背景PTEN是在許多類(lèi)型的人類(lèi)惡性腫瘤中,經(jīng)常發(fā)生突變、缺失和轉(zhuǎn)錄沉默的抑癌基因。作為經(jīng)典的PI3K/Akt促細(xì)胞生長(zhǎng)信號(hào)通路的負(fù)調(diào)控因子,PTEN通過(guò)其脂質(zhì)磷酸酶活性,將磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)去磷酸化為磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2),從而抑制了細(xì)胞存活、增殖和血管生成。另外,PTEN通過(guò)其蛋白磷酸酶活性能夠使腫瘤細(xì)胞代謝需要的蛋白質(zhì)和肽底物去磷酸化,抑制腫瘤細(xì)胞侵襲。因?yàn)镻TEN蛋白上缺少典型的核定位信號(hào)(NLS),最初研究認(rèn)為PTEN完全定位于細(xì)胞質(zhì)。近年來(lái),有大量研究發(fā)現(xiàn)在人類(lèi)神經(jīng)元,甲狀腺組織,胰腺細(xì)胞,食管鱗狀細(xì)胞癌,血管平滑肌細(xì)胞和腸粘膜中存在核PTEN的表達(dá),但核PTEN具體能發(fā)揮什么樣的生物學(xué)功能,迄今為止報(bào)道較少。蛋白質(zhì)的核移位指的是真核細(xì)胞內(nèi)大量的信號(hào)蛋白和分子通過(guò)核孔復(fù)合物在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)之間進(jìn)行交換的生物學(xué)現(xiàn)象,其意義在于,通過(guò)核移位機(jī)制,信號(hào)蛋白和分子可以通過(guò)對(duì)細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)信號(hào)通路的調(diào)節(jié),更有效、精細(xì)地調(diào)控細(xì)胞的增殖、凋亡、癌變等生理或病理進(jìn)程,進(jìn)而加速或延緩疾病的進(jìn)展。中波紫外線(UVB)是太陽(yáng)光中波長(zhǎng)為280 nm-320 nm...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1.1不同劑量紫外輻射對(duì)U87細(xì)胞的損傷（A）為不同劑量梯度的紫外（0mj/cm2、60mj/cm2、120mj/cm2、240mj/cm2、48022960060120240480960活率（輻照組存

3.1紫外輻照細(xì)胞模型的構(gòu)建結(jié)果（1）本實(shí)驗(yàn)將U87細(xì)胞分為對(duì)照組與紫外輻照組（60mj/cm2、120mj/cm2、24m2、480mj/cm2、960mj/cm2），檢測(cè)紫外輻照劑量對(duì)細(xì)胞增殖的影響。96孔板每孔10000個(gè)細(xì)胞，每組設(shè)置5個(gè)復(fù)孔。待細(xì)....

圖3.1.2紫外輻照后培養(yǎng)時(shí)間對(duì)U87細(xì)胞增殖的影響

PTEN核移位對(duì)腫瘤細(xì)胞輻射損傷的作用為不同劑量梯度的紫外（0mj/cm2、60mj/cm2、120mj/cm2、240mj/cm2、480mj/cm2、960mj/cm2）作用于U87細(xì)胞24h后，顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)的觀察。（2）隨后檢測(cè)紫外輻照（輻照劑量為....

圖3.2.1真核表達(dá)載體的鑒定1：PEGFP-N1-WT-PTEN；2：PEGFP-N1-K13E-PTEN；3：PEGFP-N1-K289E-PTEN；

7細(xì)胞經(jīng)同一劑量紫外輻照后不同培養(yǎng)時(shí)間（0h、12h、TT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性的結(jié)果；（B）為U87細(xì)胞對(duì)照組及其單泛素化位點(diǎn)突變體的亞細(xì)胞定位表達(dá)載體的鑒定T-PTEN、PEGFP-N1-K13E-PTEN、PEGFP-N1-K2+K289E-PTEN等重....

圖3.2.2重組質(zhì)粒在U87細(xì)胞中的表達(dá)結(jié)果圖

圖3.2.2重組質(zhì)粒在U87細(xì)胞中的表達(dá)結(jié)果圖離子將PEGFP-N1-WT-PTEN、PEGFP-N1-K13上層為熒光下拍攝，下層為明場(chǎng)拍攝；（B）體對(duì)照的慢病毒，感染入U(xiǎn)87細(xì)胞，上層為熒sternblot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PTEN及其突變體在U87細(xì)胞及其....

本文編號(hào)：3915843