背景PTEN是在許多類型的人類惡性腫瘤中,經(jīng)常發(fā)生突變、缺失和轉(zhuǎn)錄沉默的抑癌基因。作為經(jīng)典的PI3K/Akt促細胞生長信號通路的負調(diào)控因子,PTEN通過其脂質(zhì)磷酸酶活性,將磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PIP3)去磷酸化為磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2),從而抑制了細胞存活、增殖和血管生成。另外,PTEN通過其蛋白磷酸酶活性能夠使腫瘤細胞代謝需要的蛋白質(zhì)和肽底物去磷酸化,抑制腫瘤細胞侵襲。因為PTEN蛋白上缺少典型的核定位信號(NLS),最初研究認為PTEN完全定位于細胞質(zhì)。近年來,有大量研究發(fā)現(xiàn)在人類神經(jīng)元,甲狀腺組織,胰腺細胞,食管鱗狀細胞癌,血管平滑肌細胞和腸粘膜中存在核PTEN的表達,但核PTEN具體能發(fā)揮什么樣的生物學功能,迄今為止報道較少。蛋白質(zhì)的核移位指的是真核細胞內(nèi)大量的信號蛋白和分子通過核孔復合物在細胞核與細胞質(zhì)之間進行交換的生物學現(xiàn)象,其意義在于,通過核移位機制,信號蛋白和分子可以通過對細胞核或細胞質(zhì)內(nèi)信號通路的調(diào)節(jié),更有效、精細地調(diào)控細胞的增殖、凋亡、癌變等生理或病理進程,進而加速或延緩疾病的進展。中波紫外線(UVB)是太陽光中波長為280 nm-320 nm...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1.1不同劑量紫外輻射對U87細胞的損傷（A）為不同劑量梯度的紫外（0mj/cm2、60mj/cm2、120mj/cm2、240mj/cm2、48022960060120240480960活率（輻照組存

3.1紫外輻照細胞模型的構(gòu)建結(jié)果（1）本實驗將U87細胞分為對照組與紫外輻照組（60mj/cm2、120mj/cm2、24m2、480mj/cm2、960mj/cm2），檢測紫外輻照劑量對細胞增殖的影響。96孔板每孔10000個細胞，每組設(shè)置5個復孔。待細....

圖3.1.2紫外輻照后培養(yǎng)時間對U87細胞增殖的影響

PTEN核移位對腫瘤細胞輻射損傷的作用為不同劑量梯度的紫外（0mj/cm2、60mj/cm2、120mj/cm2、240mj/cm2、480mj/cm2、960mj/cm2）作用于U87細胞24h后，顯微鏡下細胞形態(tài)的觀察。（2）隨后檢測紫外輻照（輻照劑量為....

圖3.2.1真核表達載體的鑒定1：PEGFP-N1-WT-PTEN；2：PEGFP-N1-K13E-PTEN；3：PEGFP-N1-K289E-PTEN；

7細胞經(jīng)同一劑量紫外輻照后不同培養(yǎng)時間（0h、12h、TT實驗檢測細胞活性的結(jié)果；（B）為U87細胞對照組及其單泛素化位點突變體的亞細胞定位表達載體的鑒定T-PTEN、PEGFP-N1-K13E-PTEN、PEGFP-N1-K2+K289E-PTEN等重....

圖3.2.2重組質(zhì)粒在U87細胞中的表達結(jié)果圖

圖3.2.2重組質(zhì)粒在U87細胞中的表達結(jié)果圖離子將PEGFP-N1-WT-PTEN、PEGFP-N1-K13上層為熒光下拍攝，下層為明場拍攝；（B）體對照的慢病毒，感染入U87細胞，上層為熒sternblot實驗檢測PTEN及其突變體在U87細胞及其....

本文編號：3915843