目的:胃癌是全球范圍內(nèi)公認(rèn)的最常見、高度致死性的惡性腫瘤之一,其發(fā)生機(jī)制一直是專家學(xué)者討論的焦點(diǎn)問題,然而尚無定論。MiR-3664-5P為微小分子RNA的一種,目前有關(guān)它的研究相對(duì)較少,本研究的目的即在于闡明其與胃癌發(fā)生的關(guān)系。方法:首先課題組運(yùn)用qRT-PCR的方法檢測(cè)了 MiR-3664-5P在胃癌組織及相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)差異;其次EdU、CCK-8、Transwell實(shí)驗(yàn),以及流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)被用于檢測(cè)MiR-3664-5P對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能影響,此外建立了裸鼠體內(nèi)移植瘤模型及肺轉(zhuǎn)移模型來檢測(cè)MiR-3664-5P對(duì)胃癌細(xì)胞體內(nèi)成瘤及肺轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用。結(jié)果:與癌旁組織相比,MiR-3664-5p在胃癌組織中呈現(xiàn)低表達(dá),并且與胃癌患者的預(yù)后呈現(xiàn)正相關(guān)性。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明過表達(dá)MiR-3664-5P后胃癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移能力受到抑制,而敲低后作用則相反;利用生物信息學(xué)的方法以及熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明異粘蛋白(MTDH)是MiR-3664-5P的作用靶點(diǎn);MiR-3664-5P可降低MTDH的表達(dá)從而抑制NF-κB信號(hào)通路的活化;補(bǔ)救實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抑制MTDH表達(dá)后逆轉(zhuǎn)了 MiR-36...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖２?ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ在正常胃黏膜細(xì)胞系及胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)差異

圖２?ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ在正常胃黏膜細(xì)胞系及胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)差異。結(jié)果表明胃癌細(xì)胞??Ｃ－８２３、ＭＧＣ－８０３、ＳＧＣ－７９０１、ＡＧＳ、ＭＫＮ＊４５?中?ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ?表達(dá)水平均低于正常??胃黏膜細(xì)胞系ＧＥＳ－ｈ?（＊＊＊?＾Ｏ．ＯＯｌ）??ＭｉＲ－３６６４－....

圖４ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ表達(dá)水平與胃癌患者預(yù)后生存的關(guān)系

?南京醫(yī)科大學(xué)碩士論文??四、?ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ表達(dá)水平與胃癌患者預(yù)后生存的關(guān)系??１）為了探究ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ表達(dá)水平差異的臨床意義，我們將腫瘤中ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ??表達(dá)根據(jù)中位數(shù)將胄癌患者分為高表達(dá)組及低表達(dá)組。結(jié)果表明：ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ??高表達(dá)的胃....

圖５?ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ能夠抑制胃癌細(xì)胞的增殖

ｍｉＲ－３６６４－５Ｐ?ｍｉｍｉｃｓ使之過表達(dá)，而在ＭＫＮ４５細(xì)胞中轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－３６６４－５Ｐ抑制劑??使之低表達(dá)，并且構(gòu)建了過表達(dá)ｍｉＲ－３６６４－５Ｐ的慢病毒包裝質(zhì)粒感染ＭＧＣ８０３??細(xì)胞后使ｍｉＲ－３６６４－５Ｐ過表達(dá)（圖５Ａ）。ＥｄＵ被分別加入到轉(zhuǎn)染了?ｍｉＲ－３６６４....

圖６過表達(dá)ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ能夠誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯以及誘導(dǎo)凋亡

為了探宄ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ抑制胃癌細(xì)胞增殖的具體機(jī)制，我們檢測(cè)了其對(duì)細(xì)??胞周期及凋亡的影響。過表達(dá)ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ能夠誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在Ｇ１期，而??抑制ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ后細(xì)胞周期處于Ｇ２期比例明顯增高（圖６Ａ）。過表達(dá)??ＭｉＲ－３６６４－５Ｐ能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡....

本文編號(hào)：3953524