目的首先,分析長(zhǎng)鏈非編碼RNA X染色體失活特異轉(zhuǎn)錄本(long non-coding RNA X inactive specific transcript,lnc RNA XIST,lnc RNA XIST)在肝癌組織及肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。其次,研究lnc RNA XIST與肝癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的關(guān)系。最后,分析lnc RNA XIST在肝癌中起作用的可能分子機(jī)制,為闡明肝癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制研究提供新的理論基礎(chǔ)。方法收集29例肝細(xì)胞癌病患的癌組織及其癌旁組織,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)各組織中l(wèi)nc RNA XIST的表達(dá)水平。并應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)lnc RNA XIST表達(dá)水平與肝癌病人臨床病理特征進(jìn)行分析。同樣應(yīng)用q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)五種不同肝細(xì)胞系中l(wèi)nc RNA XIST的表達(dá)水平。使用RNA干擾技術(shù)降低肝癌細(xì)胞系中l(wèi)nc RNA XIST表達(dá)水平,并在此基礎(chǔ)上研究細(xì)胞的體外增殖、遷移及侵襲能力的變化。通過(guò)生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)分析與lnc RNA XIST關(guān)系密切的分子,并應(yīng)用q ...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、材料與方法
    （一）實(shí)驗(yàn)材料
        1. 組織標(biāo)本的收集和保存
        2. 細(xì)胞株來(lái)源、保存及培養(yǎng)
        3. 主要試劑
        4. 主要儀器和耗材
        5. 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配置
    （二）實(shí)驗(yàn)方法
        1. 細(xì)胞復(fù)蘇、消化、凍存及培養(yǎng)
            1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
            1.2 細(xì)胞消化
            1.3 細(xì)胞凍存
        2. 組織及細(xì)胞的RNA提取
        3. 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
        4. 細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        5. 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        6. 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        7. 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
    （三）生物信息學(xué)分析
    （四）統(tǒng)計(jì)分析
二、結(jié)果
    （一）lncRNA XIST在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及功能研究
        1. lncRNA XIST在肝癌組織中表達(dá)升高
        2. lncRNA XIST表達(dá)與肝癌臨床病理特征的相關(guān)性分析
        3. lncRNA XIST在肝癌細(xì)胞系中表達(dá)升高
        4. 在肝癌細(xì)胞系中RNA干擾有效抑制lncRNA XIST的表達(dá)
        5. lncRNA XIST調(diào)控肝癌細(xì)胞的增殖
        6.lncRNA XIST促進(jìn)肝癌細(xì)胞體外遷移與侵襲
    （二）lncRNA XIST在肝癌中的分子機(jī)制研究
        1.lncRNA XIST調(diào)控肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移的潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)
        2.qRT-PCR驗(yàn)證lncRNA XIST調(diào)控肝癌細(xì)胞中mi R-200b-3p表達(dá)
三、分析和討論
四、結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：4031693