選取過表達(dá)利鈉肽受體A的細(xì)胞系HEK293 GCAC3、人腎癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN、非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系Calu-1、A549、H1792、H1299、H157以及H460共8種不同的細(xì)胞系作為試驗(yàn)對象,使用化療藥物鹽酸多柔比星誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生后再用不同濃度的BNP作用于細(xì)胞。利用SRB法確定各細(xì)胞系的增殖情況,通過ELISA法研究各細(xì)胞系對BNP的敏感性,Western blot法檢測各細(xì)胞中凋亡關(guān)鍵蛋白的表達(dá)情況及變化,從而初步探究BNP對由鹽酸多柔比星引起的的細(xì)胞凋亡的作用效果及其可能的機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,細(xì)胞系HEK293 GCAC3、細(xì)胞系A(chǔ)CHN、細(xì)胞系Calu-1、細(xì)胞系A(chǔ)549、細(xì)胞系H1792、細(xì)胞系H1299、細(xì)胞系H157以及細(xì)胞系H460在被鹽酸多柔比星（濃度為2.56 ng/mL至100 ng/mL間）處理72小時后,均被誘導(dǎo)出現(xiàn)細(xì)胞凋亡。40 ng/mL或320 ng/mL的BNP對由16 ng/mL鹽酸多柔比星所引起的細(xì)胞系HEK293 GCAC3的細(xì)胞凋亡具有顯著的抑制作用（p<0.05）,但在其他細(xì)胞系中BNP無此作用出現(xiàn)。與其它細(xì)胞相比,細(xì)胞系HEK2... 

【文章來源】：河北科技大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞凋亡的過程

5結(jié)構(gòu)域及Fas死亡相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白結(jié)合，活化caspase凋亡相關(guān)蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[20]。細(xì)胞凋亡的部分具體途徑見圖1-2。圖1-2細(xì)胞凋亡途徑1.2鹽酸多柔比星的理化性質(zhì)及作用多柔比星(doxorubicin，DOX)又稱為阿霉素(adriamycin)，目前在臨床上廣泛應(yīng)用于人類一些癌癥的治療，作為化療藥物使用。多柔比星作為高效化療藥物，屬于廣譜類抗瘤藥物，已經(jīng)收錄于國家藥典。多柔比星現(xiàn)已應(yīng)用于急性白血病(淋巴細(xì)胞性和粒細(xì)胞性)、惡性淋巴瘤、乳腺癌、支氣管肺癌(未分化小細(xì)胞性和非小細(xì)胞性)、卵巢癌、軟組織肉瘤、成骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、尤文肉瘤、母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、膀胱癌、甲狀腺癌、前列腺癌、頭頸部鱗癌、睪丸癌、胃癌、肝癌等多種癌癥的治療。多柔比星并非天然存在的物質(zhì)，而是經(jīng)過化學(xué)半合成而得到的藥物，屬于蒽環(huán)霉素類抗腫瘤抗生素。1.2.1鹽酸多柔比星的理化性質(zhì)上個世紀(jì)50年代，意大利Farmitalia研究實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行土基微生物抗腫瘤活性的化合物篩選工作時，在蒙特城堡周圍的土樣中發(fā)現(xiàn)了鏈菌素，這種抗生素對小鼠體內(nèi)的腫瘤具有良好的抑制作用，與此同時，法國科學(xué)家也發(fā)現(xiàn)了該種抗生素，兩個

6國家的學(xué)者將其命名為柔紅霉素[21]。到上個世紀(jì)六十年代，經(jīng)過研究，柔紅霉素在臨床試驗(yàn)中被證實(shí)了其具有產(chǎn)生抗淋巴癌的作用。在接下來對柔紅霉素的不斷探索和研究中，研究者Farmitalia發(fā)現(xiàn)了藥物產(chǎn)生細(xì)微的結(jié)構(gòu)變化便可以影響到其生物學(xué)活性，鏈菌素屬的菌株產(chǎn)生N-亞硝基-N甲基氨基酸甲酯突變，從而產(chǎn)生了一種不同的紅色抗生素[22]。這種新的紅色化合物抗生素被命名為阿霉素，之后，阿霉素又被更名為多柔比星。多柔比星的分子質(zhì)量為543.52，純品多柔比星應(yīng)為桔紅色的凍干粉末制劑，其純品粉末較輕，可溶于水且易吸濕，但親脂性較差，熔點(diǎn)為216℃。多柔比星的分子式為C27H29NO11，具體分子結(jié)構(gòu)見圖1-3。圖1-3多柔比星的分子結(jié)構(gòu)式因多柔比星原藥在外部環(huán)境下穩(wěn)定性較差，為了提高藥品的穩(wěn)定性從而保證藥品的正常使用，市面上現(xiàn)有的多柔比星藥物大多數(shù)均以其鹽酸鹽形式的鹽酸多柔比星(Doxorubicinhydrochloride，DX)形式所存在。鹽酸多柔比星的分子質(zhì)量為579.99，鹽酸多柔比星的分子式C27H29NO11·HCl，其具體分子結(jié)構(gòu)與多柔比星極為相似，具體見圖1-4。圖1-4鹽酸多柔比星的分子結(jié)構(gòu)式截止至1991年，類似于多柔比星的蒽環(huán)類抗生素已經(jīng)有553種在美國國家癌癥研究所中進(jìn)行評估篩選，鹽酸多柔比星與柔紅霉素二者可以視為蒽環(huán)類抗生素的原

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