發(fā)布時(shí)間：2022-04-28 21:33

　　目的:探討S100A6經(jīng)由巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的促血管生成作用及機(jī)制。方法:（1）用重組蛋白GST-hS100A6處理巨噬細(xì)胞后:①收集上清制備條件培養(yǎng)基（簡(jiǎn)稱(chēng)A6-Mφ-CM）,并用之重懸人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）,用體外血管形成試驗(yàn)檢測(cè)各處理因素對(duì)血管形成的影響;②分別用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)巨噬細(xì)胞的M2型標(biāo)志物CD163及促血管形成因子CCL2、IL-6、VEGFA的mRNA和蛋白質(zhì)水平,以及JAK2和STAT3的蛋白質(zhì)及其磷酸化水平;③用Transwell遷移試驗(yàn)檢測(cè)巨噬細(xì)胞遷移能力的變化。（2）使用JAK2抑制劑（XL019）預(yù)處理巨噬細(xì)胞后再加GST-hS100A6處理,檢測(cè)S100A6促巨噬細(xì)胞遷移作用的變化。以重組蛋白GST為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。結(jié)果:（1） A6-Mφ-CM組的血管分支數(shù)和血管分支長(zhǎng)度既明顯高于GST-Mφ-CM組（P值均小于0.05）,也明顯高于GST-hS100A6直接處理的HUVEC組（P <0.001,P <0.01）,提示S100A6處理后的巨噬細(xì)胞具有促進(jìn)血管形成的作用;（2） GST-hS100A6處理后的巨噬細(xì)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞
        1.1.2 質(zhì)粒及細(xì)菌
        1.1.3 Transwell小室
        1.1.4 血管形成基質(zhì)膠
        1.1.5 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 GST-hS100A6和GST的制備及鑒定
        1.2.3 細(xì)胞免疫熒光染色
        1.2.4 血管形成試驗(yàn)
        1.2.5 RNA提取和實(shí)時(shí)熒光定量
        1.2.6 Western blot
        1.2.7 巨噬細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        1.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 PMA成功誘導(dǎo)人單核巨噬細(xì)胞系THP-1為巨噬細(xì)胞
    2.2 S100A6誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向促血管表型(pro-angiogenic phenotype)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)新生血管形成
    2.3 S100A6有招募巨噬細(xì)胞的作用，其機(jī)制涉及JAK2/STAT3信號(hào)通路的活化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]S100A6通過(guò)巨噬細(xì)胞促結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖的作用及機(jī)制[J]. 陳露,黃茂,彭棋,趙佳麗,謝佳卿,林璐,戶(hù)麗君,黃逸云,胡琴,周蘭.  中國(guó)生物工程雜志. 2019(04)
[2]微環(huán)境中S100A6直接和間接促進(jìn)結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞遷移[J]. 趙佳麗,謝佳卿,谷月,李?lèi)?ài)芳,陳露,黃茂,彭琪,曾宗躍,周蘭.  腫瘤. 2018(06)
[3]S100A6促宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移及其可能機(jī)制研究[J]. 李?lèi)?ài)芳,谷月,李雪茹,孫暉,查何,謝佳卿,趙佳麗,周蘭.  中國(guó)生物工程雜志. 2017(02)



本文編號(hào)：3649575