按摩對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后膜修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2018-03-04 09:38
本文選題:按摩 切入點(diǎn):骨骼肌 出處:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:本研究通過觀察大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后,按摩對(duì)損傷肌細(xì)胞膜修復(fù)相關(guān)蛋白dysferlin、annexin A1及MG53分布和表達(dá)的影響以及對(duì)骨骼肌強(qiáng)直性收縮張力的影響,探討骨骼肌損傷后按摩促進(jìn)損傷肌細(xì)胞膜修復(fù)的可能機(jī)制。方法:1、42只成年SD雄性大鼠采用隨機(jī)抽取6只為正常對(duì)照組,剩余大鼠成功建立右下肢腓腸肌急性鈍挫傷模型后,隨機(jī)數(shù)字表法分為2組(n=18),包括自然恢復(fù)組和按摩治療組。按摩治療組在損傷后48h于損傷局部以垂直壓力為5N,頻率為120~150次/min的環(huán)形指揉法進(jìn)行按摩治療,治療時(shí)間10min,每日一次;正常對(duì)照組和自然恢復(fù)組不做按摩治療。每組分別于傷后7d、14d、21d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取6只大鼠取材進(jìn)行檢測(cè)。HE染色觀察損傷骨骼肌組織病理變化;免疫熒光雙標(biāo)記法標(biāo)記dysferlin和annexin A1,并運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡攝片定性觀察其在細(xì)胞內(nèi)分布及表達(dá)變化;采用Western-Blot法檢測(cè)dysferlin、annexin A1和MG53蛋白表達(dá)量變化。2、28只成年SD雄性大鼠隨機(jī)抽取4只為正常對(duì)照組,剩余大鼠相同方法建模后隨機(jī)抽24只建模成功大鼠隨機(jī)分為2組(n=12),包括自然恢復(fù)組和按摩治療組。相同方法進(jìn)行按摩治療,每組分別于損傷后7d、14d、21d隨機(jī)抽取4只進(jìn)行骨骼肌強(qiáng)直收縮張力檢測(cè)。結(jié)果:1、he染色結(jié)果顯示:正常對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,排列整齊,無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn);損傷后7d,自然恢復(fù)組和按摩治療組細(xì)胞形態(tài)均有明顯變形,細(xì)胞出現(xiàn)崩解、萎縮,細(xì)胞間隙明顯增大,炎性細(xì)胞明顯浸潤(rùn),兩組對(duì)比無(wú)明顯差異;損傷后14d,自然恢復(fù)組細(xì)胞明顯崩解、萎縮,細(xì)胞間隙有明顯結(jié)締組織填充,而按摩治療組細(xì)胞萎縮程度有所減輕,細(xì)胞排列相對(duì)緊密,可看到部分新生肌纖維和小血管;損傷后21d,自然恢復(fù)組出現(xiàn)部分新生肌細(xì)胞和小血管,細(xì)胞排列較為紊亂,細(xì)胞之間結(jié)締組織交錯(cuò)明顯,瘢痕組織已經(jīng)形成,而按摩治療組雖有少量結(jié)締組織填充,但細(xì)胞形態(tài)已經(jīng)有明顯恢復(fù),細(xì)胞排列整齊而緊密,新生血管明顯。2、免疫熒光雙標(biāo)記結(jié)果:用激光共聚焦顯微鏡定性觀察發(fā)現(xiàn):(1)正常對(duì)照組肌細(xì)胞中兩種蛋白熒光信號(hào)主要分布于細(xì)胞膜上及近膜區(qū)域,強(qiáng)度較弱,兩種蛋白熒光信號(hào)在細(xì)胞膜上無(wú)共表達(dá)現(xiàn)象;(2)損傷后各組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)兩種蛋白熒光信號(hào)強(qiáng)度較正常對(duì)照組都明顯增加,且信號(hào)呈彌散性分布。7d時(shí)該現(xiàn)象最為明顯,且自然恢復(fù)組和按摩治療組比較無(wú)明顯差異;(3)隨著時(shí)間點(diǎn)的變化,各組兩種蛋白的熒光強(qiáng)度均減弱,其中在14d和21d時(shí)按摩治療組熒光強(qiáng)度弱于自然恢復(fù)組;(4)隨著時(shí)間點(diǎn)的變化,兩種熒光信號(hào)在細(xì)胞膜上的共表達(dá)也隨之增加,在21d時(shí)按摩治療組共表達(dá)現(xiàn)象較自然恢復(fù)組顯著。3、Western-Blot檢測(cè)結(jié)果:(1)損傷后各組各時(shí)間點(diǎn)三種蛋白表達(dá)量均明顯高于正常對(duì)照組;(2)隨著時(shí)間的延長(zhǎng),各組dysferlin、annexin A1和MG53蛋白表達(dá)量逐漸降低,后一時(shí)間點(diǎn)與前一時(shí)間點(diǎn)比較,差異顯著(P0.05);(3)與自然恢復(fù)組相比,21d時(shí)按摩治療組dysferlin的表達(dá)明顯降低(P0.05);14d和21d時(shí)按摩治療組annexin A1的表達(dá)明顯降低(P0.05);7d、14d和21d時(shí)按摩治療組MG53的表達(dá)均明顯降低(P0.05)。4、強(qiáng)直性收縮張力檢測(cè)結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組相比,肌肉損傷后強(qiáng)直性收縮張力明顯升高(P0.05)。隨著時(shí)間點(diǎn)的變化,自然恢復(fù)組和按摩治療組強(qiáng)直性肌張力逐漸降低;7d和14d按摩治療組強(qiáng)直性肌張力無(wú)明顯差異(P0.05);21d時(shí)按摩治療組骨骼肌收縮張力接近正常組,與自然恢復(fù)組相比差異顯著(P0.05)。結(jié)論:骨骼肌急性頓挫傷后,按摩對(duì)膜修復(fù)相關(guān)蛋白的分布和表達(dá)起到了一定的調(diào)控作用,具體情況表現(xiàn)為:(1)按摩增加了損傷肌細(xì)胞dysferlin、annexin A1在細(xì)胞膜上的共表達(dá)現(xiàn)象,促進(jìn)了兩種蛋白的相互綁定。(2)按摩治療后,損傷肌細(xì)胞dysferlin、annexin A1和MG53蛋白表達(dá)量的變化規(guī)律與按摩抑制炎癥反應(yīng)發(fā)展規(guī)律相似,提示按摩促進(jìn)損傷肌細(xì)胞膜的修復(fù)可能與按摩能減輕損傷局部炎癥反應(yīng)相關(guān)。以上情況說明按摩有助于促進(jìn)損傷肌細(xì)胞膜的修復(fù)。此外,按摩能夠降低損傷后骨骼肌強(qiáng)直收縮張力,從功能上加速了骨骼肌損傷的修復(fù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R244.1
【參考文獻(xiàn)】
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3 侯懿p,
本文編號(hào):1565155
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