目的研究miR-191過表達(dá)對自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK)的凋亡和腫瘤殺傷活性的影響。方法通過免疫磁珠陰性分選方法從小鼠脾臟中分離NK細(xì)胞,體外用IL-2刺激擴(kuò)增5～7 d后,采用流式細(xì)胞術(shù)分析NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性和凋亡情況。制備小鼠骨髓、脾臟、淋巴結(jié)和胸腺的單細(xì)胞懸液,計算細(xì)胞總數(shù)后,采用流式細(xì)胞術(shù)分析NK細(xì)胞的比例和數(shù)量。結(jié)果與野生型(WT)小鼠相比,miR-191過表達(dá)轉(zhuǎn)基因TgmiR-191小鼠NK細(xì)胞的凋亡率及其對小鼠淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞RMA-S的特異性殺傷活性均顯著降低。miR-191過表達(dá)可顯著增加脾臟和淋巴結(jié)的NK細(xì)胞數(shù)量。結(jié)論 miR-191過表達(dá)對NK細(xì)胞的腫瘤殺傷活性和細(xì)胞凋亡有明顯的抑制作用。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物與細(xì)胞系
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 NK細(xì)胞分選與IL-2刺激
    1.4 NK細(xì)胞純度分析
    1.5 細(xì)胞毒活性檢測
    1.6 細(xì)胞凋亡分析
    1.7 免疫器官中NK細(xì)胞數(shù)量分析
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NK細(xì)胞純度
    2.2 過表達(dá)mi R-191抑制NK細(xì)胞的腫瘤殺傷活性
    2.3 過表達(dá)mi R-191降低NK細(xì)胞的凋亡
    2.4過表達(dá)miR-191對小鼠免疫器官中NK細(xì)胞數(shù)量的影響
3 討論



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