目的:通過比較miR-106b,miR-93在乳腺癌不同轉移能力細胞株中(MCF-7,MDA-MB-231)的表達差異,闡明miRNAs在乳腺癌進展中的功能機制,為乳腺癌的早期診斷及治療提供新的指導方向。方法:(1)通過qRT-PCR技術檢測乳腺癌組織及細胞中miR-106b,miR-93的相對表達情況。(2)通過基因預測軟件(TargetScan Human 7.1 and microRNA.org)預測miR-106b,miR-93的靶基因并采用雙熒光素酶實驗在乳腺癌細胞中確證miRNAs與靶向分子的調節(jié)關系。(3)特異性上調MCF-7(人類乳腺癌低轉移株)中miR-106b,miR-93,下調MDA-MB-231(人類乳腺癌高轉移株)中miR-106b,miR-93,檢測上調及下調前后MCF-7,MDA-MB-231細胞中PTEN的變化及對功能實驗的影響。(4)采用逆轉實驗檢測過表達PTEN對上調miR-106b,miR-93的MCF-7細胞中PI3K/Akt通路及功能試驗的影響,同時檢測下調PTEN對干擾miR-106b,miR-93的MDA-MB-231細胞中PI3K/Akt...

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 實驗材料
        1.1 實驗對象
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2. 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 臨床標本
        2.3 RNA提取Real-time PCR
        2.4 免疫組化分析（IHC）
        2.5 免疫熒光分析（IF）
        2.6 劃痕試驗
        2.7 侵襲實驗
        2.8 細胞增殖實驗 (CCK8)
        2.9 克隆形成實驗
        2.10 免疫印跡分析
        2.11 腫瘤異種移植模型
        2.12 雙熒光素酶報告實驗
        2.13 轉染實驗
        2.14 統(tǒng)計分析
結果
    1. miR-106b, miR-93 在組織及細胞水平的差異表達
    2.在乳腺癌中，PTEN是miR-106b與mi R-93 的共同靶基因
    3. miR-106b, miR-93 表達調控對乳腺癌細胞生物學行為的影響
    4. miR-106b, miR-93 通過調控PTEN調節(jié)乳腺癌的生物學行為
    5. miR-106b, miR-93 靶向調控PTEN通過PI3K/Akt通路調節(jié)乳腺癌的生物學行為
討論
結論
參考文獻
綜述 miRNAs與乳腺癌進展相關性的研究
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3868524