乳腺癌(Breast cancer)是女性最常見的惡性腫瘤,是導致女性死亡的第二大癌癥原因。近年來,隨著腫瘤個體化治療的不斷發(fā)展,乳腺癌患者的預后得到很大改善。但是,腫瘤的復發(fā)和患者的耐藥已成為困擾臨床治療的另一難題。抗人類表皮生長因子受體2(HER2)靶向治療藥物——曲妥珠單抗(又稱赫賽汀)是臨床治療HER2擴增型乳腺癌的一線藥物。但是,其最終耐藥率高達65%,這其中包括70%的患者在治療初期對曲妥珠單抗治療敏感,最終也獲得耐藥性。因此,研究發(fā)現(xiàn)一些預測乳腺癌患者對曲妥珠單抗治療的耐藥性的可靠生物學指標以及患者預后的預測因子勢在必行,旨在更好的指導臨床選擇個體化治療方案,及闡明乳腺癌患者獲得耐藥的潛在分子機制,為二線療法與藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。Hippo通路是近年來新發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關信號轉導通路,其通過調(diào)節(jié)細胞的凋亡和增殖,在維持組織器官大小及腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。Yesassociated protein(YAP)蛋白是Hippo通路的下游效應因子,是一種轉錄共激活因子,而且YAP蛋白在多種人類腫瘤中都存在不同程度的表達。YAP蛋白與不同的轉錄因子相互作用,決定其在腫瘤生物...

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
常用縮略詞中英文對照表
前言
第1章 綜述
    1.1 乳腺癌的分子分型
    1.2 乳腺癌新輔助化療
    1.3 曲妥珠單抗耐藥性的相關機制
    1.4 Hippo信號通路的核心組件
    1.5 YAP蛋白在腫瘤中的生物學作用
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 臨床樣本及實驗用細胞株
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 試劑配制
    2.2 主要儀器設備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 免疫組織化學染色
        2.3.2 免疫組織化學評分系統(tǒng)
        2.3.3 細胞的培養(yǎng)與傳代
        2.3.4 凍存細胞的復蘇
        2.3.5 培養(yǎng)細胞的凍存
        2.3.6 細胞轉染
        2.3.7 干擾序列與載體
        2.3.8 CCK8法檢測細胞活力
        2.3.9 流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
        2.3.10 Western blot免疫印跡法檢測蛋白表達實驗
        2.3.11 RT-qPCR實驗
        2.3.12 統(tǒng)計學分析
第3章 實驗結果與分析
    3.1 檢測YAP蛋白在乳腺癌樣本中的表達水平及其臨床意義
        3.1.1 YAP蛋白在乳腺癌樣本中表達水平的檢測
        3.1.2 YAP蛋白表達與乳腺癌患者各臨床病理學特征的相關性
        3.1.3 YAP蛋白在乳腺上皮細胞和乳腺癌細胞中的表達情況
        3.1.4 YAP蛋白表達對乳腺癌患者生存期的預測意義
    3.2 YAP對乳腺癌細胞曲妥珠單抗耐藥性的影響
        3.2.1 YAP蛋白在曲妥珠單抗治療敏感以及治療耐藥乳腺癌細胞株中的表達情況
        3.2.2 乳腺癌細胞經(jīng)曲妥珠單抗治療后YAP蛋白表達量的變化情況
        3.2.3 乳腺癌細胞經(jīng)曲妥珠單抗治療后AKT和MAPK通路蛋白的磷酸化水平變化情況
        3.2.4 在BT474-TS中沉默YAP基因并獲得穩(wěn)定沉默細胞株..
        3.2.5 YAP蛋白表達對曲妥珠單抗誘導乳腺癌細胞凋亡的影響.
        3.2.6 AKT抑制劑抑制BT474-TR細胞對曲妥珠單抗治療的耐藥性
    3.3 YAP、AKT、p-AKT和p73在新輔助化療患者樣本中的表達情況及臨床意義
        3.3.1 YAP、AKT、p-AKT和p73在新輔助化療患者樣本中的表達情況
        3.3.2 新輔助化療前樣本中YAP、AKT、p-AKT和p73的表達與患者pCR率的相關性分析
第4章 討論
    4.1 YAP在乳腺癌中的臨床意義
    4.2 YAP對HER2擴增型乳腺癌曲妥珠單抗耐藥性的影響
    4.3 YAP作為治療療效的預測因素
第5章 結論
第6章 論文創(chuàng)新性總結
參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3881303