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食管上皮組織p53敲除小鼠食管癌前病變模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2024-04-20 10:55
  食管癌(Esophagus cancer)是常見的消化道惡性腫瘤,是全球癌癥第六大死亡原因,每年死亡人數(shù)超過40萬人,嚴(yán)重威脅著人類的生命和健康。中國(guó)是食管癌的高發(fā)國(guó)家,其中,河南林州是我國(guó)食管癌流行地區(qū),且多為鱗癌。食管鱗癌發(fā)病率和死亡率高、預(yù)后差,目前缺乏有效的臨床診斷和治療手段,因此,建立食管鱗癌癌前病變模型,深入研究食管癌的發(fā)病機(jī)制,尋找特異性早期標(biāo)志物,篩選化學(xué)預(yù)防藥物,是目前推動(dòng)食管癌防治的重要策略之一。腫瘤的發(fā)生發(fā)展主要是由于癌基因的激活或抑癌基因的失活所引起的。P53是迄今細(xì)胞中最為重要的抑癌基因之一,人類將近一半的腫瘤的發(fā)生與p53的突變或缺失有關(guān)。食管鱗癌中普遍存在著p53的突變,且是一個(gè)早期事件。P53作為抑癌基因雖與食管癌關(guān)系密切,但其具體的分子機(jī)制尚不明確。動(dòng)物模型因能模擬疾病的發(fā)展過程、揭示發(fā)病特點(diǎn),常用以研究疾病的發(fā)病機(jī)制。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是研究特定基因在腫癌發(fā)生發(fā)展中作用的常用模型,尤其是條件性敲除基因的轉(zhuǎn)基因小鼠,因其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)成為重要模型。目前,有關(guān)肺臟、子宮、胃、口腔、舌、前腦等組織中p53基因條件性敲除的小鼠模型已成功建立,但在食管上皮組織中特異性敲除...

【文章頁數(shù)】:101 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1KO小鼠構(gòu)建流程圖

圖1KO小鼠構(gòu)建流程圖

小鼠PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在370bp、288bp處的條帶(p53300bp(管家基因)條帶;4-6號(hào)小鼠小鼠PCR擴(kuò)增產(chǎn)物條帶(p53flox/wild)及300bp(管家基因)條帶,7-9號(hào)分/flox)、陰性對(duì)照(p53wild/wild)和空白對(duì)照(未加....


圖2小鼠基因型鑒定提取鼠尾基因組DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳分離,凝膠成像儀采集圖片并分析

圖2小鼠基因型鑒定提取鼠尾基因組DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳分離,凝膠成像儀采集圖片并分析

圖2小鼠基因型鑒定基因組DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳分離,凝膠成像儀采集圖片p53flox/flox小鼠基因型鑒定M:marker;1-4:基因型均為p53flox/flox的小鼠6:陰性對(duì)照;7:空白對(duì)照B為F1代小鼠基因型鑒定M:marker....


圖3小鼠組織中p53mRNA水平的檢測(cè)

圖3小鼠組織中p53mRNA水平的檢測(cè)

7-9號(hào)分別是陽性對(duì)照(為p53flox/flox.ED-L2-Cre+/-)、陰性對(duì)照(為p53wild/wild.ED-L2-Cre-/-)和空白對(duì)照。圖1KO小鼠構(gòu)建流程圖3實(shí)驗(yàn)結(jié)果


圖4小鼠食管粘膜組織中P53蛋白的表達(dá)情況的檢測(cè)

圖4小鼠食管粘膜組織中P53蛋白的表達(dá)情況的檢測(cè)

且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖4)。圖4小鼠食管粘膜組織中P53蛋白的表達(dá)情況的檢測(cè)



本文編號(hào):3959309

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