[目 的]通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)探討A549和XWLC-05細(xì)胞放射后殘留細(xì)胞的放射敏感性及DNA損傷修復(fù)的變化與差異及相關(guān)生物學(xué)機(jī)制。[方 法]1.A549和XWLC-05細(xì)胞體外培養(yǎng),X線20Gy照射細(xì)胞,待殘存的細(xì)胞增殖恢復(fù)穩(wěn)定生長(zhǎng),即A549照射后殘存細(xì)胞（A549RT）和XWLC-05照射后殘存細(xì)胞（XW-05RT）。不同劑量X線照射A549、XWLC-05和A549RT、XW-05RT細(xì)胞,平板克隆形成實(shí)驗(yàn)比較各組細(xì)胞的放射敏感性差異和變化。2.單次 20Gy X 線照射 A549、XWLC-05 和 A549RT、XW-05RT 細(xì)胞,照射后0.5h、1h、6h、24h分別采用細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)γ-H2AX反映細(xì)胞的DNA損傷情況,蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞DNA損傷修復(fù)相關(guān)蛋白和PI3K/Akt通道相關(guān)蛋白表達(dá)的變化和差異。3.將A549和XWLC-05細(xì)胞接種至5周齡雄性BALB/C-nu裸鼠右側(cè)背部,構(gòu)建裸鼠皮下移植瘤模型。待裸鼠皮下移植瘤體積約為0.5cm3時(shí),行6MVX線20Gy單次局部照射移植瘤,照射后不同時(shí)間點(diǎn)流式檢測(cè)A549和XWLC-05皮下移植瘤組織的... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．單擊多靶模型擬合細(xì)胞存活曲線??（Ａ５４９：?Ａ５４９細(xì)胞、Ａ５４９ＲＴ：?Ａ５４９照射后殘存細(xì)胞、ＸＷ－０５：?ＸＷ－０５細(xì)胞、ＸＷ－０５ＲＴ：??

Ａ５４９??Ａ５４９ＲＴ??ｇ?ＸＷ－０５??■Ｓ?－＊－?ＸＷ－０５ＲＴ??ｒ??Ｉ?０．０１?■??ＣＯ??〇〇〇１〇?２?ｉ?６?１￣??Ｄｏｓｅ?（Ｇｙ）??圖１．單擊多靶模型擬合細(xì)胞存活曲線??（Ａ５４９：?Ａ５４９細(xì)胞、Ａ５４９ＲＴ：?Ａ５４９照射后殘存細(xì)胞、ＸＷ－０５：?ＸＷ－０５細(xì)胞、ＸＷ－０５ＲＴ：??ＸＷ?－?０５細(xì)胞照射后殘存細(xì)胞）??Ａ５４９??－ｍ－?Ａ５４９ＲＴ??ＸＷ－０５??．１?ＸＷ－０５ＲＴ??ｒ??ｇ?０．０１?■?▲??〇〇〇１〇?２?ｉ?６?１￣??Ｄｏｓｅ?（Ｇｙ）??圖２．線性二次函數(shù)模型擬合細(xì)胞存活曲線??（Ａ５４９：?Ａ５４９細(xì)胞、Ａ５４９ＲＴ：?Ａ５４９照射后殘存細(xì)胞、ＸＷ－０５：?ＸＷ－０５細(xì)胞、ＸＷ－０５ＲＴ：??ＸＷ－０５細(xì)胞照射后殘存細(xì)胞）??表１：?jiǎn)螕舳喟心Ｐ偷姆派渖飳W(xué)參數(shù)??細(xì)胞株?Ｄｏ?Ｄｑ?Ｎ??Ａ５４９?３．９８４０?３．４４０４?０．４２１７??Ａ５４９ＲＴ?２．８４８２?１．７４１６?０．５５０２??ＸＷ－０５?１．９９８４?０．２０５０?０．９０２５??ＸＷ－０５ＲＴ?１．６８４６?０．３５４２?１．２３４０??２４??

〇．５ｈ?６ｈ?２４ｈ??－■■■■??圖３．四種細(xì)胞照射后不同時(shí)間點(diǎn)ｙ?－Ｈ２ＡＸ灶的表達(dá)情況（１０Ｘ４０倍鏡下）??Ａ?ｍ?Ａ５４９?Ｂ??５〇１?■?ＡＭ９ＲＴ?５〇ｎ??？?ｐ?＜０．０５?■?ＸＷ－０５??＾?＿＊?＊＊?ｍｍ?ＸＷ－０５ＲＴ??４０－?＿?￣｜?＂Ｈ?４０－?Ｉ?＊?｜）?＜０．０５??Ｉ?了?＊＊ｐ＜０．０１??ｉｆ?＿??０．５?１?６?２４?０．５?１?６?２４??ｂ）?Ｔｉｍｅ（?ｈ）??圖４．細(xì)胞照射后不同時(shí)間點(diǎn)平均熒光強(qiáng)度情況??（Ａ５４９：?Ａ５４９細(xì)胞、Ａ５４９ＲＴ：?Ａ５４９照射后殘存細(xì)胞、ＸＷ－０５：?ＸＷ－０５細(xì)胞、ＸＷ－０５ＲＴ：??ＸＷ－０５細(xì)胞照射后殘存細(xì)胞）??３．Ａ５４９、Ａ５４９照射后殘存細(xì)胞放射后ＤＮＡ損傷修復(fù)蛋白和Ｐ１３Ｋ／Ａｋｔ通道蛋白的??變化??２６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南宣威、富源地區(qū)非吸煙女性肺癌生存分析[J]. 李繼華,何俊,張?jiān)粕?黃云超,劉石安,李云,許軍,何興舟,Qing LAN.  中國(guó)肺癌雜志. 2019(08)
[2]EGFR tyrosine kinase inhibitor HS-10182 increases radiation sensitivity in non-small cell lung cancers with EGFR T790M mutation[J]. Yang Chen,Youyou Wang,Lujun Zhao,Ping Wang,Jifeng Sun,Rudi Bao,Chenghai Li,Ningbo Liu.  Cancer Biology & Medicine. 2018(01)

碩士論文
[1]兩種肺腺癌移植瘤放射后殘留細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡及干細(xì)胞變化的比較性研究[D]. 代佩靈.昆明醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]兩種肺腺癌細(xì)胞體外放射后殘留細(xì)胞增殖遷移及干細(xì)胞變化的比較性研究[D]. 杜小雙.昆明醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]PI3K/AKT通路及DNA損傷修復(fù)對(duì)XWLC-05與A549肺腺癌細(xì)胞放射敏感性影響的研究[D]. 李田芊.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
[4]宣威肺腺癌XWLC-05細(xì)胞和A549細(xì)胞放射敏感性與細(xì)胞周期分布及凋亡的相關(guān)性研究[D]. 于書慧.昆明醫(yī)科大學(xué) 2012
[5]肺腺癌細(xì)胞系XWLC-05的建立及其生物學(xué)特性研究[D]. 閆風(fēng)彩.昆明醫(yī)學(xué)院 2007



本文編號(hào)：3533492