發(fā)布時(shí)間：2022-04-21 21:41

　　目的:探討下調(diào)GTPBP4的表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,以及GTPBP4在胃癌發(fā)病中的可能作用機(jī)制。方法:1.通過(guò)基因芯片檢測(cè)30例胃癌患者中胃癌及癌旁組織中差異表達(dá)基因,HCS（High Content screening,高內(nèi)涵篩選）篩選出候選差異高表達(dá)基因GTPBP4,并通過(guò)臨床相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),分析GTPBP4高表達(dá)與腫瘤分期及預(yù)后的關(guān)系。2.實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)各胃癌細(xì)胞株和胃粘膜細(xì)胞中GTPBP4表達(dá)情況;通過(guò)構(gòu)建攜帶GTPBP4特異性sh RNA的慢病毒載體,包裝病毒顆粒后分別感染野生型P53胃癌細(xì)胞株MKN-45細(xì)胞及AGS細(xì)胞,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)干擾效率。進(jìn)一步分別通過(guò)MTT法、流式細(xì)胞術(shù)及細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)觀察下調(diào)GTPBP4基因表達(dá)后對(duì)MKN-45細(xì)胞及AGS細(xì)胞增殖、凋亡、克隆形成的影響。3.利用基因芯片技術(shù)比較下調(diào)GTPBP4表達(dá)前后MKN-45細(xì)胞的基因表達(dá)變化,推測(cè)GTPBP4可能參與的信號(hào)通路,并通過(guò)Western blot檢測(cè)證實(shí)。結(jié)果:1.經(jīng)基因芯片篩選,在胃癌組織和癌旁組織之間共發(fā)現(xiàn)有顯著表達(dá)差異的基因共1745個(gè),其中表達(dá)上調(diào)的有889個(gè),下調(diào)的... 

【文章頁(yè)數(shù)】：110 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 胃癌差異表達(dá)基因檢測(cè)及候選基因GTPBP4的檢測(cè)
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
    4.結(jié)論
第二部分 GTPBP4在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)及下調(diào) GTPBP4 表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
    4.結(jié)論
第三部分 GTPBP4/P53通路在胃癌發(fā)病機(jī)制中的作用初探
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
    4.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文、獲獎(jiǎng)和課題
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3646671