研究背景與目的在我國胃癌是一個不容忽視的健康問題,發(fā)病率和死亡率極高且預后相對較差。代謝重編程是癌癥特征之一,谷氨酰胺分解代謝是代謝重編程的重要途徑,谷氨酰胺作為一種條件性非必需氨基酸,它的分解代謝在提供生物能、生物大分子和維持氧化還原平衡方面扮演了重要角色。谷氨酰胺酶是谷氨酰胺分解代謝的關鍵酶,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織中谷氨酰胺酶1(GLS1)是高表達的,胃癌細胞MGC803和SGC7901的生長依賴谷氨酰胺,細胞中GLS1酶活性較高,提示抑制谷氨酰胺酶的活性有望成為有效的腫瘤治療手段。本實驗利用谷氨酰胺酶1特異性抑制劑CB-839研究谷氨酰胺酶1的抑制對胃癌細胞生物學行為的影響及其可能的分子機制,為靶向谷氨酰胺酶臨床治療胃癌和藥物研發(fā)提供實驗依據(jù)和理論基礎。方法1.采用CCK-8法測定不同濃度梯度的谷氨酰胺酶抑制劑CB-839對胃癌細胞MGC803和SGC7901增殖活力的影響,分別計算CB-839對胃癌細胞MGC803和SGC7901的IC50值。2.采用平板克隆實驗檢測谷氨酰胺酶抑制劑CB-839處理胃癌細胞MGC803和SGC7901后對細胞克隆形成的影響。3.采用流式細...

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
縮略詞
引言
1 實驗材料
    1.1 研究對象
    1.2 實驗試劑
    1.3 實驗儀器
    1.4 溶劑的配置
2 實驗方法
    2.1 細胞凍存與培養(yǎng)
    2.2 藥物處理方法
    2.3 CCK8法檢測抑制谷氨酰胺酶1對細胞增殖活力的影響
    2.4 平板克隆實驗檢測抑制谷氨酰胺酶1對細胞克隆的影響
    2.5 流式細胞儀檢測谷氨酰胺酶1抑制后對細胞凋亡的影響
    2.6 細胞劃痕法檢測谷氨酰胺酶1抑制后對細胞遷移的影響
    2.7 Transwell實驗檢測谷氨酰胺酶1抑制后對侵襲的影響
    2.8 用試劑盒檢測谷氨酰胺酶1抑制對ROS的影響
    2.9 Western Blot檢測谷氨酰胺酶1抑制后對相關蛋白表達的影響
    2.10 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計與分析
3 實驗結果
    3.1 抑制谷氨酰胺酶1對細胞增殖活力的影響
    3.2 抑制谷氨酰胺酶1對細胞克隆形成的影響
    3.3 谷氨酰胺酶1抑制后對細胞凋亡的影響
    3.4 谷氨酰胺酶1抑制后對細胞遷移能力的影響
    3.5 抑制谷氨酰胺酶1對細胞侵襲能力的影響
    3.6 抑制谷氨酰胺酶1對ROS的影響
    3.7 抑制谷氨酰胺酶1對相關蛋白表達的影響
4 討論
5 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
個人簡歷
致謝



本文編號：3854758