本文關(guān)鍵詞：組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶GCN5在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用研究

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【摘要】：膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的原發(fā)性腦腫瘤,預(yù)后較差。膠質(zhì)瘤存在多種分子基因變異機(jī)制,除了一些癌基因和抑癌基因之外,還存在有表觀遺傳學(xué)機(jī)制的改變。在表觀遺傳學(xué)中,有兩種最為常見(jiàn)的的調(diào)節(jié)方式：組蛋白修飾及DNA甲基化。組蛋白修飾中以組蛋白乙酰化最為常見(jiàn)。組蛋白乙酰化過(guò)程中最為重要的酶是組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(Histone Acetyltransferases, HATs)和組蛋白去乙�；�(Histone deacetylases, HDACs).賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶GCN5是第一個(gè)在酵母中被發(fā)現(xiàn)的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶,它引起的賴氨酸位點(diǎn)的乙酰化能使組蛋白與DNA的結(jié)合減弱,有利于起始基因轉(zhuǎn)錄。賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶GCN5調(diào)節(jié)許多細(xì)胞過(guò)程,如細(xì)胞增殖、分化、細(xì)胞周期及DNA損傷的修復(fù)。然而,其在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的生物學(xué)作用尚處于探究階段。在本研究中,我們通過(guò)Western blot和RT-PCR發(fā)現(xiàn)在膠質(zhì)瘤病人組織樣品和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中GCN5蛋白水平和mRNA水平都出現(xiàn)了高表達(dá)。同時(shí)還證明,GCN5的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤組織PCNA、MMP9的表達(dá)均呈正相關(guān)。高級(jí)別膠質(zhì)瘤中的GCN5表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤組織。在我們的血清饑餓和釋放模型實(shí)驗(yàn)中,GCN5與PCNA水平隨時(shí)間推移均逐漸增加。所有這些結(jié)果表明GCN5參與膠質(zhì)瘤的發(fā)展。在U87和U251細(xì)胞系中,通過(guò)Sirna于擾降低GCN5表達(dá),我們發(fā)現(xiàn)GCN5下調(diào)抑制細(xì)胞增殖、入侵和集落形成能力。此外,GCN5下調(diào)抑制p-STAT3、 p-AKT、p-ERK1/2、PCNA、MMP9表達(dá)和上調(diào)p21的表達(dá)。總之,GCN5通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和入侵,在膠質(zhì)瘤發(fā)生中展現(xiàn)出重要的作用,這表明GCN5是一個(gè)潛在的治療膠質(zhì)瘤的靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)膠質(zhì)瘤 GCN5 STAT3
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-9
• 第一章 前言9-16
• 1.1 膠質(zhì)瘤9-11
• 1.1.1 病因與發(fā)病機(jī)制9
• 1.1.2 分類9
• 1.1.3 膠質(zhì)瘤分級(jí)9-10
• 1.1.4 臨床表現(xiàn)10
• 1.1.5 診斷與鑒別診斷10
• 1.1.6 治療及預(yù)后10-11
• 1.2 表觀遺傳學(xué)與腫瘤11-12
• 1.2.1 DNA甲基化11
• 1.2.2 組蛋白修飾11-12
• 1.3 GCN5概述12-14
• 1.3.1 GCN5結(jié)構(gòu)12-13
• 1.3.2 GCN5與腫瘤13
• 1.3.3 GCN5在腫瘤中分子機(jī)制13-14
• 1.4 PCNA概述14-15
• 1.5 MMP9概述15
• 1.6 立題背景15-16
• 第二章 材料與方法16-23
• 2.1 材料16-18
• 2.1.1 膠質(zhì)瘤組織、細(xì)胞和質(zhì)粒16-17
• 2.1.2 主要試劑17-18
• 2.1.3 主要儀器18
• 2.2 方法18-23
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)18-19
• 2.2.2 siRNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染19-20
• 2.2.3 MTS測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)20
• 2.2.4 集落形成實(shí)驗(yàn)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)20
• 2.2.5 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)20
• 2.2.6 蛋白樣品收集20-21
• 2.2.7 蛋白濃度測(cè)定21
• 2.2.8 蛋白質(zhì)SDS-PAGE凝膠電泳以及Western boltting分析21-22
• 2.2.9 RNA提取22
• 2.2.10 CDNA合成22-23
• 2.2.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)23
• 2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23
• 第三章 結(jié)果與討論23-32
• 3.1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中GCN5與PCNA、MMP9均廣泛過(guò)表達(dá),并呈正相關(guān)23-25
• 3.2 神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中GCN5于高級(jí)別組中高表達(dá)25-26
• 3.3 膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中GCN5廣泛過(guò)表達(dá)26-27
• 3.4 GCN5下調(diào)抑制細(xì)胞增殖和集落形成27-29
• 3.5 GCN5下調(diào)抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲能力29-30
• 3.6 GCN5下調(diào)抑制p-STAT3、p-AKT、p-ERK1/2、PCNA、MMP9表達(dá)和上調(diào)p21的表達(dá)30-31
• 3.7 討論與分析31-32
• 參考文獻(xiàn)32-38
• 綜述38-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 本人簡(jiǎn)歷44
• 研究成果44-45
• 致謝45

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;The Molecular Mechanism of HDAC Inhibitors in Anticancer Effects[J];Cellular & Molecular Immunology;2006年04期

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本文編號(hào)：899978