目的:炎癥浸潤在前列腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起重要作用,利用Tramp小鼠模型及前列腺癌患者腫瘤標(biāo)本,通過體內(nèi)及體外實驗,探究在去勢治療的同時應(yīng)用二甲雙胍能否抑制COX-2介導(dǎo)的炎癥細(xì)胞浸潤,同時,能否延遲前列腺癌去勢抵抗的發(fā)生,從而為研究二甲雙胍聯(lián)合去勢治療前列腺癌提供理論基礎(chǔ)及研究依據(jù)。方法:（1）運(yùn)用MTT實驗檢測不同濃度的二甲雙胍對前列腺癌PC-3和DU145細(xì)胞增殖活性的影響;運(yùn)用MTT實驗檢測并比較對照組和二甲雙胍（20mM）處理組PC-3和DU145細(xì)胞在不同時間點的增殖活性;流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡變化。（2）運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測CD68,CD163,CD204陽性巨噬細(xì)胞在前列腺癌組織中的浸潤情況及密度,分析二甲雙胍對前列腺癌發(fā)生過程中各個時間點炎癥細(xì)胞浸潤的影響。（3）運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測CD68,CD163,CD204陽性巨噬細(xì)胞在對照組、去勢組、去勢+二甲雙胍組前列腺癌組織中的浸潤情況及密度,分析二甲雙胍對去勢誘導(dǎo)的炎癥細(xì)胞浸潤的影響。（4）運(yùn)用Western Blot技術(shù)檢測用不同濃度的二甲雙胍處理前列腺癌PC-3和DU145細(xì)胞后COX-2蛋白表達(dá)的變化,... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

MTT法檢測不同濃度的二甲雙胍（0，1，5，10，20mM）對PC-3和DU145細(xì)胞增殖活性的影響

圖 3: 流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同濃度的二甲雙胍(0mM、1mM、5mM、10mM、20mM) 對 45 細(xì)胞周期和凋亡的影響。經(jīng)上述細(xì)胞體外實驗證實，二甲雙胍能夠抑制 PC-3、DU145 細(xì)胞的增殖，同PC-3、DU145 細(xì)胞的凋亡。 討 論二甲雙胍是治療 2 型糖尿病的經(jīng)典藥物，已有多項研究表明該藥物具有潛在用，其中也包括前列腺癌。研究表明，二甲雙胍能夠通過多種信號MPK/mTOR、Wnt/β-catenin、TGF-β/IL-6、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、自噬通路等）發(fā)揮的作用[18-22]。在此基礎(chǔ)上，我們對二甲雙胍抗前列腺癌作用進(jìn)行了初步的研究。在細(xì)胞增殖

2.1.3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析 GraphPad Prism 5.0進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)進(jìn)行兩獨(dú)立樣本t檢驗分析、作圖<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。.2 結(jié) 果2.2.1 二甲雙胍能夠抑制CD68、CD163、CD204陽性巨噬細(xì)胞在各個時間點前列組織中的浸潤。我們分別對對照組和二甲雙胍組的TRAMP小鼠前列腺組織的巨噬細(xì)胞標(biāo)記CD68，CD163和CD204）進(jìn)行免疫組化染色，如圖 4 所示第12周、第25周、第37個不同時間點對照組、二甲雙胍組 CD68、CD163、CD204 的染色比較，二甲雙胍的染色強(qiáng)度較弱、陽性細(xì)胞數(shù)較少，并且在各個時間點均顯著降低。結(jié)果表明二甲可以抑制前列腺癌發(fā)生過程中各個時間點炎癥細(xì)胞的浸潤。


本文編號：3502760