胰腺癌是惡性腫瘤中死亡率最高的一種癌癥,發(fā)病率呈逐年升高的趨勢。因其早期診斷困難,大部分患者確診時已發(fā)展到癌癥晚期,且現(xiàn)有治療手段效果欠佳。尋找胰腺癌早期診斷的生物標(biāo)志物以及針對胰腺癌開發(fā)靶向藥物具有十分重要的意義。腫瘤蛋白D52（tumor protein D52,TPD52）基因家族是近年來被發(fā)現(xiàn)的一類原癌基因,與多種實(shí)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。然而,目前關(guān)于TPD52在腫瘤發(fā)生發(fā)展中更加深入的研究數(shù)量相對較少,在胰腺癌中可能的作用機(jī)制也不明確。本研究首先在組織水平研究胰腺癌組織中TPD52表達(dá)與患者臨床生物學(xué)行為的關(guān)系;然后在細(xì)胞水平研究TPD52對胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為（如細(xì)胞增殖、遷移和侵襲）的影響及其機(jī)制;最后通過建立裸鼠皮下移植瘤模型,觀察TPD52對裸鼠皮下移植瘤生長的影響,以期為胰腺癌病情的綜合評估和分子靶向治療提供依據(jù)。第一部分胰腺癌組織中TPD52表達(dá)與患者臨床生物學(xué)行為關(guān)系的研究目的:本研究通過檢測TPD52在胰腺癌組織中的表達(dá)情況,分析TPD52與患者臨床生物學(xué)行為的相關(guān)性,探討TPD52在胰腺癌診治中的臨床價值。方法:1. 收集自2014年1月至2018年10月河... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

免疫組織化學(xué)檢測正常胰腺組織和胰腺癌組織中TPD52的表達(dá)(400×)

研究論文283TPD52表達(dá)水平與胰腺癌患者預(yù)后的關(guān)系3.1TPD52表達(dá)水平與患者OS的關(guān)系（見圖2）本研究中的115例患者，均成功完成隨訪。術(shù)后隨訪時間為8-72個月，中位隨訪時間為20個月，死亡72例。中位生存時間（medianoverallsurvivaltime,mOS）為25個月，TPD52陽性表達(dá)組患者mOS為21個月，TPD52陰性表達(dá)組患者mOS為31個月，兩組之間生存時間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（2=9.986，P＜0.05），TPD52陽性表達(dá)組患者較TPD52陰性表達(dá)組患者生存時間明顯縮短。圖2Kaplan-Meier總生存曲線顯示患者生存率隨時間的變化Fig.2Kaplan-Meieroverallsurvivalcurvesforall115patientswithpancreaticcancer3.2影響胰腺癌患者OS的COX回歸模型多因素分析（見表2）將患者性別、年齡、組織分化程度、腫瘤神經(jīng)浸潤情況、門靜脈侵犯、腫瘤部位、腫瘤原發(fā)病灶情況（T分期）、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況（N分期）、肝轉(zhuǎn)移、病理TNM分期、TPD52表達(dá)等指標(biāo)納入COX多因素分析，結(jié)果顯示患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤原發(fā)病灶情況（T分期）、病理TNM分期、腫瘤神經(jīng)浸潤情況、門靜脈侵犯與患者OS沒有顯著關(guān)聯(lián)性（P>0.05）。區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況（N分期）、肝轉(zhuǎn)移和TPD52表達(dá)水

研究論文51圖1Westernblot檢測TPD52蛋白表達(dá)以篩選細(xì)胞，PANC-1、AsPC-1、MIA-PaCa-2、SW1990、CFPAC-1五種細(xì)胞中，PANC-1和AsPC-1細(xì)胞TPD52蛋白表達(dá)相對較高(*P＜0.05,**P<0.01,***P<0.001)Fig.1WesternblotshowthattheexpressionlevelofTPD52inPANC-1andAsPC-1issignificantlyhigherthantheothers.(*P＜0.05,**P<0.01,***P<0.001)2.TPD52-shRNA轉(zhuǎn)染對AsPC-1及PANC-1細(xì)胞TPD52mRNA水平的影響熒光定量RT-PCR檢測結(jié)果顯示，PANC-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染組shRNA-1、shRNA-2、shRNA-3較對照組（PANC-1-NC）及親本組TPD52mRNA水平明顯降低（****P<0.0001），其中shRNA-1組TPD52mRNA水平低于shRNA-2組及shRNA-3組。此結(jié)果提示shRNA-1對PANC-1細(xì)胞TPD52抑制效果最好，因此后續(xù)實(shí)驗選用shRNA-1進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。見圖2。TPD52-shRNA-1轉(zhuǎn)染AsPC-1細(xì)胞后，熒光定量RT-PCR檢測結(jié)果顯示AsPC-1細(xì)胞shRNA轉(zhuǎn)染組較對照組及親本組TPD52mRNA水平明顯降低（***P<0.001）。見圖3。


本文編號：3490207