本文關(guān)鍵詞：IL-37通過調(diào)節(jié)樹突狀細胞關(guān)鍵細胞因子的表達影響T細胞功能

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【摘要】：背景：樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)能夠高效處理、加工和提呈抗原,是功能最強的抗原提呈細胞。DCs能夠?qū)⒖乖岢式oT淋巴細胞和B淋巴細胞,激活淋巴細胞,從而能夠誘發(fā)一系列免疫應(yīng)答,在機體細胞免疫應(yīng)答中扮演起動者的角色。細菌脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分,能夠誘導細胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。TNF-α能在機體炎癥階段分泌,明顯促進T細胞的增殖,增強其殺傷作用。IL-6的大量表達,能減弱中性粒細胞的吞噬能力,加劇炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生,從而能進一步加快炎癥反應(yīng)進程。當炎癥反應(yīng)發(fā)生時,LPS與細胞表面CD14發(fā)生特異性結(jié)合,促進大量炎癥因子的分泌,從而介導一系列生物學反應(yīng)。白細胞介素37(interleukin-37,IL-37)是目前唯一沒有發(fā)現(xiàn)鼠同系物的IL-1家族成員。在骨髓、肝臟、胸腺、肺等組織中均能檢測到IL-37的表達。IL-37參與多種炎癥性疾病和免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。在自然殺傷細胞和單核細胞中,IL-37與IL-18BP結(jié)合后,能夠與IL-18Rβ形成復(fù)合物,抑制IL-18的活性,從而抑制炎癥因子IFN-γ的產(chǎn)生。然而IL-37對DCs作用及其在免疫及感染性疾病中的作用機制還不明確。IL-37對DCs炎癥因子表達及其在炎癥中的作用的影響還有待進一步探討。目的：探討IL-37對LPS誘導的B6小鼠骨髓細胞誘導的樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)分泌炎癥因子的調(diào)節(jié)。方法：取小鼠骨髓細胞,誘導其分化為DCs,用IL-37處理后分別用LPS刺激,流式細胞儀檢測細胞表面共刺激分子(CD80、CD86),RT-PCR法檢測腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素6(IL-6)和白細胞介素la(IL-la)mRNA的表達,多重液相蛋白定量CBA試劑盒檢測細胞上清中IL-1α、IL-6、TNF-α蛋白的表達。結(jié)果：磁珠分選分離高純度的DCs,能夠滿足本實驗的要求。IL-37能夠減少LPS誘導的DCs表面共刺激分子CD80、CD86的表達,并抑制DCs分泌IL-1α、IL-6、TNF-α。結(jié)論：IL-37可以抑制DC細胞炎癥因子的分泌,調(diào)節(jié)細胞炎癥因子網(wǎng)絡(luò)的平衡,具有一定的抗炎作用,從而抑制免疫反應(yīng)。背景：樹突狀細胞(DC)在人體大多數(shù)組織中均能檢測到,是一種數(shù)量化較少的細胞群體,約占各狙織總細胞的0.1到2%不等。DC是專職抗原提呈細胞(antigen presenting cells,APC),能夠通過捕獲,處理,提呈抗原和激活幼稚T細胞,在活化免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用。在穩(wěn)態(tài)條件下,DC能保持未成熟的狀態(tài),而當有炎癥信號刺激時,未成熟的DC能夠被激活�；罨腄C能夠上調(diào)共刺激分子如CD80,CD86和CD40,從而促進T細胞的活化和擴展[2-4]。白細胞介素(IL)-1家族的細胞因子在多種免疫性炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用[5,6]。同時IL-1家族是機體對抗病原微生物和物理損壞的第一道防線。IL-37是最近發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的新成員,是固有免疫系統(tǒng)的一個基本的抑制劑。正能夠表達于多種正常組織和腫瘤組織中[7-10]。Kumar及其同事已經(jīng)證實,IL-37蛋白能夠在扁桃體,皮膚,食道,胎盤,黑色素瘤W及肺,前列腺,結(jié)腸和乳腺癌中表達,但是表達水平較俯化經(jīng)過誘導的外周血單個核細胞(PBMC)和樹突狀細胞也能夠表達IL-37[10]。盡管大量的文獻對IL-37基因位點的測序進行了很多工作,但仍沒有發(fā)現(xiàn)小鼠同源的IL-37的表達。IL-37在抑制免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,具有調(diào)節(jié)樹突狀細胞功能的作用。然而,IL-37在細胞中發(fā)揮具體的機制尚不十分清楚。目的：研究IL-37對DC免疫表型和功能特點以及對CD4+和CD8+T細胞的影響,從而能夠進一步說明IL-37在免疫性疾病中的作用。方法：取小鼠骨髓細胞,誘導其分化為DCs,用IL-37處理后,流式細胞儀檢測細胞表面共刺激分子(CD80、CD86、CD40),RT-PCR法檢測腫瘤壞死因子a(TNF-a)、白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素10(IL-10)、和轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)的mRNA的表達,多重液相蛋白定量CBA試劑盒及ELISA試劑盒檢測細胞上清中TNF-a、IL-6、IL-10和TGF-β蛋白的表達。流式細胞術(shù)及Western方法檢測樹突狀細胞中x鎪嶧鞍椎謀澩鎩Ｓτ玫鞍滓種萍梁蠹觳庋字⒁蜃擁謀澩鎩＝獶C與T細胞共培養(yǎng),流式細胞術(shù)檢測T細胞X椫，

本文編號：833503