研究背景與目的在我國(guó)胃癌是一個(gè)不容忽視的健康問(wèn)題,發(fā)病率和死亡率極高且預(yù)后相對(duì)較差。代謝重編程是癌癥特征之一,谷氨酰胺分解代謝是代謝重編程的重要途徑,谷氨酰胺作為一種條件性非必需氨基酸,它的分解代謝在提供生物能、生物大分子和維持氧化還原平衡方面扮演了重要角色。谷氨酰胺酶是谷氨酰胺分解代謝的關(guān)鍵酶,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織中谷氨酰胺酶1(GLS1)是高表達(dá)的,胃癌細(xì)胞MGC803和SGC7901的生長(zhǎng)依賴谷氨酰胺,細(xì)胞中GLS1酶活性較高,提示抑制谷氨酰胺酶的活性有望成為有效的腫瘤治療手段。本實(shí)驗(yàn)利用谷氨酰胺酶1特異性抑制劑CB-839研究谷氨酰胺酶1的抑制對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其可能的分子機(jī)制,為靶向谷氨酰胺酶臨床治療胃癌和藥物研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。方法1.采用CCK-8法測(cè)定不同濃度梯度的谷氨酰胺酶抑制劑CB-839對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803和SGC7901增殖活力的影響,分別計(jì)算CB-839對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803和SGC7901的IC50值。2.采用平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)谷氨酰胺酶抑制劑CB-839處理胃癌細(xì)胞MGC803和SGC7901后對(duì)細(xì)胞克隆形成的影響。3.采用流式細(xì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
引言
1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 研究對(duì)象
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.4 溶劑的配置
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 細(xì)胞凍存與培養(yǎng)
    2.2 藥物處理方法
    2.3 CCK8法檢測(cè)抑制谷氨酰胺酶1對(duì)細(xì)胞增殖活力的影響
    2.4 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)抑制谷氨酰胺酶1對(duì)細(xì)胞克隆的影響
    2.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 細(xì)胞劃痕法檢測(cè)谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)細(xì)胞遷移的影響
    2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)侵襲的影響
    2.8 用試劑盒檢測(cè)谷氨酰胺酶1抑制對(duì)ROS的影響
    2.9 Western Blot檢測(cè)谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.10 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 抑制谷氨酰胺酶1對(duì)細(xì)胞增殖活力的影響
    3.2 抑制谷氨酰胺酶1對(duì)細(xì)胞克隆形成的影響
    3.3 谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
    3.4 谷氨酰胺酶1抑制后對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
    3.5 抑制谷氨酰胺酶1對(duì)細(xì)胞侵襲能力的影響
    3.6 抑制谷氨酰胺酶1對(duì)ROS的影響
    3.7 抑制谷氨酰胺酶1對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3854758