本文關(guān)鍵詞：足三針促進(jìn)結(jié)腸術(shù)后Cajal細(xì)胞修復(fù)的NO信號(hào)途徑機(jī)制研究　出處：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：外科術(shù)后并發(fā)癥主要以胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂最常見,術(shù)后往往因胃腸運(yùn)動(dòng)無(wú)力、胃腸內(nèi)容物通過(guò)障礙而出現(xiàn)腹部脹痛、惡心、嘔吐、排氣排便時(shí)間延長(zhǎng)等癥狀,其中以胃腸術(shù)后表現(xiàn)最為明顯,嚴(yán)重影響術(shù)后患者的后期恢復(fù)。胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂是由圍手術(shù)期間多種因素共同影響所致,因其發(fā)病機(jī)理未完全明確,臨床上缺乏有效的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療方法,故對(duì)術(shù)后胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂的防治越來(lái)越受到大家的關(guān)注以及作為研究的熱點(diǎn)。中醫(yī)具有因人而異、辨證論治等治療特色,在用于術(shù)后胃腸功能的調(diào)理方面療效明顯,針灸作為中醫(yī)的外治療法,因其沒有藥物對(duì)術(shù)后胃腸道的刺激,安全性高,越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外外科醫(yī)生的青睞。研究目的：“足三針”是廣州中醫(yī)藥大學(xué)靳瑞教授總結(jié)和創(chuàng)立的“靳三針”治法中最常用的穴組之一,由足三里、三陰交、太沖三對(duì)穴組成,針刺之能疏肝健脾,臨床上運(yùn)用腹部手術(shù)患者能顯著縮短排氣排便時(shí)間。本文在此研究基礎(chǔ)上,運(yùn)用“足三針”針刺結(jié)腸吻合術(shù)造模成功后的SD大鼠,觀察大鼠首次排便時(shí)間,并在針刺的不同時(shí)間段取材,觀察各大鼠小腸推進(jìn)率,檢測(cè)結(jié)腸組織中的一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合成酶(NOS)活性以及Cajal細(xì)胞的c-kit表達(dá)情況,與同時(shí)間段未進(jìn)行針刺干預(yù)的模型組相比較,以期從NO氣體信號(hào)通路途徑探討針刺足三針改善術(shù)后大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能的作用機(jī)制；同時(shí)通過(guò)觀察和比較針刺干預(yù)時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)大鼠相關(guān)指標(biāo)的影響是否有差異,為臨床上治療該病療程的選擇上提供依據(jù)。研究方法：文獻(xiàn)研究主要?dú)w納總結(jié)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)術(shù)后引起胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂病因、病理的研究和治療方法,以及古現(xiàn)代中醫(yī)對(duì)該病病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)、分析以及主要治療方法。實(shí)驗(yàn)研究主要采取結(jié)腸吻合術(shù)制造胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂的模型,并按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求隨機(jī)分為正常組、模型組、針刺組,后兩組根據(jù)干預(yù)的時(shí)間不同,組內(nèi)又隨機(jī)分為3天模型組、5天模型組、10天模型組和3天針刺組、5天針刺組、10天針刺組,每組各10只,總共7組。針刺每天傍晚進(jìn)行,并記錄各組手術(shù)后的首次排便時(shí)間,各組在特定時(shí)間段后的第2天,抽取lml墨水對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃,半小時(shí)后處死剖腹觀察各組大鼠的小腸推進(jìn)率,取結(jié)腸吻合術(shù)口處約1cm長(zhǎng)結(jié)腸,行NO、NOS、c-kit指標(biāo)的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、首次排便觀察結(jié)果：針刺組術(shù)后首次排便時(shí)間短于模型組(P0.01)；2、小腸推進(jìn)率觀察結(jié)果：與正常組比較,3天模型組、5天模型組、10天模型組、3天針刺組的小腸推進(jìn)率均低于正常組(P0.01),5天針刺組、10天針刺組與正常組無(wú)差異(P0.05)；各針刺組之間的比較,3天針刺組低于5天、10天針刺組的小腸推進(jìn)率(P0.01),5天針刺組與10天針刺組相比無(wú)差異(P0.05)；各模型組之間比較,3天模型組與5天模型組無(wú)差異(P0.05),5天模型組低于10天模型組(P0.05)；針刺組與模型組相比較,10天模型組與3天針刺組相比無(wú)差異(P0.05),而低于5天針刺組(P0.01)。3、NO含量的檢測(cè)結(jié)果：采用硝酸還原酶法檢測(cè)各組大鼠結(jié)腸組織中NO的含量,與正常組比較,模型組和針刺組的NO含量均高于正常組(P0.05)；各模型組之間比較,3天模型組NO含量均高于5天、10天模型組(P0.05),5天模型組高于10天模型組(P0.01)；各針刺組之間相比較,3天針刺組NO含量均高于5天、10天針刺組(P0.01),5天針刺組高于10天針刺組(P0.01)；針刺組與模型組之間相比較,3天針刺組與10天模型組NO含量無(wú)差異(P0.05),5天針刺組低于10模型組(P0.05)。4、NOS酶活性的檢測(cè)結(jié)果：采用L-精氨酸(L-Arg)法測(cè)定一氧化氮合成酶(NOS)酶活性,NOS根據(jù)是否需要依賴細(xì)胞內(nèi)鈣離子生理性調(diào)節(jié)又可以分為結(jié)構(gòu)型一氧化氮合成酶(cNOS)和誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)。比較各組大鼠NOS (TNOS、iNOS、cNOS)酶活性表達(dá),與正常組相比,各組TNOS、iNOS酶活性均高于正常組,cNOS均低于正常組(P0.05)；隨著時(shí)間的增加,模型組間TNOS、iNOS酶活性比較,3天組高于5天組,5天組高于10天組(P0.05),模型組間cNOS酶活性比較,3天組低于5天組,5天組低于10天組(P0.05)；針刺組間TNOS、iNOS酶活性比較,3天組高于5天組,5天組高于10天組(P0.05),針刺組間cNOS酶活性比較,3天組與5天組相比無(wú)明顯差異(P0.05),5天組低于10天組(P0.01)；模型組與針刺組各組間相比較,cNOS、iNOS酶活性3天針刺組與10天模型組無(wú)差異(P0.05)、TNOS酶活性5天針刺組與10天模型組相比無(wú)差異(P0.05)。5、各組c-kit表達(dá)的平均吸光值比較結(jié)果：與正常組比較,3天模型組、5天模型組、10天模型組、3天針刺組均低于正常組(P0.01)；各模型組之間相比較,3天模型組低于5天模型組,5天模型組低于10天模型組(P0.05)；各針刺組比較,3天針刺組均低于5天、10天針刺組(P0.01),5天針刺組與10天針刺組相比較無(wú)意義(P0.05)；針刺組與模型組相比較,3天針刺組與10天模型組相比較無(wú)差異(P0.05),5天針刺組高于10天模型組(P0.05)。結(jié)論：1.術(shù)后早期介入“足三針”針刺干預(yù)可以明顯縮短術(shù)后首次排便時(shí)間。2.(1)術(shù)后針刺可以改善大鼠進(jìn)食后的小腸推進(jìn)活動(dòng),增強(qiáng)胃腸活動(dòng)功能；(2)結(jié)腸吻合術(shù)后模型組大鼠有自愈傾向,隨著時(shí)間延長(zhǎng)大鼠小腸推進(jìn)活動(dòng)增強(qiáng),但與針刺組相比較,恢復(fù)速度較慢,且針刺第五天時(shí)小腸推進(jìn)活動(dòng)與正常組無(wú)明顯差異；3.結(jié)腸吻合術(shù)可以損傷胃腸起搏Cajal細(xì)胞,術(shù)后該細(xì)胞恢復(fù)與其生存微環(huán)境中的NO含量相關(guān),結(jié)腸吻合術(shù)會(huì)造成結(jié)腸組織NO含量超載,早期針刺干預(yù)能抑制NO的生成,隨著針刺干預(yù)時(shí)間增加,可逐漸降低結(jié)腸吻合口組織中的NO含量；4.NO的生成量與NOS酶活性相關(guān),在手術(shù)應(yīng)激條件下,短時(shí)間內(nèi)會(huì)促進(jìn)iNOS(誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶)、抑制cNOS(結(jié)構(gòu)型一氧化氮合成酶)的酶活性表達(dá),針刺可降低iNOS的酶活性,促進(jìn)cNOS的酶活性表達(dá)；隨著針刺時(shí)間的延長(zhǎng),TNOS和iNOS酶活性均降低,但針刺組iNOS降低幅度明顯高于相同時(shí)間段的模型組,cNOS增長(zhǎng)趨勢(shì)高于模型組,但針刺第10天時(shí)仍未恢復(fù)正常；5.c-kit蛋白是Cajal細(xì)胞發(fā)育和功能表現(xiàn)的標(biāo)志,針刺能降低結(jié)腸吻合術(shù)對(duì)Cajal細(xì)胞的損傷程度,并能促進(jìn)c-kit的表達(dá),促進(jìn)術(shù)后Cajal細(xì)胞的再生及功能恢復(fù)；6.針刺干預(yù)結(jié)腸吻合術(shù)后大鼠可能通過(guò)促進(jìn)起保護(hù)作用cNOS的酶活性表達(dá),降低起抑制作用iNOS酶活性的表達(dá),共同調(diào)節(jié)NO的生成,以減輕手術(shù)對(duì)Cajal細(xì)胞的損傷,并促進(jìn)Cajal細(xì)胞的再生,盡快恢復(fù)胃腸道運(yùn)動(dòng)功能。7.結(jié)腸吻合術(shù)對(duì)腸道損傷較大,恢復(fù)時(shí)間較長(zhǎng),短時(shí)間針刺可以減輕胃腸道反應(yīng),減短首次排便時(shí)間,但仍需較長(zhǎng)時(shí)間針刺才能形成有利于Cajal細(xì)胞的微環(huán)境,來(lái)改善胃腸道功能活動(dòng),促進(jìn)術(shù)后的整體恢復(fù)。
[Abstract]:The postoperative complications of gastrointestinal motility are mainly caused by gastrointestinal motility disorder , and the postoperative recovery of gastrointestinal motility is most common due to the weakness of gastrointestinal motility . The gastrointestinal motility disorder is caused by a number of factors during perioperative period . In this paper , the rats were randomly divided into 3 - day model group , 5 - day model group , 10 - day model group , 3 - day acupuncture group , 5 - day acupuncture group and 10 - day acupuncture group . Compared with the normal group , no difference was found between the acupuncture group and the normal group ( P0.05 ) . Compared with the normal group , no difference was found between the acupuncture group and the normal group ( P0.05 ) . Compared with the normal group , there was no difference between the acupuncture group and the normal group ( P0.05 ) . ( 1 ) After operation , the activity of nitric oxide synthase ( iNOS ) and the activity of nitric oxide synthase ( NO ) in colon tissues were significantly decreased .

【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R245

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