本文關(guān)鍵詞： 支氣管哮喘 穴位注射 穴位貼敷 NF-κB ET-1 IL-4 IL-5 草分枝桿菌　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:1.觀察穴位貼敷聯(lián)合穴位注射烏體林斯治療哮喘的效果。2.通過檢測肺組織白介素(IL)-4、IL-5,血清IL-4、免疫球蛋白E(Ig E)水平,觀察肺組織核因子-kappa B(NF-κB)活化情況,肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù),肺組織病理變化,探討貼敷聯(lián)合穴注在抑制哮喘氣道炎癥上的可能機(jī)制。3.通過檢測肺組織內(nèi)皮素-1(ET-1)的變化,探討穴注和貼敷對哮喘氣道高反應(yīng)影響。方法:65只清潔級級雄性Wistar大鼠(4周齡)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組{正常組、哮喘組、貼注組(貼敷+穴注組)、布地奈德組、聯(lián)合組},每組13只。哮喘組大鼠以10%卵蛋白分兩次(第1天,第8天)腹腔注射致敏,每次1ml(內(nèi)含OVA100mg,Al(OH)3100mg),第15天以2%卵蛋白連續(xù)激發(fā)制作哮喘模型。正常組以生理鹽水代替OVA進(jìn)行上述程序。觀察大鼠出現(xiàn)煩躁,咳嗽,呼吸加快,點(diǎn)頭呼吸,行動遲緩,口唇紫紺,甚至腹肌痙攣等癥狀,隨著激發(fā)次數(shù)的增加觀察到以上癥狀在每次激發(fā)的早期即出現(xiàn);取血檢測嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)計數(shù)和分類計數(shù),發(fā)現(xiàn)其增高符合相關(guān)文獻(xiàn)報道水平;取肺組織HE染色后鏡下觀察可見肺組織炎性浸潤;綜合以上3個條件認(rèn)為造模成功。造模成功后開始治療,貼注組選取大椎穴、雙定喘穴、雙肺俞穴、雙腎俞穴,使用科室自制貼敷藥物進(jìn)行貼敷,選取雙定喘、雙肺俞穴交替使用烏體林斯穴位注射(穴位注射后不再貼敷藥物),3次/周;布地奈德組給予吸入用布地奈德霧化吸入溶液霧化治療,1/日;聯(lián)合治療組采用貼敷、穴位注射、布地奈德霧化3種方法進(jìn)行治療,共治療一個月(計12次)。治療期間每周給予3次激發(fā)以模擬哮喘慢性持續(xù)期。實(shí)驗(yàn)過程中觀察各組大鼠一般情況,處死前再次給予激發(fā),24小時內(nèi)取材,標(biāo)本包括支氣管肺泡灌洗液(BALF)、動脈血及肺組織標(biāo)本。血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)大鼠BALF中總細(xì)胞數(shù)和分類比例;蘇木精-伊紅染色(HE)后鏡下觀察肺組織病理學(xué)改變并進(jìn)行炎細(xì)胞浸潤評分;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測大鼠血清總Ig E、IL-4,放射免疫法測定肺組織中ET-1、IL-4、IL-5;免疫組化染色后鏡下觀察肺組織NF-κBp65胞核陽性表達(dá)情況,顯微圖像分析系統(tǒng)分析陽性細(xì)胞積分光密度值(IOD)。結(jié)果:1與正常組比較,哮喘組肺組織病理結(jié)果顯示炎細(xì)胞浸潤和氣道損傷程度較重,炎細(xì)胞浸潤評分增高有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與哮喘組比較,貼注組、布地奈德組、聯(lián)合組,大鼠肺組織炎癥細(xì)胞浸潤評分均降低,有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05)。2與正常組比較,哮喘組大鼠體質(zhì)量降低(P0.01);BALF中細(xì)胞總數(shù)、中性%、淋巴%、EOS%,血清IL-4、Ig E,肺組織ET-1、IL-4、IL-5和NF-κB陽性細(xì)胞IOD值明顯升高(P均0.01)。3與哮喘組比較,各治療組大鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)、中性%、淋巴%、EOS%,血清IL-4、Ig E,肺組織ET-1、IL-5、IL-4和NF-κB陽性細(xì)胞IOD值均降低(P0.05);體重改變無差異(P0.05)。4各治療組之間比較:與貼敷組、布地奈德組比較,聯(lián)合組BALF中總細(xì)胞和分類計數(shù),血清IL-4、Ig E,肺組織ET-1、IL-5、IL-4和NF-κB陽性細(xì)胞IOD值降低更明顯(P均0.05);與貼注組比較,布地奈德組BALF中總細(xì)胞和分類計數(shù),血清IL-4、Ig E,肺組織IL-5、IL-4、NF-κB陽性細(xì)胞IOD值降低明顯(P0.05),肺組織ET-1改變無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5相關(guān)性分析肺組織IL-4與IOD呈正相關(guān)(r=0.952,P0.01);肺組織IL-5與IOD呈正相關(guān)(r=0.931,P0.01);血清IL-4與Ig E水平呈正相關(guān)(r=0.854,P0.01);肺組織IL-5和EOS%呈正相關(guān)(r=0.904,P0.01)。結(jié)論:1.通過抗原致敏并反復(fù)激發(fā)所致OVA特異性哮喘大鼠模型復(fù)制成功2.哮喘組BALF中細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)百分比,血清IL-4、Ig E水平,肺組織IL-5、IL-4、ET-1表達(dá)升高;NF-κB由胞漿進(jìn)入細(xì)胞核,IOD值升高,說明這些指標(biāo)參與哮喘發(fā)生;那么治療組的這些指標(biāo)的表達(dá)情況對治療后哮喘的評估以及治療方法有效性具有指導(dǎo)意義。3.穴位貼敷加穴位注射治療在改善以上指標(biāo)的作用不如單獨(dú)使用激素,但是,穴位貼敷加穴位注射治療并聯(lián)合激素后的效果較單獨(dú)使用任何兩法更加明顯。作用機(jī)制可能與(1)抑制NF-κB活化,進(jìn)而減少由此引發(fā)的Th2細(xì)胞分泌的炎癥因子IL-4、IL-5的產(chǎn)生(2)減少肺組織ET-1表達(dá),減輕氣道高反應(yīng)有關(guān)。
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本文編號：1468285