研究背景及目的光動(dòng)力療法（Photodynamic Therapy, PDT）主要利用腫瘤細(xì)胞及正常細(xì)胞對(duì)光敏劑有不同的親和特性,腫瘤細(xì)胞攝取和存留光敏劑較多,經(jīng)特定波長(zhǎng)的光照射,在生物組織中氧的參與下發(fā)生光化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生單態(tài)氧和自由基,破壞組織和細(xì)胞中的多種生物大分子,最終引起腫瘤細(xì)胞死亡。光動(dòng)力療法以其有效、安全、副作用小、可協(xié)同性、相對(duì)成本低等優(yōu)點(diǎn)脫穎而出,己被加拿大、美國(guó)、法國(guó)、荷蘭等國(guó)家批準(zhǔn)用于一定范圍內(nèi)的抗腫瘤和非腫瘤疾病的臨床治療。光動(dòng)力反應(yīng)需要具備的兩個(gè)基本的要素：光敏劑、光。理想的光敏劑應(yīng)該滿足良好的化學(xué)穩(wěn)定性、水溶性好、腫瘤選擇性高、單態(tài)氧產(chǎn)量高、腫瘤組織滯留時(shí)間短等特點(diǎn)。迄今研究發(fā)現(xiàn)的可用于光動(dòng)力治療的光敏劑主要分為卟啉衍生物類和葉綠素衍生物類。光照是光動(dòng)力反應(yīng)的另一個(gè)關(guān)鍵要素,某些特定波長(zhǎng)的光被吸收,使光敏劑從基態(tài)轉(zhuǎn)入激發(fā)態(tài),從而將電子傳遞給氧分子,形成單線態(tài)氧。影響光動(dòng)力療法的因素不僅包括光照劑量大小及光敏劑種類,同時(shí)還包括細(xì)胞中光敏劑的富集量。光敏劑的前期研究表明,過(guò)表達(dá)ABCG2的H1650 MX50能夠顯著減少細(xì)胞內(nèi)PhA、Ce6、MPPa、HpIX的富... 

【文章來(lái)源】：陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 乳腺癌及其研究進(jìn)展
    1.2 光動(dòng)力療法
        1.2.1 光動(dòng)力療法簡(jiǎn)介
        1.2.2 光敏劑
        1.2.3 PDT在乳腺癌中的研究
    1.3 腫瘤細(xì)胞多藥耐藥及相關(guān)蛋白
        1.3.1 腫瘤細(xì)胞多藥耐藥
        1.3.2 ABC家族蛋白簡(jiǎn)介
    1.4 細(xì)胞凋亡與細(xì)胞自噬
第2章 研究論文的立論依據(jù)、內(nèi)容和目的意義
第3章 乳腺癌細(xì)胞MCF-7及其耐藥株MCF-7/ADR細(xì)胞對(duì)Ce6-PDT有不同的敏感性
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞系
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)用主要儀器
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)用主要試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 MCF-7及MCF-7/ADR細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.2 MCF-7/ADR細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線
        3.2.3 MTT檢測(cè)阿霉素、順鉑、紫杉醇對(duì)MCF-7及MCF-7/ADR細(xì)胞毒性
        3.2.4 MTT法檢測(cè)光照強(qiáng)度和Ce6濃度對(duì)MCF-7及MCF-7/ADR的細(xì)胞毒效應(yīng)。
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 MCF-7/ADR細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線
        3.3.2 阿霉素、順鉑、紫杉醇對(duì)MCF-7及MCF-7/ADR細(xì)胞毒性
        3.3.3 Ce6-PDT對(duì)MCF-7、MCF-7/ADR細(xì)胞生長(zhǎng)抑制
    3.4 討論
第4章 MCF-7及MCF-7/ADR活性氧生成量不同,從而引起不同程度的細(xì)胞損傷
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Ce6-PDT后細(xì)胞遷移能力
        4.2.2 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平檢測(cè)
        4.2.3 Hochest33342染色觀察細(xì)胞核損傷
        4.2.4 彗星電泳觀察細(xì)胞DNA損傷
        4.2.5 加入ABCG2及P-gp抑制劑后對(duì)細(xì)胞存活率影響
        4.2.6 流式細(xì)胞儀測(cè)定加入ABCG2及P-gp抑制劑之后細(xì)胞內(nèi)Ce6進(jìn)入量
        4.2.7 掃描電子顯微鏡觀察Ce6-PDT處理后MCF-7及MCF-7/ADR形態(tài)變化
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Ce6-PDT處理后MCF-7、MCF-7/ADR遷移能力
        4.3.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)Ce6-PDT處理后MCF-7及MCF-7/ADR細(xì)胞中活性氧的水平
        4.3.3 熒光顯微鏡結(jié)合Hochest33342顯示細(xì)胞核損傷
        4.3.4 彗星電泳結(jié)合熒光顯微鏡檢測(cè)DNA損傷
        4.3.5 加入ABCG2及P-gp抑制劑之后細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)Ce6富集量
        4.3.6 掃描電子顯微鏡觀察Ce6-PDT處理后細(xì)胞形態(tài)變化
    4.4 討論
第5章 Ce6-PDT誘導(dǎo)MCF-7發(fā)生凋亡應(yīng)答,MCF-7/ADR發(fā)生自噬性應(yīng)答
    5.1. 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞系
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)用儀器
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)用試劑
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 Annexin V-FITC結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        5.2.2 MTT檢測(cè)加入自噬抑制劑檢測(cè)Ce6-PDT處理后細(xì)胞存活率
        5.2.3 MDC染色
        5.2.4 蛋白免疫印跡法檢測(cè)LC3蛋白表達(dá)
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 Annexin V-FITC/PI結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)MCF-7及MCF-7/ADR細(xì)胞凋亡
        5.3.2 MTT檢測(cè)加入自噬抑制劑檢測(cè)Ce6-PDT處理后細(xì)胞存活率
        5.3.3 MDC結(jié)合熒光顯微鏡觀察MCF-7/ADR細(xì)胞中自噬溶酶體的變化
        5.3.4 免疫印跡法檢測(cè)MCF-7/ADR細(xì)胞中LC-3表達(dá)變化
    5.4 討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]二氫卟吩e6在艾氏荷瘤小鼠體內(nèi)的分布[J]. 秦曉飛,史海濤,崔興業(yè),田元龍,王攀,劉全宏.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2011(02)
[2]腫瘤光動(dòng)力學(xué)療法與免疫效應(yīng)分子[J]. 張?chǎng)?張南征.  徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(04)
[3]腫瘤光動(dòng)力治療研究進(jìn)展[J]. 楊棟.  應(yīng)用激光. 2003(06)
[4]二氫卟吩e6的合成及其光敏化力和腫瘤光生物活性[J]. 姚建忠,沈衛(wèi)鏑,陳文暉,劉建飛,周有駿.  中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志. 2000(05)



本文編號(hào)：3460027