目的:探討結(jié)腸癌細(xì)胞中組織因子/活性凝血因子Ⅶ(tissue factor/active coagulation factorⅦ,TF/FⅦa)通路與表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路之間是否存在交互作用。方法:在KRAS野生型的HT-29及KRAS突變型的Lo Vo結(jié)腸癌細(xì)胞中,以FⅦa活化TF/FⅦa通路,采用qRT-PCR、Western blot檢測EGFR配體雙調(diào)蛋白(amphiregulin,AREG)及表皮調(diào)節(jié)素(epiregulin,EREG)基因、蛋白表達(dá)改變;利用RNA干擾技術(shù)敲低TF表達(dá)后活化TF/FⅦa通路,檢測其對AREG、EREG基因表達(dá)的影響,以證實(shí)FⅦa對AREG、EREG表達(dá)調(diào)節(jié)作用依賴TF。以表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)激活兩細(xì)胞EGFR通路后,檢測TF/FⅦa通路關(guān)鍵分子TF、FⅦ基因表達(dá)改變。結(jié)果:TF/FⅦa通路活化后,HT-29細(xì)胞AREG、EREG基因表達(dá)及EREG蛋白表達(dá)水平均較對照組顯著下調(diào)(AREG、EREG基因表達(dá)量分別為0.5...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
    1.3 激活TF/FⅦa通路后檢測EGFR配體基因表達(dá)的改變
    1.4 檢測TF/FⅦa通路活化后AREG、EREG蛋白表達(dá)的改變
    1.5 激活EGFR通路, 檢測TF/FⅦa通路相關(guān)分子基因表達(dá)的改變
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 TF沉默效應(yīng)驗(yàn)證
    2.2 TF/FⅦa通路活化后EGFR配體基因表達(dá)改變
    2.3 TF/FⅦa通路活化后EGFR配體蛋白表達(dá)改變
    2.4 EGFR通路活化后檢測TF、FⅦ基因表達(dá)改變
3 討論



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