結(jié)直腸癌（Colorectal Cancer,CRC）是一種惡性消化道腫瘤。隨著病情的進(jìn)展癌腫會(huì)逐漸增大并引起患者的排便習(xí)慣改變,導(dǎo)致其腹瀉或便秘,并伴有局部腹痛或貧血等癥狀,由此而引發(fā)患者體重減輕、免疫功能下降。隨著結(jié)直腸癌在我國(guó)發(fā)病率以及死亡率的逐年攀升,且其對(duì)人民的健康的威脅亦逐步加重。目前在臨床上所采用的主要的治療結(jié)直腸癌的方案對(duì)患者均有不同程度的副作用,而通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物來(lái)改善治療結(jié)果或確�；颊咴诳拱┲委熤蝎@得了更好的生活質(zhì)量,越來(lái)越被認(rèn)為是一種有效可行地方法。本研究從西北地區(qū)傳統(tǒng)發(fā)酵食品漿水中分離益生菌及有效活性成分,研究其抗結(jié)直腸癌的機(jī)制。研究以漿水中分離的微生物分別對(duì)HCT116、SW480、HT29等結(jié)腸癌細(xì)胞其進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn),通過(guò)MTT法對(duì)其抗結(jié)直腸癌的作用進(jìn)行初步判定。測(cè)定漿水活性成分對(duì)癌細(xì)胞的周期和凋亡的影響,并通過(guò)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)對(duì)其抗結(jié)直腸癌的作用進(jìn)行初探,通過(guò)qRT-PCR法和Western Blot測(cè)定PI3K信號(hào)通路中重要信號(hào)分子在mRNA水平及蛋白水平的表達(dá)情況,初步探究漿水無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液SCS-2抗結(jié)直腸癌的作用機(jī)制。分析MTT實(shí)驗(yàn)中漿水活... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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漿水中分離的4種微生物的顯微圖片

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文漿水無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液SCS-2的制備及其抗結(jié)直腸癌研究192.3.2凍干保護(hù)劑對(duì)漿水微生物存活率的影響圖2-2三種凍干保護(hù)劑對(duì)漿水微生物存活率的影響Fig.2-2EffectofthreecryoprotectantsonthesurvivalrateofmicroorganismsinSerofluiddish為了確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)中樣品的穩(wěn)定性并使其中微生物保持較高活性，需要在對(duì)其凍干前加入適當(dāng)保護(hù)劑。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在無(wú)保護(hù)劑的條件下，菌種存活率為7.32%，而在加入不同濃度保護(hù)劑后，其存活率在一定范圍內(nèi)隨著所添加保護(hù)劑濃度的提高而上升，但在超出一定限度后會(huì)出現(xiàn)小幅下降，此結(jié)果表明保護(hù)劑存在最佳濃度。谷氨酸鈉和麥芽糊精的濃度為15g/100mL、海藻糖在其濃度達(dá)到13g/100mL，其微生物存活率達(dá)到最大。此時(shí)谷氨酸鈉組的微生物存活率為63.76%，麥芽糊精組和海藻糖組的存活率分別為59.58%、52.26%。當(dāng)超過(guò)上述范圍時(shí)，其存活率則出現(xiàn)一定程度降低。但在單一保護(hù)劑作用時(shí)，其最高存活率僅為63.76%，難以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)高效實(shí)施。因而選擇多種保護(hù)劑進(jìn)行組合實(shí)驗(yàn)，篩選最優(yōu)保護(hù)劑配比。漿水微生物冷凍干燥保護(hù)劑復(fù)配比例優(yōu)化改進(jìn)中運(yùn)用響應(yīng)面中心組合設(shè)計(jì)方案。利用Design-Expert10.0.4對(duì)響應(yīng)面二次模型實(shí)施方差分析，其實(shí)際值二

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文漿水無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液SCS-2的制備及其抗結(jié)直腸癌研究22著交互關(guān)系。在單因素實(shí)驗(yàn)中，在一定范圍內(nèi)單一保護(hù)劑濃度與微生物冷凍干燥后得存活率存在正相關(guān)，但超出范圍后，微生物存活率出現(xiàn)下降，即表明在該研究中應(yīng)當(dāng)存在最佳保護(hù)劑濃度。圖2-3不同因素作用下的三維響應(yīng)面曲線Fig.2-3Three-dimensionalresponsesurfacecurveunderdifferentfactors通過(guò)對(duì)研究結(jié)果的分析可知，在谷氨酸鈉16.291g/100mL，海藻糖14.476g/100mL，麥芽糊精15.129g/100mL時(shí)，其凍干存活率最高。預(yù)測(cè)值為82.0356%。該實(shí)驗(yàn)中每組均獨(dú)立重復(fù)三次，漿水微生物凍干存活率達(dá)81.06%±2.27%，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果與方程預(yù)測(cè)值相近，即模型建立合理。2.3.3凍干粉在4個(gè)貯藏溫度下的微生物存活率圖2-4凍干粉在4個(gè)貯藏溫度下的微生物存活率Fig.2-4Microbialsurvivalrateoffreeze-driedpowderat4storagetemperatures

【參考文獻(xiàn)】：
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