本文關(guān)鍵詞：Gata6在胰島素瘤中的作用及機制研究

  更多相關(guān)文章： 胰島素瘤 Gata6 ROS 凋亡

【摘要】：目的:胰島素瘤是一類低增殖率腫瘤,發(fā)病比較罕見,對其發(fā)病機制了解甚少。近來研究發(fā)現(xiàn)Gata6在調(diào)控胰島細胞的分化的過程中發(fā)揮重要作用,亦參與體內(nèi)一些腫瘤的形成。目前關(guān)于Gata6在胰島素瘤中表達及作用未見報道,本實驗擬探討Gata6在胰島素瘤中的表達及作用機制。方法:通過RT-PCR及Western-blot技術(shù)檢測Gata6在胰島素瘤組織瘤體及瘤旁的表達差異;利用免疫熒光技術(shù)檢測Gata6在胰島素瘤及正常胰腺切片中的表達及定位。轉(zhuǎn)染Si RNA干擾Min6細胞Gata6表達后流式細胞儀檢測細胞凋亡及細胞周期變化,同時利用熒光探針DCFH-DA檢測細胞內(nèi)ROS變化。Gata6質(zhì)粒過表達后流式細胞儀檢測細胞周期變化及Brd U免疫組化觀察Min6細胞的增殖。棕櫚酸對待Min6細胞,觀察細胞活力變化、細胞凋亡、ROS變化以及Gata6表達變化,過表達Gata6后棕櫚酸對待,觀察ROS、Bcl-2及Bax變化。結(jié)果:1)Gata6在小鼠胰島素瘤細胞系Min6細胞、大鼠胰島素瘤細胞系INS-1細胞以及人胰島素瘤中均存在表達,Gata6在胰島素瘤瘤體組織表達較瘤旁組織表達顯著增高,具有統(tǒng)計學差異(p0.05)。2)Gata6免疫熒光顯示,胰島素瘤瘤體正常胰島結(jié)構(gòu)喪失,Gata6主要在定位于細胞核中,在胰島素瘤中大量表達。3)si RNA干擾Gata6表達后,細胞凋亡較對照組顯著增加,具有統(tǒng)計學差異(p0.01);細胞周期分析顯示處在S期細胞比例減少(p0.01),提示沉默Gata6表達后對細胞的增殖起一定的抑制的作用。4)過表達Gata6對Min6細胞的細胞周期及增殖無明顯的影響。5)500u M棕櫚酸對待Min6細胞24h導致Gata6表達較對照組顯著下降(P0.01),可引起細胞內(nèi)ROS產(chǎn)生增加(p0.05)。6)si RNA干擾Gata6表達導致細胞ROS產(chǎn)生增加(p0.01),過表達Gata6可減少PA誘導的ROS的產(chǎn)生(p0.05)。7)棕櫚酸對待Min6細胞導致Bcl-2表達減少,Bax表達增加,且Bcl-2/Bax比值減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);過表達Gata6后使PA誘導的Bax減少(p0.05),Bcl-2/Bax比值增加,且差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05),提示過表達Gata6后可一定程度改善PA導致的細胞凋亡。結(jié)論:Gata6在胰島素瘤中高表達,通過減少ROS的產(chǎn)生及胰島素瘤細胞的凋亡,可能在胰島素瘤發(fā)病機制中發(fā)揮重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：胰島素瘤 Gata6 ROS 凋亡
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R736.7
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-13
• 引言13-16
• 實驗材料與方法16-47
• 結(jié)果47-62
• 討論62-64
• 結(jié)論64-65
• 參考文獻65-70
• 致謝70-72
• 發(fā)表錄用論文72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 韓峻峰;張鋒;包玉倩;周健;陸蔚;陸俊茜;賈偉平;;糖代謝相關(guān)指標對診斷胰島素瘤的臨床價值[J];中華醫(yī)學雜志;2010年16期

2 Bassam Abboud;Joe Boujaoude;;Occult sporadic insulinoma: Localization and surgical strategy[J];World Journal of Gastroenterology;2008年05期

3 ;Role of oxidative stress in the apoptosis of hepatocellular carcinoma induced by combination of arsenic trioxide and ascorbic acid[J];Acta Pharmacologica Sinica;2006年08期

，

本文編號：895698