本文關(guān)鍵詞：姜黃素對(duì)食管癌細(xì)胞Eca-109增殖及Wnt信號(hào)通路影響的研究

  更多相關(guān)文章： 姜黃素 食管癌細(xì)胞Eca-109 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 cyclinB1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路 β-catenin GSK-3? c-myc

【摘要】：目的:研究中藥姜黃素體外對(duì)食管癌細(xì)胞Eca-109增殖、細(xì)胞周期、凋亡以及對(duì)Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的影響,為姜黃素的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。方法:1采用MTS法分析不同濃度(10、20、40μmol/L)姜黃素干預(yù)不同時(shí)間后,對(duì)Eca-109細(xì)胞增殖的抑制作用。2應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)經(jīng)不同濃度(10、20、40μmol/L)姜黃素作用24h、48h、72h后,Eca-109細(xì)胞的周期分布和凋亡率。應(yīng)用Q-PCR和western-blot方法檢測(cè)周期蛋白Cyclin B1基因和蛋白的表達(dá)水平。3用Q-PCR法和western-blot方法檢測(cè)經(jīng)不同濃度(10、20、40μmol/L)姜黃素作用48h后,Eca-109細(xì)胞Wnt信號(hào)通路中β-catenin、關(guān)鍵酶GSK-3β、下游因子c-myc m RNA和蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:1 MTS試驗(yàn)結(jié)果顯示,經(jīng)不同濃度(10、20、40μmol/L)姜黃素干預(yù)24、48、72h后,對(duì)Eca-109細(xì)胞增殖抑制率呈上升趨勢(shì)。姜黃素濃度越大,對(duì)細(xì)胞增殖抑制作用越明顯,并呈時(shí)間、劑量依賴(lài)性(P0.05)。2流式細(xì)胞術(shù)測(cè)細(xì)胞結(jié)果顯示,經(jīng)不同濃度(10、20、40μmol/L)姜黃素干預(yù)48小時(shí)后,Eca-109細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率發(fā)生明顯變化,G0/G1期細(xì)胞比例明顯下降(P0.01),G2/M期細(xì)胞比例明顯增高(P0.01);細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.01),姜黃素濃度越高,差異越明顯。Q-PCR和Western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示,經(jīng)姜黃素處理后,Cyclin B1m RNA和蛋白表達(dá)水平降低(P0.05)。3 Q-PCR和western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示,姜黃素干預(yù)后,與對(duì)照組細(xì)胞相比,Eca-109細(xì)胞β-catenin、c-myc m RNA和蛋白表達(dá)水平降低,有顯著性差異(P0.01),GSK-3?m RNA和蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào),有顯著性差異(P0.01)。結(jié)論:姜黃素能使Eca-109細(xì)胞發(fā)生G2/M期阻滯,抑制Eca-109細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。姜黃素可通過(guò)上調(diào)細(xì)胞關(guān)鍵酶GSK-3?表達(dá)量,減少β-catenin的表達(dá),阻斷信號(hào)傳導(dǎo)通路,抑制下游靶基因c-myc的表達(dá),進(jìn)而抑制增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：姜黃素 食管癌細(xì)胞Eca-109 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 cyclinB1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路 β-catenin GSK-3? c-myc
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 英文縮寫(xiě)8-9
• 引言9-10
• 第一部分 姜黃素對(duì)食管癌細(xì)胞Eca-109增殖的抑制作用10-29
• 前言10
• 材料與方法10-19
• 結(jié)果19-20
• 附圖20-24
• 附表24-26
• 討論26-27
• 小結(jié)27-28
• 參考文獻(xiàn)28-29
• 第二部分 姜黃素對(duì)食管癌細(xì)胞Eca-109 Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的影響29-45
• 前言29
• 材料與方法29-36
• 結(jié)果36-38
• 附圖38-40
• 附表40-41
• 討論41-43
• 小結(jié)43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 綜述 姜黃素抗腫瘤研究進(jìn)展45-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 致謝52-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：896413