白血病細胞誘導(dǎo)分化過程中nm23-H1表達變化及分子調(diào)控機制的研究
發(fā)布時間:2022-02-26 12:40
白血病是世界范圍內(nèi)常見血液系統(tǒng)的惡性克隆性疾。℉M),尤其是在青少年中的發(fā)病率和致死率較高,目前大部分仍無法治愈,臨床化療放療或者藥物誘導(dǎo)并不能完全使患者康復(fù)痊愈率低。白血病是由于造血細胞的某一系列或者是某一白細胞前體細胞失去分化成熟能力,分化成熟受到阻礙,正常凋亡途徑發(fā)生障礙,以至于出現(xiàn)了大量的異常分化的細胞,正常成熟的血液細胞減少,一系列臨床癥狀出現(xiàn),誘發(fā)白血病。因此,抑制白血病細胞增殖、促進細胞的分化與凋亡是治療白血病的有效途徑。目前,用于血液惡性腫瘤的治療有著非常多的治療方案,如前沿技術(shù)干細胞治療、誘導(dǎo)分化藥物的應(yīng)用、免疫生物學(xué)療法等等。但是這些治療方法在發(fā)揮抗白血病的同時也存在諸多的不足之處:臨床上的放療和化療雖然能使白血病緩解和暫時控制,但它缺乏特異性,在殺傷白血病細胞的同時,正常細胞也受到損傷。骨髓移植得到一定范圍的肯定和推廣,在白血病的治療中起到很大的作用,但容易出現(xiàn)異體排斥和殘留白血病細胞復(fù)發(fā)。對與血液惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān)的某些關(guān)鍵基因的研究,已經(jīng)成為根治血液腫瘤的著力點。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23-H1是Steeg等用消減雜交法分離鑒定出來的,該基因是nm23基因家族...
【文章來源】:濟南大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號表
前言
材料與方法
1.1 實驗材料和器材設(shè)備
1.1.1 實驗材料
1.1.2 主要儀器設(shè)備
1.2 白血病細胞的培養(yǎng)
1.3 實驗?zāi)P偷慕?br> 1.3.1 細胞增殖抑制實驗CCK8
1.3.2 瑞吉染色觀察細胞形態(tài)
1.3.3 表面分化抗原用流式細胞術(shù)檢測
1.3.4 建立模型
1.4 ATRA誘導(dǎo)HL60與PMA誘導(dǎo)THP-1 后基因的檢測
1.4.1 RT-PCR檢測誘導(dǎo)后HL-60細胞和THP-1 細胞中基因表達的變化
1.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
1.4.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
1.4.4 1%瓊脂糖凝膠電泳
1.5 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
1.5.1 制備蛋白樣品
1.5.2 SDS-PAGE電泳
1.5.3 灌膠與上樣
1.5.4 轉(zhuǎn)膜
1.5.5 免疫反應(yīng)
1.5.6 化學(xué)發(fā)光顯色
1.6 用ELISA檢測G-CSF的表達水平
結(jié)果
2.1 CCK8實驗檢測藥物對細胞增殖的影響
2.2 細胞形態(tài)學(xué)的變化
2.3 細胞表面分化抗原變化
2.4 nm23-H1、c-Myc、G-CSF mRNA水平的表達變化
2.5 nm23-H1、c-Myc基因在蛋白水平上的表達變化
2.6 用ELISA檢測G-CSF的表達水平
討論
結(jié)論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]nm23-H1過表達對人白血病細胞系HL60細胞周期和分化的影響[J]. 袁茵,魯欣,張美英,黃樹林,王一飛. 腫瘤防治研究. 2007(03)
[2]RNAi技術(shù)沉默K562細胞中c-myc基因的初步研究[J]. 岳楓,馬文麗,宋艷斌,石嶸,張寶,鄭文嶺. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2005(06)
本文編號:3644538
【文章來源】:濟南大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號表
前言
材料與方法
1.1 實驗材料和器材設(shè)備
1.1.1 實驗材料
1.1.2 主要儀器設(shè)備
1.2 白血病細胞的培養(yǎng)
1.3 實驗?zāi)P偷慕?br> 1.3.1 細胞增殖抑制實驗CCK8
1.3.2 瑞吉染色觀察細胞形態(tài)
1.3.3 表面分化抗原用流式細胞術(shù)檢測
1.3.4 建立模型
1.4 ATRA誘導(dǎo)HL60與PMA誘導(dǎo)THP-1 后基因的檢測
1.4.1 RT-PCR檢測誘導(dǎo)后HL-60細胞和THP-1 細胞中基因表達的變化
1.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
1.4.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
1.4.4 1%瓊脂糖凝膠電泳
1.5 蛋白質(zhì)免疫印跡分析
1.5.1 制備蛋白樣品
1.5.2 SDS-PAGE電泳
1.5.3 灌膠與上樣
1.5.4 轉(zhuǎn)膜
1.5.5 免疫反應(yīng)
1.5.6 化學(xué)發(fā)光顯色
1.6 用ELISA檢測G-CSF的表達水平
結(jié)果
2.1 CCK8實驗檢測藥物對細胞增殖的影響
2.2 細胞形態(tài)學(xué)的變化
2.3 細胞表面分化抗原變化
2.4 nm23-H1、c-Myc、G-CSF mRNA水平的表達變化
2.5 nm23-H1、c-Myc基因在蛋白水平上的表達變化
2.6 用ELISA檢測G-CSF的表達水平
討論
結(jié)論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]nm23-H1過表達對人白血病細胞系HL60細胞周期和分化的影響[J]. 袁茵,魯欣,張美英,黃樹林,王一飛. 腫瘤防治研究. 2007(03)
[2]RNAi技術(shù)沉默K562細胞中c-myc基因的初步研究[J]. 岳楓,馬文麗,宋艷斌,石嶸,張寶,鄭文嶺. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2005(06)
本文編號:3644538
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/zlx/3644538.html
最近更新
教材專著