本文關(guān)鍵詞：miR-30a對結(jié)直腸癌細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)分子機制的初步研究

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【摘要】：目的研究mi R-30a對結(jié)直腸癌細胞侵襲遷移的影響并初步探討其可能的分子機制。方法1 mi R-30a的相對表達量采用莖環(huán)實時熒光定量PCR技術(shù)檢測不同轉(zhuǎn)移能力的結(jié)直腸癌細胞株中mi R-30a的相對表達量,初步分析其與結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移是否相關(guān)。2 mi R-30a對結(jié)直腸癌細胞侵襲遷移的影響1)構(gòu)建pre-mi R-30a過表達的慢病毒顆粒,并感染mi R-30a表達量較低的SW620。熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染情況,實時熒光定量PCR檢測轉(zhuǎn)染效率。2)利用劃痕實驗檢測過表達mi R-30a后SW620的遷移特性,Transwell小室侵襲實驗檢測其侵襲性。3 mi R-30a抑制結(jié)直腸癌侵襲遷移的分子機制1)mi R-30a作用靶點的預測以has-mi R-30a為檢索詞,利用數(shù)據(jù)庫Targetscan、mi Randa(micro RNA.org)、mi RDB對mi R-30a進行靶基因的預測,挑選軟件交集較多以及預測值較高的作為靶點,即AEG-1/MTDH作為研究對象。2)Western blot檢測過表達mi R-30a后AEG-1/MTDH蛋白表達水平,實時熒光定量PCR技術(shù)檢測相應AEG-1/MTDHm RNA的相對表達量。4統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析,實驗數(shù)據(jù)均以均值±標準差(x±s)表示,采用兩組獨立樣本t檢驗進行兩組間差異的比較,采用單因素方差分析進行多組計量間資料比較,采用LSD-t檢驗進行兩組間資料的比較,檢驗水準α=0.05。結(jié)果1.相對于SW480(1.00±0.00)而言,mi R-30a在Caco2中的相對表達量為0.88±0.084,差異沒有統(tǒng)計學意義(t=2.547,p=0.126);在轉(zhuǎn)移性細胞系(HT-29、HCT116和SW620)中的相對表達量均顯著降低,分別是0.74±0.081;0.37±0.055;0.29±0.040,差異均具有統(tǒng)計學意義(t HT-29=5.600,P=0.030;t HCT-116=19.92,p=0.002;t SW620=30.74,p=0.001)其中在高度惡性的SW620細胞系中表達最低。2.生物學軟件分析mi R-30a可能的靶點是AEG-1/MTDH;在SW620中轉(zhuǎn)染pre-mi R-30a后AEG-1/MTDHm RNA和蛋白的表達量明顯下降,差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)論1.mi R-30a在結(jié)直腸癌細胞中低表達,而且低表達可能預示著結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移。2.mi R-30a可能通過下調(diào)AEG-1/MTDH來抑制結(jié)直腸癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。
【關(guān)鍵詞】：miR-30a AEG-1/MTDH 侵襲 轉(zhuǎn)移 結(jié)直腸癌細胞
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.34
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 中英文縮略表10-11
• 引言11-15
• 第一部分miR-30a在不同轉(zhuǎn)移能力結(jié)直腸癌細胞中的表達15-24
• 1 材料及儀器15-17
• 2 實驗方法17-21
• 3 實驗結(jié)果21-22
• 4 小結(jié)22-23
• 5 結(jié)論23-24
• 第二部分miR-30a參與結(jié)直腸癌侵襲遷移的相關(guān)實驗研究24-30
• 1 材料及儀器24
• 2 實驗方法24-26
• 3 實驗結(jié)果26-29
• 4 小結(jié)29
• 5 結(jié)論29-30
• 第三部分miR-30a抑制結(jié)直腸癌細胞侵襲和遷移的分子機制30-39
• 1 材料及儀器30-31
• 2 實驗方法31-35
• 3 實驗結(jié)果35-37
• 4 小結(jié)37-38
• 5 結(jié)論38-39
• 討論39-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻43-46
• 綜述 microRNA在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的研究進展46-68
• 參考文獻58-68
• 個人簡歷、在學期間發(fā)表的學術(shù)論文68-69
• 致謝69

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 伍威;張海平;商建;鄒金艷;易三鳳;夏冰;鄧長生;林軍;;結(jié)直腸癌中巨噬細胞加帽蛋白的表達及其臨床病理學意義[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2014年05期

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本文編號：975970