本文關(guān)鍵詞：GC-MSC誘導(dǎo)Treg、Th17細(xì)胞的作用及機(jī)制

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【摘要】：目的:通過(guò)研究GC-MSC對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞平衡的影響探討GC-MSC對(duì)胃癌微環(huán)境的免疫調(diào)節(jié)功能,從而為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究GC-MSC促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制提供重要依據(jù)。方法:通過(guò)組織貼壁法分離培養(yǎng)臨床病人胃癌及癌旁組織中的GCMSC及GCN-MSC,并通過(guò)成脂誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)、成骨誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)及表面標(biāo)記的檢測(cè)鑒定GC-MSC。使用GC-MSC-CM及直接共培養(yǎng)的方式作用于健康人PBMC,在作用后的第3天、第6天流式檢測(cè)PBMC中Th17、Treg細(xì)胞比例,探究GC-MSC對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞比例的影響。使用GC-MSC-CM作用于健康人CD4~+Na?ve T細(xì)胞,在第6天流式檢測(cè)Treg、Th17細(xì)胞比例,探究GC-MSC對(duì)Treg、Th17細(xì)胞分化的影響。使用CFSE標(biāo)記健康人PBMC然后使用GCMSC-CM連續(xù)處理6天,在第3天、第6天檢測(cè)PBMC中Treg、Th17細(xì)胞CFSE表達(dá)情況,研究GC-MSC對(duì)Treg、Th17細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果:從臨床胃癌組織中成功分離培養(yǎng)了高純度的GC-MSC。GCMSC-CM可以使健康人PBMC中Treg細(xì)胞比例升高,Th17細(xì)胞比例降低,與GC-MSC直接共培養(yǎng)后PBMC中Th17細(xì)胞比例也出現(xiàn)明顯減少,但是Treg細(xì)胞比例沒(méi)有明顯改變。GC-MSC-CM可以誘導(dǎo)健康人CD4~+Na?ve T細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化,但不能誘導(dǎo)CD4~+Na?ve T細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化。GC-MSC-CM對(duì)健康人PBMC中Th17細(xì)胞的增殖具有明顯抑制作用,但對(duì)Treg細(xì)胞無(wú)明顯影響。結(jié)論:研究發(fā)現(xiàn),GC-MSC可以通過(guò)促進(jìn)健康人PBMC中Treg細(xì)胞的分化及抑制Th17細(xì)胞的增殖使Treg/Th17細(xì)胞的平衡向Treg細(xì)胞極化。為后續(xù)實(shí)驗(yàn)篩選GC-MSC誘導(dǎo)Treg、Th17細(xì)胞的關(guān)鍵因子,探討GC-MSC調(diào)節(jié)Treg、Th17細(xì)胞的分子機(jī)制及評(píng)價(jià)關(guān)鍵因子在臨床胃癌患者診斷,預(yù)后判斷的臨床意義等提供重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌間質(zhì)干細(xì)胞 Treg細(xì)胞 Th17細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2;R730.43
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 第一章 緒論13-21
• 1.1 胃癌13
• 1.2 腫瘤微環(huán)境13
• 1.3 MSC與腫瘤13-15
• 1.3.1 MSC的生物學(xué)特性14
• 1.3.2 MSC與炎癥或腫瘤微環(huán)境14-15
• 1.4 Th17/Treg細(xì)胞的平衡與腫瘤15-17
• 1.4.1 Th17/Treg細(xì)胞與腫瘤15-16
• 1.4.2 Th17/Treg細(xì)胞的平衡16
• 1.4.3 Th17/Treg細(xì)胞的平衡與炎癥或腫瘤微環(huán)境16-17
• 1.5 MSC與Treg/Th17細(xì)胞17-21
• 1.5.1 MSC對(duì)Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用18-19
• 1.5.2 MSC對(duì)Th17細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用19
• 1.5.3 影響MSC調(diào)節(jié)Th17/Treg細(xì)胞的環(huán)境因素19-21
• 第二章 研究目的、方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案和意義21-24
• 2.1 研究目的21
• 2.2 研究方法21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案21-23
• 2.4 研究意義23-24
• 第三章 GC-MSC對(duì)健康人PBMC中Th17、Treg細(xì)胞比例的影響24-40
• 3.1 材料和試劑24-27
• 3.1.1 標(biāo)本采集24
• 3.1.2 主要試劑24-26
• 3.1.3 主要器材26-27
• 3.1.4 溶液的配置27
• 3.2 方法27-31
• 3.2.1 健康人PBMC的分離27
• 3.2.2 GC-MSC的分離培養(yǎng)27-28
• 3.2.3 GC-MSC的鑒定28-29
• 3.2.4 MSC上清的制備29
• 3.2.5 Treg、Th17細(xì)胞流式檢測(cè)29-30
• 3.2.6 GC-MSC、GCN-MSC上清對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞比例的影響30
• 3.2.7 GC-MSC、GCN-MSC與健康人PBMC直接共培養(yǎng)后對(duì)Treg、Th17細(xì)胞比例的影響30-31
• 3.2.8 統(tǒng)計(jì)分析31
• 3.3 結(jié)果31-38
• 3.3.1 GC-MSC的分離培養(yǎng)及鑒定31-33
• 3.3.2 GC-MSC-CM及GCN-MSC-CM對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞比例的影響33-36
• 3.3.3 GC-MSC及GCN-MSC與健康人PBMC直接共培養(yǎng)后對(duì)Treg、Th17細(xì)胞比例的影響36-38
• 3.4 討論38-40
• 第四章 GC-MSC-CM對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞分化和增殖的影響40-51
• 4.1 材料與試劑40-41
• 4.1.1 標(biāo)本采集40
• 4.1.2 主要試劑40
• 4.1.3 主要器材40-41
• 4.1.4 CFSE溶液的配置41
• 4.2 方法41-42
• 4.2.1 健康人初始CD4~+T細(xì)胞（CD4~+Na?ve T細(xì)胞）的分離41
• 4.2.2 CD4~+ Na?ve T細(xì)胞鑒定41
• 4.2.3 CFSE對(duì)健康人PBMC的標(biāo)記41-42
• 4.2.4 GC-MSC-CM誘導(dǎo)健康人CD4~+Na?ve T細(xì)胞分化為Treg、Th17細(xì)胞的研究42
• 4.2.5 GC-MSC-CM對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞增殖的影響42
• 4.2.6 統(tǒng)計(jì)分析42
• 4.3 結(jié)果42-49
• 4.3.1 健康人CD4~+ Na?ve T細(xì)胞鑒定42-43
• 4.3.2 GC-MSC-CM誘導(dǎo)健康人CD4~+Na?ve T細(xì)胞分化為Treg、Th17細(xì)胞的研究43-45
• 4.3.3 GC-MSC-CM對(duì)健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞增殖的影響45-49
• 4.4 討論49-51
• 第五章 結(jié)論與展望51-52
• 一、結(jié)論51
• 二、展望51-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的的學(xué)術(shù)論文及參加的會(huì)議53-54
• 一．發(fā)表的論文53
• 二．參加會(huì)議53-54
• 參考文獻(xiàn)54-60

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1 李鴻佳;王淑娟;董亮;;Th17與慢性氣道炎癥性疾病[J];國(guó)際內(nèi)科學(xué)雜志;2007年10期

2 余嫻;程翔;廖玉華;丁英俊;付卿卿;謝江嬌;姚瑞;陳勇;唐婷婷;;急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者Th17細(xì)胞檢測(cè)及意義[J];臨床心血管病雜志;2008年02期

3 袁t，

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