目的:通過比較miR-106b,miR-93在乳腺癌不同轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞株中(MCF-7,MDA-MB-231)的表達(dá)差異,闡明miRNAs在乳腺癌進(jìn)展中的功能機(jī)制,為乳腺癌的早期診斷及治療提供新的指導(dǎo)方向。方法:(1)通過qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)乳腺癌組織及細(xì)胞中miR-106b,miR-93的相對(duì)表達(dá)情況。(2)通過基因預(yù)測(cè)軟件(TargetScan Human 7.1 and microRNA.org)預(yù)測(cè)miR-106b,miR-93的靶基因并采用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)在乳腺癌細(xì)胞中確證miRNAs與靶向分子的調(diào)節(jié)關(guān)系。(3)特異性上調(diào)MCF-7(人類乳腺癌低轉(zhuǎn)移株)中miR-106b,miR-93,下調(diào)MDA-MB-231(人類乳腺癌高轉(zhuǎn)移株)中miR-106b,miR-93,檢測(cè)上調(diào)及下調(diào)前后MCF-7,MDA-MB-231細(xì)胞中PTEN的變化及對(duì)功能實(shí)驗(yàn)的影響。(4)采用逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)PTEN對(duì)上調(diào)miR-106b,miR-93的MCF-7細(xì)胞中PI3K/Akt通路及功能試驗(yàn)的影響,同時(shí)檢測(cè)下調(diào)PTEN對(duì)干擾miR-106b,miR-93的MDA-MB-231細(xì)胞中PI3K/Akt...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 臨床標(biāo)本
        2.3 RNA提取Real-time PCR
        2.4 免疫組化分析（IHC）
        2.5 免疫熒光分析（IF）
        2.6 劃痕試驗(yàn)
        2.7 侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) (CCK8)
        2.9 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        2.10 免疫印跡分析
        2.11 腫瘤異種移植模型
        2.12 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)
        2.13 轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        2.14 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1. miR-106b, miR-93 在組織及細(xì)胞水平的差異表達(dá)
    2.在乳腺癌中，PTEN是miR-106b與mi R-93 的共同靶基因
    3. miR-106b, miR-93 表達(dá)調(diào)控對(duì)乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    4. miR-106b, miR-93 通過調(diào)控PTEN調(diào)節(jié)乳腺癌的生物學(xué)行為
    5. miR-106b, miR-93 靶向調(diào)控PTEN通過PI3K/Akt通路調(diào)節(jié)乳腺癌的生物學(xué)行為
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 miRNAs與乳腺癌進(jìn)展相關(guān)性的研究
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3868524