本文關(guān)鍵詞：龜鹿二仙膠對(duì)成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究　出處：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 骨質(zhì)疏松 龜鹿二仙膠 成骨細(xì)胞 Ⅰ型膠原 TGF-β

【摘要】：背景：研究表明Ⅰ型膠原與骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis, OP)有著密切聯(lián)系。Ⅰ型膠原由Colla1及Colla2基因編碼,可受轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)調(diào)控。TGF-β1、 TGF-β2是TGF-βs的兩個(gè)異構(gòu)體。中藥龜鹿二仙膠可以治療骨質(zhì)疏松癥,以往研究多以臨床療效觀察為主,與Ⅰ型膠原有關(guān)的研究較少。目的：研究龜鹿二仙膠對(duì)成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原基因表達(dá)的影響,探索龜鹿二仙膠治療OP的機(jī)制。方法：取SD大鼠100只,隨機(jī)分為空白組、龜鹿二仙膠組(低劑量)、龜鹿二仙膠組(中劑量)、龜鹿二仙膠組(高劑量)、骨化三醇組。每天灌胃1次,持續(xù)7d,末次給藥2h后腹主動(dòng)脈采血制成含藥血清條件培養(yǎng)基培養(yǎng)成骨細(xì)胞。通過(guò)MTT法及活細(xì)胞形態(tài)觀察來(lái)了解含藥血清對(duì)成骨細(xì)胞增殖及凋亡的影響。應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)各組成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原及TGF-β蛋白表達(dá)水平。運(yùn)用PCR (RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)各組成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原及TGF-β的mRNA表達(dá)。結(jié)果：(1)MTT結(jié)果顯示：龜鹿二仙膠各組的成骨細(xì)胞無(wú)明顯增殖。骨化三醇組的成骨細(xì)胞有明顯增殖(P0.05)。細(xì)胞活細(xì)胞染色提示：骨化三醇組及龜鹿二仙膠各組的成骨細(xì)胞無(wú)顯著的凋亡。(2) RT-PCR法結(jié)果顯示：骨化三醇組與龜鹿二仙膠各組Colla1及Colla2mRNA的水平均有增加(P0.01)；龜鹿二仙膠中、高劑量組Colla1及Colla2mRNA水平增加較明顯(P0.05),龜鹿二仙膠高劑量組較中劑量組Colla1及Colla2mRNA水平增加不明顯(P0.05)；骨化三醇組TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平無(wú)明顯變化(p0.05)；龜鹿二仙膠各組TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平均有增加(P0.01)；且龜鹿二仙膠中、高劑量組TGF-β1、TGF-β2 mRNA水平增加一致,比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3) Western blot結(jié)果提示：第24小時(shí),龜鹿二仙膠高劑量組能使成骨細(xì)胞Colla1及Colla2蛋白合成增加(P0.05)。第48小時(shí),骨化三醇組、龜鹿二仙膠各組均能使成骨細(xì)Colla1及Colla2蛋白合成增加(P0.01)；龜鹿二仙膠高、中劑量組之間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；第24、48小時(shí),骨化三醇組TGF-β1及TGF-β2蛋白合成無(wú)明顯變化(P0.05)；在24小時(shí),龜鹿二仙膠高劑量組TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有顯著增強(qiáng)(P0.01),龜鹿二仙膠低、中劑量組TGF-β1及TGF-β2蛋白合成無(wú)明顯變化(P0.05)；48小時(shí),龜鹿二仙膠各組TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P0.01)。龜鹿二仙膠高、中劑量組之間無(wú)顯著區(qū)別(P0.05)。結(jié)論：龜鹿二仙膠可以促進(jìn)Ⅰ型膠原基因的表達(dá),其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)細(xì)胞因子TGF-β有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R259

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