研究背景:胃癌是全世界最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在中國(guó)胃癌發(fā)病率和死亡率都高居腫瘤排行榜前列。目前胃癌的治療方法主要是早期手術(shù)治療,晚期化療,由于早期胃癌癥狀隱匿而且中國(guó)沒(méi)有普及胃癌篩查項(xiàng)目,因此大多數(shù)患者被確診時(shí)已進(jìn)展為中晚期,失去了手術(shù)治療的指征。臨床研究顯示,不同化療方案下的中晚期胃癌患者總體生存時(shí)間到了平臺(tái)階段,中位數(shù)徘徊在9到11個(gè)月,而現(xiàn)有的已通過(guò)臨床試驗(yàn)進(jìn)入臨床的胃癌靶向藥種類有限,療效不明顯,聯(lián)合了分子靶向藥的化療方案沒(méi)有對(duì)患者生存時(shí)間和生活質(zhì)量有顯著提升的作用,因此有研究新的作用靶點(diǎn)的需要。作為腫瘤特有的代謝方式,有氧性糖酵解,即Warburg效應(yīng),廣泛存在于各種類型的腫瘤,因此具有成為新的作用靶點(diǎn)的可能。糖酵解中的關(guān)鍵酶之一,己糖激酶1(HK-Ⅰ)和HK-Ⅱ(HK2)已被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中高表達(dá),它們不僅能調(diào)高腫瘤的糖酵解水平,還具有非酶活性,能抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)控細(xì)胞自噬,對(duì)細(xì)胞的惡性生物學(xué)有促進(jìn)作用,被認(rèn)為是潛在的作用靶點(diǎn)。己糖激酶類最晚被發(fā)現(xiàn)的己糖激酶結(jié)構(gòu)域1(HKDC1)同樣具有類似的結(jié)構(gòu),因此推測(cè)具有類似的功能,但相關(guān)研究極少,因此本文將探索其與胃癌的關(guān)系。目的:...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－３Ｋａｐｌａｎ－ＭｅｉｓｅｒＰｌｏｔｔｉｎｇ數(shù)據(jù)庫(kù)獲取胃癌數(shù)據(jù)繪制的ＨＫＤＣ１生存曲線（Ａ）和ＧＥＯ??

ＨＫＤＣ１表達(dá)差異明顯的Ｏｏｉ胃癌芯片（ＧＳＥ１５４５９）的生存數(shù)據(jù)，易彳除刪失的??數(shù)據(jù)以后，共計(jì)有１９２個(gè)患者的ＨＫＤＣ１表達(dá)度及生存時(shí)間，繪制ＩＣａｐｌａｎ－Ｍｅｉｓｅｒ??曲線圖（圖２－３），ＨＫＤＣ１高表達(dá)患者總體生存時(shí)間也同樣顯著短于ＨＫＤＣ１??低表達(dá)患者（ｌｏｇ－....

圖３－１五種胃癌細(xì)胞系勻人類正常Ｐｉ１粘膜丨？．皮細(xì)胞系ＧＥＳ－丨中ＨＫＤＣ１?／丨：ｍＲＮＡ與蚩白??

水平和蛋白質(zhì)水平ＨＫＤＣ１的表達(dá)情況。結(jié)果均顯示，ＧＥＳ－１的ＨＫＤＣ１表達(dá)??度極低，而人類胃癌細(xì)胞系中ＭＫＮ４５細(xì)胞的ＨＫＤＣ１表達(dá)度最高，其余幾種??胃癌細(xì)胞系均有不同程度的ＨＫＤＣ１表達(dá)（圖３－丨、３－２）。因此選�。停耍危矗�??細(xì)胞作為研究ＨＫＤＣ１在胃癌細(xì)胞中的致癌功....

圖３－２五種胃癌細(xì)胞系與人類正常胃粘膜上皮細(xì)胞系ＧＥＳ－１的蛋白免疫印跡條帶

水平和蛋白質(zhì)水平ＨＫＤＣ１的表達(dá)情況。結(jié)果均顯示，ＧＥＳ－１的ＨＫＤＣ１表達(dá)??度極低，而人類胃癌細(xì)胞系中ＭＫＮ４５細(xì)胞的ＨＫＤＣ１表達(dá)度最高，其余幾種??胃癌細(xì)胞系均有不同程度的ＨＫＤＣ１表達(dá)（圖３－丨、３－２）。因此選�。停耍危矗�??細(xì)胞作為研究ＨＫＤＣ１在胃癌細(xì)胞中的致癌功....

圖３－３同一視野倒置熒光顯微鏡４００ｘ下明場(chǎng)（Ａ）和藍(lán)光激發(fā)（Ｂ）的細(xì)胞

首先使用帶綠色熒光的ＦＡＭ轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照ｓｉＲＮＡ摸索轉(zhuǎn)染濃度，轉(zhuǎn)染６??小時(shí)后在熒光倒置顯微鏡的藍(lán)色熒光下觀察熒光和明場(chǎng)下的細(xì)胞數(shù)，結(jié)果如下??圖，經(jīng)過(guò)對(duì)比顯示轉(zhuǎn)染效率接近１００％?（圖３－３）。然后用免疫蛋白印跡檢測(cè)用??ｓｉＨＫＤＣｌ沉默ＨＫＤＣ１以后的沉默效率，結(jié)果表明相比....

本文編號(hào)：3922422