本文關(guān)鍵詞：MiR-23a對(duì)人乳腺癌細(xì)胞自噬的影響

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【摘要】：目的:研究參與人乳腺癌細(xì)胞自噬調(diào)控的mi RNAs。方法:1.課題組前期通過(guò)western-blot方法篩選出micro RNAs(mi RNAs)參與調(diào)控乳腺癌細(xì)胞自噬,本課題從中選擇四個(gè)mi RNAs并通過(guò)western-blot方法檢測(cè)LC3蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。2.選擇兩株乳腺癌細(xì)胞T47D和MCF-7分別轉(zhuǎn)染mi R-23a模擬物(mi R-23a mimic)和mi R-23a抑制物(mi R-23a ASO)后應(yīng)用western-blot、細(xì)胞免疫熒光和細(xì)胞電鏡方法,驗(yàn)證mi R-23a對(duì)人乳腺癌細(xì)胞自噬的影響。3.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)mi R-23a對(duì)人乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響。4.應(yīng)用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)mi R-23a潛在的靶基因。結(jié)果:1.Western-blot結(jié)果顯示,與陰性對(duì)照組相比較,乳腺癌MCF-7細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-24mimic,mi R-7 mimic,mi R-23a mimic,mi R-513a-5p mimic后mi R-23a明顯增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。2.體外自噬實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)Western-blot結(jié)果顯示,與陰性對(duì)照組相比較,T47D細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-23a mimic后明顯下調(diào)p62蛋白的表達(dá),而增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,MCF-7細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-23a ASO后則明顯上調(diào)p62蛋白的表達(dá),而降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。(2)細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-23a mimic后GFP-LC3點(diǎn)狀聚集數(shù)目顯著增多,即自噬陽(yáng)性細(xì)胞達(dá)到22.6%(P㩳0.05),陰性對(duì)照組自噬陽(yáng)性細(xì)胞為4%。細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-23a ASO后GFP-LC3點(diǎn)狀聚集數(shù)目顯著減少,即自噬陽(yáng)性細(xì)胞降低至3%(P0.05),陰性對(duì)照組自噬陽(yáng)性細(xì)胞為10%。(3)細(xì)胞電鏡結(jié)果顯示,T47D細(xì)胞轉(zhuǎn)染了mi R-23a mimic后,自噬小體明顯多于對(duì)照組。3.流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示,與陰性對(duì)照組相比較,T47D細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-23a mimic后凋亡細(xì)胞明顯減少至42%(P0.05)。4.生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)mi R-23a的靶基因中,部分發(fā)揮了抑制自噬和促進(jìn)凋亡的作用。結(jié)論:mi R-23a促進(jìn)人乳腺癌細(xì)胞自噬,抑制其凋亡。
【關(guān)鍵詞】：miR-23a 自噬 凋亡 乳腺腫瘤
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 英文縮寫(xiě)詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-14
• 材料方法14-27
• 結(jié)果27-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-46
• 附錄46-48
• 致謝48-49
• 綜述49-60
• 參考文獻(xiàn)56-60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 賀榮芳;謝黎明;趙強(qiáng);王婧;文龍;王艷;唐海林;;miR-23a與RUNX1在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J];中國(guó)普通外科雜志;2012年05期

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本文編號(hào)：895298