本文關(guān)鍵詞：IL-37通過調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞關(guān)鍵細(xì)胞因子的表達(dá)影響T細(xì)胞功能

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【摘要】：背景：樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)能夠高效處理、加工和提呈抗原,是功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞。DCs能夠?qū)⒖乖岢式oT淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,激活淋巴細(xì)胞,從而能夠誘發(fā)一系列免疫應(yīng)答,在機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答中扮演起動(dòng)者的角色。細(xì)菌脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分,能夠誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。TNF-α能在機(jī)體炎癥階段分泌,明顯促進(jìn)T細(xì)胞的增殖,增強(qiáng)其殺傷作用。IL-6的大量表達(dá),能減弱中性粒細(xì)胞的吞噬能力,加劇炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生,從而能進(jìn)一步加快炎癥反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí),LPS與細(xì)胞表面CD14發(fā)生特異性結(jié)合,促進(jìn)大量炎癥因子的分泌,從而介導(dǎo)一系列生物學(xué)反應(yīng)。白細(xì)胞介素37(interleukin-37,IL-37)是目前唯一沒有發(fā)現(xiàn)鼠同系物的IL-1家族成員。在骨髓、肝臟、胸腺、肺等組織中均能檢測到IL-37的表達(dá)。IL-37參與多種炎癥性疾病和免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。在自然殺傷細(xì)胞和單核細(xì)胞中,IL-37與IL-18BP結(jié)合后,能夠與IL-18Rβ形成復(fù)合物,抑制IL-18的活性,從而抑制炎癥因子IFN-γ的產(chǎn)生。然而IL-37對DCs作用及其在免疫及感染性疾病中的作用機(jī)制還不明確。IL-37對DCs炎癥因子表達(dá)及其在炎癥中的作用的影響還有待進(jìn)一步探討。目的：探討IL-37對LPS誘導(dǎo)的B6小鼠骨髓細(xì)胞誘導(dǎo)的樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)分泌炎癥因子的調(diào)節(jié)。方法：取小鼠骨髓細(xì)胞,誘導(dǎo)其分化為DCs,用IL-37處理后分別用LPS刺激,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面共刺激分子(CD80、CD86),RT-PCR法檢測腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和白細(xì)胞介素la(IL-la)mRNA的表達(dá),多重液相蛋白定量CBA試劑盒檢測細(xì)胞上清中IL-1α、IL-6、TNF-α蛋白的表達(dá)。結(jié)果：磁珠分選分離高純度的DCs,能夠滿足本實(shí)驗(yàn)的要求。IL-37能夠減少LPS誘導(dǎo)的DCs表面共刺激分子CD80、CD86的表達(dá),并抑制DCs分泌IL-1α、IL-6、TNF-α。結(jié)論：IL-37可以抑制DC細(xì)胞炎癥因子的分泌,調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥因子網(wǎng)絡(luò)的平衡,具有一定的抗炎作用,從而抑制免疫反應(yīng)。背景：樹突狀細(xì)胞(DC)在人體大多數(shù)組織中均能檢測到,是一種數(shù)量化較少的細(xì)胞群體,約占各狙織總細(xì)胞的0.1到2%不等。DC是專職抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cells,APC),能夠通過捕獲,處理,提呈抗原和激活幼稚T細(xì)胞,在活化免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。在穩(wěn)態(tài)條件下,DC能保持未成熟的狀態(tài),而當(dāng)有炎癥信號刺激時(shí),未成熟的DC能夠被激活�；罨腄C能夠上調(diào)共刺激分子如CD80,CD86和CD40,從而促進(jìn)T細(xì)胞的活化和擴(kuò)展[2-4]。白細(xì)胞介素(IL)-1家族的細(xì)胞因子在多種免疫性炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用[5,6]。同時(shí)IL-1家族是機(jī)體對抗病原微生物和物理損壞的第一道防線。IL-37是最近發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的新成員,是固有免疫系統(tǒng)的一個(gè)基本的抑制劑。正能夠表達(dá)于多種正常組織和腫瘤組織中[7-10]。Kumar及其同事已經(jīng)證實(shí),IL-37蛋白能夠在扁桃體,皮膚,食道,胎盤,黑色素瘤W及肺,前列腺,結(jié)腸和乳腺癌中表達(dá),但是表達(dá)水平較俯化經(jīng)過誘導(dǎo)的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)和樹突狀細(xì)胞也能夠表達(dá)IL-37[10]。盡管大量的文獻(xiàn)對IL-37基因位點(diǎn)的測序進(jìn)行了很多工作,但仍沒有發(fā)現(xiàn)小鼠同源的IL-37的表達(dá)。IL-37在抑制免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,具有調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞功能的作用。然而,IL-37在細(xì)胞中發(fā)揮具體的機(jī)制尚不十分清楚。目的：研究IL-37對DC免疫表型和功能特點(diǎn)以及對CD4+和CD8+T細(xì)胞的影響,從而能夠進(jìn)一步說明IL-37在免疫性疾病中的作用。方法：取小鼠骨髓細(xì)胞,誘導(dǎo)其分化為DCs,用IL-37處理后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面共刺激分子(CD80、CD86、CD40),RT-PCR法檢測腫瘤壞死因子a(TNF-a)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)、和轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)的mRNA的表達(dá),多重液相蛋白定量CBA試劑盒及ELISA試劑盒檢測細(xì)胞上清中TNF-a、IL-6、IL-10和TGF-β蛋白的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)及Western方法檢測樹突狀細(xì)胞中x鎪嶧鞍椎謀澩鎩Ｓτ玫鞍滓種萍梁蠹觳庋字⒁蜃擁謀澩鎩＝獶C與T細(xì)胞共培養(yǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞X椫，

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