本文關鍵詞：葉酸受體靶向型熒光碳點在腫瘤細胞成像中的應用

  更多相關文章： 熒光碳點 靶向 腫瘤細胞成像 PEI 葉酸受體

【摘要】：近年來,熒光碳點(Carbon Dots,CDs)因其相對于有機熒光染料和傳統(tǒng)的量子點生物毒性低且抗光漂白等優(yōu)異特性,而在材料、化學、生物醫(yī)學等研究領域備受關注。本論文基于葉酸(FA)對碳點(CDs)熒光的猝滅作用,采用聚合物包裹非共價鍵連接碳點和葉酸(FA)的策略,制備出靶向葉酸受體的turn-on型熒光探針FA-PEI-CDs,發(fā)展了一種高效快速靶向葉酸受體過量表達癌癥細胞的檢測方法,用于葉酸受體過量表達癌癥細胞的成像分析。主要內(nèi)容和結(jié)果如下:1.CDs、PEI-CDs、FA-PEI-CDs的制備及表征:通過一步水熱合成法制備熒光碳點,將其表面包裹上帶正電荷的PEI,最后將葉酸通過靜電作用吸附在PEI-CDs表面,制得turn-on型的熒光探針FA-PEI-CDs。利用TEM、Zeta電勢、AFM、IR、FL、UV等手段對它們的形貌、粒徑、表面電位、分散性、紫外吸收和熒光光譜等性能進行分析表征,驗證了PEI和葉酸確實通過靜電作用包裹在碳點上,初步驗證了葉酸/葉酸受體對PEI-CDs熒光的猝滅與恢復特性。2.葉酸/葉酸受體對PEI-CDs熒光的猝滅與恢復性能:系統(tǒng)考察了不同濃度葉酸FA對PEI-CDs的熒光淬滅響應性能,以及不同濃度葉酸受體FR對FA-PEI-CDs已猝滅熒光的恢復響應性能。優(yōu)化了pH、鹽濃度、反應時間、探針濃度等實驗條件,并繪制線性響應曲線。初步探究了葉酸猝滅碳點熒光的原因。發(fā)現(xiàn)包裹PEI后的PEI-CDs仍然發(fā)光,表面結(jié)合葉酸后的FA-PEI-CDs熒光猝滅,但其熒光可以被葉酸受體重新恢復。是由于葉酸受體與葉酸之間有更強的親和力,使葉酸從納米粒子復合物上解吸下來,從而使PEI-CDs重新恢復熒光。3.FA-PEI-CDs對葉酸受體高表達癌癥細胞的成像分析:將FA-PEI-CDs與葉酸受體表達不同的HeLa、HepG2和MCF-7癌癥細胞一同孵育,激光共聚焦顯微鏡觀察細胞熒光成像情況。結(jié)果表明,FA-PEI-CDs與細胞孵育10min即可快速、特異性的對葉酸受體過量表達的癌癥細胞進行靶向熒光標記并成像。而之前的研究中都需要幾個小時甚至幾天的時間對細胞進行孵育,非常不利于生物醫(yī)學應用。本論文的研究結(jié)果為癌癥細胞靶向、快速熒光標記成像分析,提供了更加有效的方法,有望在生物醫(yī)學、臨床醫(yī)學研究中獲得應用。
【關鍵詞】：熒光碳點 靶向 腫瘤細胞成像 PEI 葉酸受體
【學位授予單位】：北京理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3;R730.4
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-20
• 1.1 引言9
• 1.2 癌癥檢測與成像9-12
• 1.2.1 癌癥概述9-10
• 1.2.2 腫瘤標志物10-12
• 1.2.3 腫瘤的診斷成像技術12
• 1.3 熒光探針的發(fā)展及制備方法12-17
• 1.3.1 熒光分子探針12-13
• 1.3.2 常用的熒光分子標記物13-14
• 1.3.3 靶向性熒光碳點的制備策略14-17
• 1.4 選題依據(jù)及目的17-18
• 1.5 研究方案和研究內(nèi)容18-20
• 第2章 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的制備及表征20-29
• 2.1 引言20
• 2.2 實驗部分20-22
• 2.2.1 儀器及試劑20-21
• 2.2.2 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的制備21
• 2.2.3 CDs、PEI-CDs和FA-PEI-CDs的表征方法21-22
• 2.3 結(jié)果與討論22-27
• 2.3.1 TEM分析22-24
• 2.3.2 Zeta電勢分析24
• 2.3.3 AFM分析24-25
• 2.3.4 IR分析25-26
• 2.3.5 UV/Vis吸收光譜和FL熒光光譜分析26-27
• 2.4 小結(jié)27-29
• 第3章 葉酸/葉酸受體對PEI-CDs熒光性能的影響29-42
• 3.1 引言29-30
• 3.2 實驗部分30-31
• 3.2.1 儀器與試劑30
• 3.2.2 實驗方法30-31
• 3.3 結(jié)果與討論31-40
• 3.3.1 PEI-CDs的穩(wěn)定性測試31-33
• 3.3.1.1 pH對PEI-CDs的熒光性能的影響31-32
• 3.3.1.2 鹽濃度對PEI-CDs熒光的影響32
• 3.3.1.3 儲存時間對PEI-CDs熒光的影響32-33
• 3.3.2 葉酸對PEI-CDs熒光性能測試33-35
• 3.3.3 葉酸受體對FA-PEI-CDs熒光性能測試35-38
• 3.3.4 FA-PEI-CDs選擇性測試38
• 3.3.5 FA對PEI-CDs熒光猝滅的機理探究38-40
• 3.4 小結(jié)40-42
• 第4章 FA-PEI-CDs對葉酸受體高表達癌細胞的靶向標記42-46
• 4.1 引言42
• 4.2 實驗部分42-43
• 4.2.1 儀器與試劑42-43
• 4.2.2 細胞培養(yǎng)43
• 4.2.3 成像分析43
• 4.3 結(jié)果與討論43-44
• 4.4 小結(jié)44-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-52
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文與研究成果清單52-53
• 致謝53

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 ;Nature發(fā)表葉酸受體結(jié)構(gòu)與功能研究進展[J];生命的化學;2013年04期

2 張亞東;龐燕;陸潔;魏曉焱;楊文江;朱美霖;;葉酸受體靶向的人血清白蛋白-葉酸偶聯(lián)物的制備、標記及生物性能評價[J];高等學�；瘜W學報;2010年10期

3 曹俊;吳瑤;陳元維;歐靜;陳年操;羅祥林;;葉酸受體靶向的聚乳酸共聚物膠束的制備及性質(zhì)研究[J];功能材料;2010年03期

4 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 楊科亞;張友九;章斌;王道錦;許玉杰;朱然;胡明江;范我;;葉酸-青霉素G�；笇θ~酸受體陽性腫瘤的靶向性研究[A];首屆全國分子核醫(yī)學暨分子影像學學術交流會資料匯編[C];2006年

2 龍娜;崔佳;項光亞;;葉酸受體靶向的大分子釓造影劑的制備[A];湖北省藥學會第十一屆會員代表大會暨2007年學術年會論文匯編[C];2007年

3 郭紅娟;陸潔;謝芳;朱美霖;;一種新型~(99m)TcN核標記的葉酸受體顯像劑的合成和體內(nèi)/體外生物性能初步評價[A];第九屆全國核化學與放射化學學術研討會論文摘要集[C];2010年

4 喻青松;甘志華;;新型水溶性靶向放療體系的制備及體外靶向性研究[A];2011年全國高分子學術論文報告會論文摘要集[C];2011年

5 王春梅;林振宇;;基于末端保護檢測葉酸受體的電致化學發(fā)光傳感器[A];第十三屆全國光化學學術討論會論文集[C];2013年

6 丁楠;盧瑤;楊暢;黃雷;劉健;項光亞;;葉酸受體靶向磁共振/熒光多功能脂質(zhì)體的研究[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 白毅 黃辛;葉酸受體結(jié)構(gòu)與功能研究獲突破性發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2013年

2 北京腫瘤醫(yī)院核醫(yī)學科 王雪鵑;葉酸受體 腫瘤醫(yī)學新“寵兒”[N];健康報;2013年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊光;葉酸受體靶向熊果酸長循環(huán)脂質(zhì)體的制備及其抑瘤作用的研究[D];華中科技大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 雷丹;葉酸受體靶向型熒光碳點在腫瘤細胞成像中的應用[D];北京理工大學;2016年

2 刁智娟;腫瘤細胞葉酸受體的表達及其靶向siRNA干擾研究[D];華中科技大學;2006年

3 張彤;腫瘤細胞葉酸受體表達上調(diào)及其對葉酸偶聯(lián)物攝取的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2010年

4 袁正;葉酸受體型磁共振靶向?qū)Ρ葎┑闹苽渑c動物實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2005年

5 陳燕;葉酸受體在鼻咽癌、喉癌中的表達及臨床意義[D];重慶醫(yī)科大學;2007年

6 姜麗莎;靶向葉酸受體PET顯像探針A1~(18)F-NOTA-Folate的制備及生物學評價[D];廣州中醫(yī)藥大學;2015年

7 丁楠;葉酸受體靶向磁共振/熒光多功能脂質(zhì)體的研究[D];華中科技大學;2010年

8 李云;基于生物及化學反應發(fā)展生化分析新方法的研究[D];南京大學;2011年

，

本文編號：823801