背景結(jié)腸癌是最常見的惡性腫瘤之一,它的發(fā)生率在一些西方國家呈下降趨勢,主要是因?yàn)樵缙跈z查,早期預(yù)防和早期治療。因此,識(shí)別結(jié)腸癌形成的潛在原因顯得尤為重要。miR-495在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的調(diào)節(jié)作用,被認(rèn)為是腫瘤治療的很有前途的靶點(diǎn)。miR-495通過靶向調(diào)節(jié)E-鈣粘蛋白和REDD1促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞啟動(dòng)。同時(shí)觀察到這種微小miRNA在MLL-重排的白血病中有減少。然而,我們對(duì)于miR-495,miR-495-3p的逆轉(zhuǎn)鏈和它在結(jié)腸癌細(xì)胞的作用和表達(dá)知之甚少。目的本實(shí)驗(yàn)對(duì)miR-495-3p是促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞形成的miRNA癌基因進(jìn)行研究,并進(jìn)一步探討miR-495-3p是否通過抑制WIF1促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的多能性。本實(shí)驗(yàn)對(duì)miR-495-3p在結(jié)腸癌細(xì)胞生長的作用及其可能機(jī)制進(jìn)行探討,旨在為結(jié)腸癌的發(fā)病機(jī)制提供一個(gè)新的視角,發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌治療的潛在新方向。方法用實(shí)時(shí)PCR檢測細(xì)胞中miRNA和mRNA的水平,用MTT實(shí)驗(yàn)評(píng)估細(xì)胞活性。通過克隆試驗(yàn)判斷細(xì)胞成球率,用蛋白印跡法檢測蛋白表達(dá),CHIP試驗(yàn)檢測β-連環(huán)蛋白結(jié)合能力。利用熒光素酶試驗(yàn)檢測miRNA目標(biāo)基因。結(jié)果(1)MiR-4...

【文章頁數(shù)】：121 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 miR-495-3p在結(jié)腸癌組織及細(xì)胞株的表達(dá)
    一 材料與方法
    二 結(jié)果
    三 討論
    四 小結(jié)
第二章 Mir-495-3p促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞活性
    一 材料與方法
    二 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    三 討論
    四 小結(jié)
第三章 MiR-495-3p促進(jìn)Wnt信號(hào)通路
    一 材料與方法
    二 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    三 討論
    四 小結(jié)
第四章 miR-495-3p靶向WIF1促進(jìn)Wnt信號(hào)通路
    一 材料與方法
    二 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    三 討論
    四 小結(jié)
全文小結(jié)
展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附件
成果
致謝



本文編號(hào)：3923706