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重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)檢測前列腺癌相關(guān)SNP位點(diǎn)方法的建立和初步評價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2023-03-04 21:36
  第一部分重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)檢測兩個(gè)SNP位點(diǎn)方法的建立目的:建立一種快速、高效且經(jīng)濟(jì)的方法對位于8q24上兩個(gè)SNP位點(diǎn)(rs6983267和rs1447295)進(jìn)行準(zhǔn)確分型。方法:運(yùn)用重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增(Recombinase aided amplification,RAA)技術(shù)建立一種基于兩重探針指導(dǎo)的重組酶擴(kuò)增(duplex probe-directed recombinase amplification,duplex-PDRA)同時(shí)檢測兩個(gè)SNP的檢測方法,并遵循兩重PDRA的原理及引物探針的設(shè)計(jì)原則,進(jìn)行兩個(gè)SNP位點(diǎn)對應(yīng)的引物和探針的設(shè)計(jì),通過構(gòu)建的重組質(zhì)粒來評價(jià)方法的靈敏度與特異性,并對于2018年11月至2019年11月,在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科收集的前列腺癌病人抗凝全血標(biāo)本或血凝塊標(biāo)本共179份進(jìn)行檢測分型,同時(shí)用測序法驗(yàn)證,以評價(jià)方法對臨床樣本檢測的穩(wěn)定性。結(jié)果:本研究所建立的兩重PDRA方法可在30 min內(nèi)39℃條件下識別兩個(gè)SNP位點(diǎn)(rs6983267和rs1447295)的四個(gè)不同等位基因,其靈敏度可達(dá)到103~104<...

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
引言
第一部分 重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)檢測兩個(gè)SNP位點(diǎn)方法的建立
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 8q24上兩個(gè)SNP位點(diǎn)與前列腺癌相關(guān)性的研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
綜述 單核苷酸多態(tài)性檢測方法的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號:3755044

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