前列腺癌（Prostate Cancer,PCa）是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,也是全球第二大最常見(jiàn)的男性癌癥。幾乎所有晚期PCa患者在接受內(nèi)分泌治療后都會(huì)發(fā)展成去勢(shì)抵抗性前列腺癌。盡管雄激素受體是治療轉(zhuǎn)移性去勢(shì)抵抗性前列腺癌（metastatic castrate-resistant prostate cancer,mCRPC）的有效方法,但2018年美國(guó)依然有29430人死于PCa。近年來(lái)對(duì)14-3-3蛋白家族的研究發(fā)現(xiàn),該家族成員14-3-3ε在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用,可能成為前列腺癌診斷治療的分子靶點(diǎn)。同樣,大量研究也證實(shí)miRNAs在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中同樣發(fā)揮了重要作用,在前列腺癌的分子診斷和靶向治療方面同樣具有廣闊的應(yīng)用前景,然而miRNAs調(diào)控14-3-3ε在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中的具體分子機(jī)制尚不清楚。本研究采用UALCAN-TCGA在線(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)結(jié)合qRT-PCR、CCK-8、細(xì)胞劃痕、Transwell、雙熒光素酶系統(tǒng)、流式細(xì)胞術(shù)等試驗(yàn)手段,從細(xì)胞水平和分子水平,闡明miRNAs調(diào)控14-3-3影響前列腺癌細(xì)胞增殖凋亡的分子機(jī)制。相關(guān)研究可為前列腺癌的分子診斷... 

【文章來(lái)源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

miR-31-5p與14-3-3ε對(duì)22Rv1細(xì)胞周期的影響

此外,為了研究miR-31-5p和14-3-3ε對(duì)細(xì)胞凋亡的影響,我們研究了轉(zhuǎn)染miR-31-5p、NC、pCI-14-3-3ε、pCI-neo和miR-31-5p+14-3-3ε對(duì)22Rv1細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染miR-31-5p后22Rv1細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞壞死率與其他組相比有極顯著性差異(P<0.01);然而,轉(zhuǎn)染pCI-14-3-3ε組則出現(xiàn)相反的結(jié)果(圖3.11A,B)。有趣的是,當(dāng)miR-31-5p和pCI-14-3-3ε共轉(zhuǎn)染22Rv1細(xì)胞時(shí),miR-31-5p的促凋亡作用在一定程度上被14-3-3ε部分逆轉(zhuǎn)(圖3.11 A,B)。以上試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí),miR-31-5p通過(guò)抑制14-3-3ε的表達(dá)影響PCa細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移,促進(jìn)PCa細(xì)胞凋亡。5.討論

為研究PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路是否參與了miR-31-5p調(diào)控14-3-3ε對(duì)22Rv1細(xì)胞增殖的影響,我們通過(guò)單獨(dú)轉(zhuǎn)染miR-31-5p或14-3-3ε,或者共轉(zhuǎn)染miR-31-5p+14-3-3ε,來(lái)觀(guān)察細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR和m TOR的表達(dá)情況,分析p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR的比值大小,判斷其對(duì)抗PCa細(xì)胞增殖影響。結(jié)果顯示:p-PI3K/PI3K與p-AKT/AKT比值表現(xiàn)出相同的趨勢(shì),即轉(zhuǎn)染miR-31-5p組與轉(zhuǎn)染NC組相比,p-PI3K/PI3K與p-AKT/AKT比值極顯著下調(diào)(P<0.01);轉(zhuǎn)染pCI-14-3-3ε組與轉(zhuǎn)染pCI-neo組相比,p-PI3K/PI3K與p-AKT/AKT比值極顯著上調(diào)(P<0.01);當(dāng)共轉(zhuǎn)染miR-31-5p+14-3-3ε后,miR-31-5p和14-3-3ε均彼此抑制了兩者分別對(duì)p-PI3K/PI3K與p-AKT/AKT的調(diào)控(圖4.1 A,B,C),說(shuō)明14-3-3ε的補(bǔ)償,部分逆轉(zhuǎn)了miR-31-5p對(duì)PCa細(xì)胞增殖蛋白的調(diào)控。然而,不同的是在轉(zhuǎn)染miR-31-5p組與轉(zhuǎn)染NC組中,p-mTOR/mTOR與p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT具有相同的趨勢(shì),但在轉(zhuǎn)染pCI-14-3-3ε、pCI-neo和miR-31-5p+14-3-3ε組中則出現(xiàn)了相反的結(jié)果,即轉(zhuǎn)染pCI-14-3-3ε與轉(zhuǎn)染pCI-neo相比,并未引起p-mTOR/mTOR比值的上調(diào),反而轉(zhuǎn)染pCI-14-3-3ε后,mTOR/mTOR比值有所下降;同樣,在轉(zhuǎn)染miR-31-5p+14-3-3ε組中,14-3-3ε的補(bǔ)償,也并未引起m TOR/mTOR比值的部分逆轉(zhuǎn)(圖4.1 A,D)。以上結(jié)果說(shuō)明,p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT幾個(gè)蛋白可能直接參與了miR-31-5p調(diào)控14-3-3ε對(duì)22Rv1細(xì)胞增殖的抑制,而mTOR可能并未參與其中。4.2 miR-31-5p調(diào)控14-3-3ε對(duì) BCL-2 信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]14－3－3σ基因在調(diào)控內(nèi)毒素/脂多糖誘導(dǎo)的人肺上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用[J]. 甘春霞,劉名倬,廖新成,付忠華,曾小平,王紅梅,郭光華.  中華燒傷雜志. 2020(04)
[2]前列腺癌相關(guān)危險(xiǎn)因素的研究進(jìn)展[J]. 孫殿欽,雷林,蔡穎,李賀,曹毛毛,何思怡,于欣陽(yáng),彭績(jī),陳萬(wàn)青.  中國(guó)腫瘤. 2020(04)
[3]14-3-3η表達(dá)水平對(duì)依那西普治療的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者臨床應(yīng)答的預(yù)測(cè)價(jià)值[J]. 王希佳,程佳芬.  藥學(xué)與臨床研究. 2019(06)
[4]前列腺癌的致病因素、腫瘤標(biāo)志物及前列腺穿刺活檢的研究進(jìn)展[J]. 宋敬福,陳國(guó)俊.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2019(92)
[5]microRNAs與腫瘤及腫瘤干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 徐小濤,吉婷婷.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2018(09)
[6]前列腺癌患者血清miRNA-711水平變化及意義[J]. 張仁忠,朱雯銀,劉吉文,姜睿.  山東醫(yī)藥. 2018(22)
[7]PI3K/AKT信號(hào)通路阻斷藥聯(lián)合小檗堿對(duì)前列腺癌DU145細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用[J]. 凡治國(guó),李志平,任超.  癌癥進(jìn)展. 2018(05)
[8]MiR-26a靶向調(diào)節(jié)PTEN對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的促進(jìn)效應(yīng)[J]. 寧椿游,李貴林,楊羽晨,馬瑤,李明洲,劉海峰.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2017(08)
[9]14-3-3蛋白在人類(lèi)疾病中的研究進(jìn)展[J]. 唐裕福,張怡冰,馮曉東,林紳暉,喬娜,孫忠怡,周文平.  世界華人消化雜志. 2017(06)
[10]miR-21 targets and inhibits tumor suppressor gene PTEN to promote prostate cancer cell proliferation and invasion: An experimental study[J]. Yu Yang,Jia-Xiang Guo,Zhi-Qiang Shao.  Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2017(01)

博士論文
[1]MicroRNA-19a通過(guò)激活NF-κB信號(hào)通路介導(dǎo)胃癌細(xì)胞增殖[D]. 楊帆.山東大學(xué) 2019
[2]14-3-3蛋白調(diào)控Cav2.2通道膜轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制[D]. 劉豐.上海交通大學(xué) 2014
[3]14-3-3ε與RKIP相互作用對(duì)胃癌發(fā)生發(fā)展的影響及其機(jī)制研究[D]. 嚴(yán)璐.中南大學(xué) 2013

碩士論文
[1]14-3-3ε和αN-catenin組織特異性表達(dá)及二者之間相互作用的研究[D]. 裴世靜.河北醫(yī)科大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3468123