發(fā)布時間：2021-11-19 11:57

　　結(jié)直腸癌（Colorectal Cancer,CRC）是一種惡性消化道腫瘤。隨著病情的進展癌腫會逐漸增大并引起患者的排便習慣改變,導致其腹瀉或便秘,并伴有局部腹痛或貧血等癥狀,由此而引發(fā)患者體重減輕、免疫功能下降。隨著結(jié)直腸癌在我國發(fā)病率以及死亡率的逐年攀升,且其對人民的健康的威脅亦逐步加重。目前在臨床上所采用的主要的治療結(jié)直腸癌的方案對患者均有不同程度的副作用,而通過調(diào)節(jié)腸道微生物來改善治療結(jié)果或確�；颊咴诳拱┲委熤蝎@得了更好的生活質(zhì)量,越來越被認為是一種有效可行地方法。本研究從西北地區(qū)傳統(tǒng)發(fā)酵食品漿水中分離益生菌及有效活性成分,研究其抗結(jié)直腸癌的機制。研究以漿水中分離的微生物分別對HCT116、SW480、HT29等結(jié)腸癌細胞其進行體外實驗,通過MTT法對其抗結(jié)直腸癌的作用進行初步判定。測定漿水活性成分對癌細胞的周期和凋亡的影響,并通過Transwell遷移實驗對其抗結(jié)直腸癌的作用進行初探,通過qRT-PCR法和Western Blot測定PI3K信號通路中重要信號分子在mRNA水平及蛋白水平的表達情況,初步探究漿水無細胞培養(yǎng)液SCS-2抗結(jié)直腸癌的作用機制。分析MTT實驗中漿水活... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

漿水中分離的4種微生物的顯微圖片

蘭州大學碩士學位論文漿水無細胞培養(yǎng)液SCS-2的制備及其抗結(jié)直腸癌研究192.3.2凍干保護劑對漿水微生物存活率的影響圖2-2三種凍干保護劑對漿水微生物存活率的影響Fig.2-2EffectofthreecryoprotectantsonthesurvivalrateofmicroorganismsinSerofluiddish為了確保后續(xù)實驗中樣品的穩(wěn)定性并使其中微生物保持較高活性，需要在對其凍干前加入適當保護劑。根據(jù)實驗結(jié)果，在無保護劑的條件下，菌種存活率為7.32%，而在加入不同濃度保護劑后，其存活率在一定范圍內(nèi)隨著所添加保護劑濃度的提高而上升，但在超出一定限度后會出現(xiàn)小幅下降，此結(jié)果表明保護劑存在最佳濃度。谷氨酸鈉和麥芽糊精的濃度為15g/100mL、海藻糖在其濃度達到13g/100mL，其微生物存活率達到最大。此時谷氨酸鈉組的微生物存活率為63.76%，麥芽糊精組和海藻糖組的存活率分別為59.58%、52.26%。當超過上述范圍時，其存活率則出現(xiàn)一定程度降低。但在單一保護劑作用時，其最高存活率僅為63.76%，難以確保后續(xù)實驗高效實施。因而選擇多種保護劑進行組合實驗，篩選最優(yōu)保護劑配比。漿水微生物冷凍干燥保護劑復(fù)配比例優(yōu)化改進中運用響應(yīng)面中心組合設(shè)計方案。利用Design-Expert10.0.4對響應(yīng)面二次模型實施方差分析，其實際值二

蘭州大學碩士學位論文漿水無細胞培養(yǎng)液SCS-2的制備及其抗結(jié)直腸癌研究22著交互關(guān)系。在單因素實驗中，在一定范圍內(nèi)單一保護劑濃度與微生物冷凍干燥后得存活率存在正相關(guān)，但超出范圍后，微生物存活率出現(xiàn)下降，即表明在該研究中應(yīng)當存在最佳保護劑濃度。圖2-3不同因素作用下的三維響應(yīng)面曲線Fig.2-3Three-dimensionalresponsesurfacecurveunderdifferentfactors通過對研究結(jié)果的分析可知，在谷氨酸鈉16.291g/100mL，海藻糖14.476g/100mL，麥芽糊精15.129g/100mL時，其凍干存活率最高。預(yù)測值為82.0356%。該實驗中每組均獨立重復(fù)三次，漿水微生物凍干存活率達81.06%±2.27%，其實驗結(jié)果與方程預(yù)測值相近，即模型建立合理。2.3.3凍干粉在4個貯藏溫度下的微生物存活率圖2-4凍干粉在4個貯藏溫度下的微生物存活率Fig.2-4Microbialsurvivalrateoffreeze-driedpowderat4storagetemperatures

【參考文獻】：
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