發(fā)布時(shí)間：2021-12-17 03:29

　　【研究背景】肝癌是一種發(fā)生于肝臟上的惡性腫瘤,其中肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是目前發(fā)病率和死亡率最高的原發(fā)性肝癌。肝細(xì)胞肝癌手術(shù)難度大,風(fēng)險(xiǎn)高且安全性差,利用術(shù)中實(shí)時(shí)顯像技術(shù)可清楚地觀察到腫瘤邊緣,極大地提升手術(shù)質(zhì)量。近紅外熒光（Near-infrared fluorescence,NIRF）染料具有腫瘤聚集能力,可通過熒光顯像系統(tǒng)實(shí)時(shí)觀察到腫瘤的范圍與邊界。最具有代表性的NIRF染料為吲哚青綠（Indocyanine green,ICG）,自上世界90年代起就已經(jīng)應(yīng)用于胃底血管造影術(shù),四肢淋巴結(jié)顯像,胃癌與乳腺癌的淋巴結(jié)標(biāo)記等。2009年,Ishizawa等首次報(bào)道了ICG分子熒光成像可以用于指導(dǎo)肝癌切除術(shù),此后,人們對于NIR熒光染料在肝臟腫瘤的診斷和術(shù)中導(dǎo)航的探索也逐步深入。MHI-148是近年來發(fā)現(xiàn)的一類新型七甲川花菁類NIRF染料,多項(xiàng)研究表明其具有良好的腫瘤組織特異性聚集能力。然而,關(guān)于該染料在肝癌的靶向成像性能方面的研究還尚不全面,因此,我們在本課題中將對MHI-148在HCC細(xì)胞中的成像能力、聚集原理、生物安全性等方面做進(jìn)一步... 

【文章來源】：河南大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ICG化學(xué)結(jié)構(gòu)圖

第一章緒論11中將藥物排出，因此，這些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的過度表達(dá)與許多不同腫瘤的不良患者結(jié)局密切相關(guān)[52,53]。4.1ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白概述ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，也叫腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ATP-bindingcassettetransporters），是在所有生物體（從原核到真核）中都極奇保守的一大類蛋白家族[54]，通過水解ATP釋放能量將細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)（包括細(xì)胞氨基酸、多糖、多肽、脂質(zhì)體、重金屬螯合物、生物堿和藥物等）排出細(xì)胞[55]。ABC超家族中一共有48個(gè)蛋白成員，根據(jù)序列的相似性，將它們分為ABCA、ABCB、ABCC、ABCD、ABCE、ABCF、ABCG七個(gè)家族。一般情況下，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白由結(jié)構(gòu)保守的核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域(NBD)和含有六個(gè)跨膜螺旋的跨膜結(jié)構(gòu)域(TMD)組成，這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域（NBD-TMD6）共同組成了一個(gè)半ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，而一個(gè)二聚體則形成了一個(gè)全ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[57]（圖[58]）。大多數(shù)ABC蛋白定位于生物膜上，包括細(xì)胞膜以及各種胞內(nèi)細(xì)胞器膜，比如線粒體、高爾基體、液泡等[59,60]，參與細(xì)胞內(nèi)各種內(nèi)源性物質(zhì)、藥物、異物和代謝物在細(xì)胞膜上的運(yùn)動(dòng)[61-63]。ABC得到科學(xué)界的廣泛關(guān)注是由于其在多藥耐藥（MDR）中發(fā)揮作用，其中研究最多的主要有p-糖蛋白（p-gp/abcb1）、多藥耐藥相關(guān)蛋白2（mrp2/abcc2）和乳腺癌耐藥蛋白（bcrp/abcg2）[64,65]。圖4.ABC蛋白示意圖（GerhardF.Eckeret.al.,2015）4.2ABCG2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究進(jìn)展4.2.1ABCG2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的介紹具有外排功能的蛋白質(zhì)ABCG2首次被發(fā)現(xiàn)是在人乳腺癌細(xì)胞MCF-7中，因而被命名為乳腺癌耐藥蛋白（Breastcancerresistantprotein,BCRP），它全長66

第二章近紅外染料MHI-148在HCC細(xì)胞中的成像性能的研究21行細(xì)胞成像，觀察不同濃度MHI-148對于HCC細(xì)胞著色后的共聚焦成像效果。結(jié)果顯示，MHI-148在HCC細(xì)胞中有良好的近紅外成像能力，在較低濃度15μmol/L時(shí)就可以很好的進(jìn)行顯像（圖1），這充分證明了MHI-148作為近紅外熒光探針的優(yōu)良特性，可以實(shí)現(xiàn)對HCC細(xì)胞的偵查報(bào)警。同時(shí)，我們在五種HCC細(xì)胞系（SNU-739、SNU-354、MHCC-97L、Hep-3B、HLF）和一種人正常肝細(xì)胞（L-02）中進(jìn)行了MHI-148著色，結(jié)果發(fā)現(xiàn)（圖2）MHI-148在各HCC細(xì)胞系中均能夠發(fā)出明亮的熒光，而在L-02中僅發(fā)出很微弱的熒光，說明MHI-148在HCC細(xì)胞中的聚集性能明顯優(yōu)于正常肝細(xì)胞，充分證明了MHI-148能夠選擇性聚集于HCC細(xì)胞系中。圖1.不同濃度MHI-148在HCC細(xì)胞中的聚集Figure1.MHI-148aggregatesinHCCcellsatdifferentconcentrations

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Quantification and pharmacokinetic study of tumor-targeting agent MHI148-clorgyline amide in mouse plasma using liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry[J]. Zhijun Wang,Bogdan Z.Olenyuk,Jean Chen Shih,Jeffrey Wang.  Journal of Pharmaceutical Analysis. 2018(03)



本文編號：3539328