天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當前位置:主頁 > 醫(yī)學論文 > 腫瘤論文 >

骨髓基質(zhì)細胞中平分型GlcNAc影響髓系惡性克隆細胞增殖的機制研究

發(fā)布時間:2024-05-12 21:15
  造血干細胞可以產(chǎn)生所有譜系的血液細胞,它主要存在于骨髓內(nèi),骨髓壁龕可以為其提供靜息、增殖和分化所必需的調(diào)節(jié)信號。骨髓基質(zhì)細胞是骨髓的主要成分,越來越多的證據(jù)表明它是造血干細胞的“沉默伴侶”,可以分泌多種造血過程中所需的正負調(diào)控因子,發(fā)揮高效的調(diào)控作用,另一方面它也能為造血干細胞的增殖、分化與成熟構(gòu)筑良好的空間環(huán)境。它還可以分泌生長因子以促進克隆細胞生存、招募內(nèi)皮細胞及間充質(zhì)干細胞。黑色素瘤細胞黏附分子(MCAM)被認為是骨髓壁龕的標志物,也是骨髓基質(zhì)細胞命運的決策者。糖基化是存在較為廣泛的蛋白翻譯后修飾之一,與蛋白的表達、定位和半衰期密切相關(guān),還影響細胞的增殖或凋亡等。糖鏈由糖基轉(zhuǎn)移酶和糖苷酶共同作用產(chǎn)生。其中,N-乙酰氨基葡萄糖氨基轉(zhuǎn)移酶III(MGAT3)負責將N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的β-1,4糖苷鍵連接到N-聚糖上的β-甘露糖上,形成平分型GlcNAc結(jié)構(gòu)。平分型GlcNAc可以抑制細胞之間以及細胞與胞外基質(zhì)之間的黏附從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移,但其對于骨髓微環(huán)境以及其中的克隆細胞的影響尚未有深入研究。骨髓基質(zhì)細胞與惡性克隆細胞共培養(yǎng)的模型,常被用于研究骨髓微環(huán)境中基質(zhì)細胞與惡...

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略語對照表
第一章 緒論
    1.1 骨髓微環(huán)境
    1.2 骨髓微環(huán)境中的黏附分子MCAM
    1.3 糖基化修飾及平分型GlcNAc
    1.4 蛋白糖基化位點鑒定
    1.5 共培養(yǎng)模型及其應用
    1.6 高爾基體、溶酶體與蛋白加工
    1.7 立題根據(jù)與意義
第二章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株與質(zhì)粒
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 試劑及培養(yǎng)基的配制
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 細胞中蛋白質(zhì)的提取
        2.2.3 蛋白質(zhì)免疫印跡
        2.2.4 凝集素印跡
        2.2.5 免疫共沉淀
        2.2.6 酶聯(lián)免疫吸附測定
        2.2.7 細胞免疫熒光染色
        2.2.8 Edu標記檢測細胞增殖
        2.2.9 平分型GlcNAc的檢測
        2.2.10 RNA提取
        2.2.11 RT-PCR
        2.2.12 細胞轉(zhuǎn)染
        2.2.13 蛋白在高爾基體及溶酶體中的定位檢測
        2.2.14 慢病毒濃縮
        2.2.15 原代骨髓基質(zhì)細胞轉(zhuǎn)染
        2.2.16 NHS-LC-Biotin生物素標記膜蛋白實驗
        2.2.17 小鼠骨髓基質(zhì)細胞分離與培養(yǎng)
        2.2.18 蛋白糖基化位點鑒定
        2.2.19 統(tǒng)計學分析實驗結(jié)果
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 臨床樣本中MGAT3、MCAM以及平分型GlcNAc的表達
        3.1.1 臨床樣本骨髓基質(zhì)細胞中MGAT3、平分型GlcNAc以及MCAM的表達
        3.1.2 MDS與對照組骨髓基質(zhì)細胞中MGAT3和MCAM的 m RNA表達水平
        3.1.3 小結(jié)
    3.2 共培養(yǎng)后骨髓基質(zhì)細胞中平分型GlcNAc修飾的變化
        3.2.1 與惡性克隆細胞共培養(yǎng)后HS27a細胞中平分型GlcNAc表達的變化
        3.2.2 與惡性克隆細胞共培養(yǎng)后HS5 細胞中平分型GlcNAc表達的變化
        3.2.3 小結(jié)
    3.3 基質(zhì)細胞中修飾平分型GlcNAc對惡性克隆細胞增殖的影響
        3.3.1 HS27a、HS27a-MGAT3 細胞對惡性克隆細胞增殖的影響
        3.3.2 HS5、HS5-sh MGAT3 細胞對惡性克隆細胞增殖的影響
        3.3.3 小結(jié)
    3.4 HS27a與 HS27a-MGAT3 細胞中NF-κB信號通路、CAF相關(guān)marker以及細胞因子的檢測
        3.4.1 HS27a與 HS27a-MGAT3 細胞中NF-κB信號通路的檢測
        3.4.2 HS27a與 HS27a-MGAT3 細胞中CAF相關(guān)marker的檢測
        3.4.3 HS27a與 HS27a-MGAT3 條件培養(yǎng)基中細胞因子的檢測
    3.5 過表達MGAT3 及沉默MGAT3 細胞株的構(gòu)建
        3.5.1 HS27a-Tet One-MGAT3 細胞株的構(gòu)建
        3.5.2 MSC-MGAT3、MSC-sh MGAT3 細胞株的構(gòu)建
        3.5.3 小結(jié)
    3.6 平分型GlcNAc影響MCAM表達的機制研究
        3.6.1 平分型GlcNAc修飾MCAM
        3.6.2 MCAM上N-糖基化修飾位點預測
        3.6.3 MCAM蛋白上平分型GlcNAc位點的鑒定
        3.6.4 生物素標記膜蛋白檢測MCAM在膜內(nèi)外的表達
        3.6.5 免疫熒光染色檢測HS27a和 HS27a-MGAT3中MCAM的表達
        3.6.6 小結(jié)
    3.7 小鼠模型驗證基質(zhì)細胞中過表達MGAT3對惡性克隆細胞增殖及生存期的影響
主要結(jié)論與展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的科研成果
致謝



本文編號:3971906

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/zlx/3971906.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶771ce***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
黄色片一区二区三区高清| 亚洲第一区欧美日韩在线| 嫩呦国产一区二区三区av| 欧美日本道一区二区三区| 九九热精品视频在线观看| 香蕉尹人视频在线精品| 国产精品美女午夜视频| 国产一区日韩二区欧美| 国产成人亚洲欧美二区综| 欧美自拍偷自拍亚洲精品| 人体偷拍一区二区三区| 精品国模一区二区三区欧美| 久久国产人妻一区二区免费| 亚洲午夜福利不卡片在线| 欧美日韩一区二区综合| 在线免费不卡亚洲国产| 日韩精品区欧美在线一区| 精品人妻av区波多野结依| 久热久热精品视频在线观看| 字幕日本欧美一区二区| 男人大臿蕉香蕉大视频| 国产精品免费精品一区二区| 日韩精品视频高清在线观看| 亚洲国产精品久久琪琪| 国产又大又黄又粗又免费| 久久久精品区二区三区| 中文字幕中文字幕一区二区| 激情五月天深爱丁香婷婷| 精品老司机视频在线观看| 午夜精品福利视频观看| 欧美黄色成人真人视频| 国产av熟女一区二区三区蜜桃| 丰满少妇被猛烈撞击在线视频| 99久久婷婷国产亚洲综合精品| 欧美熟妇喷浆一区二区| 久久国产青偷人人妻潘金莲| 日韩免费av一区二区三区| 在线观看免费视频你懂的| 日本精品中文字幕人妻| 亚洲最新中文字幕在线视频| 国产一区二区三区不卡|