假電針組均顯著升高(P0.05)。(3)假傷組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞分布彌散,細(xì)胞體積較小,胞體不明顯,發(fā)出的突起稀疏、纖細(xì)且短。單純燒傷組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞分布相對(duì)集中,胞體肥大、腫脹,突起增多且較長(zhǎng)。假電針組、電針組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及分布與單純燒傷組相似。假傷組、單純燒傷組、電針組、假電針組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)分別為(44±4)、(39±4)、(27±4)、(36±5)個(gè),單純燒傷組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)較假傷組顯著減少(P0.05),與假電針組相近(P0.05)。電針組大鼠PAG區(qū)域GFAP表達(dá)陽(yáng)性的星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)顯著少于單純燒傷組和假電針組(P0.05)。(4)假傷組、單純燒傷組、電針組、假電針組大鼠PAG區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP表達(dá)量分別為1.11±0.16、0.66±0.15、0.34±0.06、0.56±0.09,單純燒傷組大鼠PAG區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP表達(dá)量顯著低于假傷組(P0.05),與假電針組相近(P0.05)。電針組大鼠PAG區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP表達(dá)量顯著低于單純燒傷組和假電針組(P0.05)。(二)尼式染色于低倍顯微鏡下觀察可見(jiàn)清晰的導(dǎo)管軌跡,達(dá)到實(shí)驗(yàn)預(yù)期位置。大鼠燒傷后48h,PAG未打藥側(cè),可見(jiàn)大量活化星形膠質(zhì)細(xì)胞,分布廣泛且集中;未打藥側(cè)可發(fā)現(xiàn)少量活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞,分布稀散且數(shù)量極少。對(duì)置管大鼠進(jìn)行燒燙傷處理,與假傷組比較,燒傷組及藥物組大鼠均出現(xiàn)熱刺激痛閾值的顯著降低(P0.01),在大鼠傷后12~48 h時(shí)間段內(nèi),單純燒傷組與0.05FC打藥組熱刺激痛閾值無(wú)顯著差異(P0.05),0.1FC打藥組機(jī)械痛閾值顯著升高(P0.01)。在傷后12h時(shí)相點(diǎn)前后,0.1FC打藥組顯著高于0.05FC打藥組的機(jī)械痛閾值,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。炎性因子序列檢測(cè),可見(jiàn)0.05FC打藥組和燒傷組CXCL7含量明顯高于另外兩組。結(jié)論:外周穴位電針可緩解大鼠淺Ⅱ度燒傷早期伴隨的疼痛,其可能的機(jī)制為減少PAG區(qū)域星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化。
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本文編號(hào):1584067
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