研究背景腫瘤新生血管生成對于腫瘤的發(fā)生,發(fā)展以及轉(zhuǎn)移具有十分重要的意義。多種抗腫瘤藥物以腫瘤新生血管生成為治療靶點,但是腫瘤細胞及微環(huán)境失去了正常調(diào)控,致使腫瘤新生血管多方面都表現(xiàn)出異常,管壁發(fā)育幼稚、內(nèi)皮細胞連接不緊密、基底膜缺失以及周細胞疏松等血管壁功能不全,導致血管壁通透性高、孔隙增多、滲出增加、細胞間質(zhì)液壓增加,進一步加劇細胞微環(huán)境的缺氧和酸性環(huán)境,影響腫瘤細胞對藥物攝取,對治療十分不利。一些腫瘤藥物以抗腫瘤血管生成為治療靶點,但由于上述原因,抗腫瘤藥物單獨使用療效有限,且全身毒副作用明顯,因此各種聯(lián)合治療已逐漸成為新的趨勢。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),脈沖式高聲壓（>4MPa）治療超聲激勵微泡空化能夠利用機械作用損毀腫瘤微血管,并且明顯阻斷腫瘤內(nèi)部血流灌注,這可能成為一種物理性的抗血管治療方法,但該方法帶來的血流阻斷效應是可逆性的,一般在治療24小時后腫瘤血流即會逐漸恢復。已有研究表明,超聲誘導微泡空化時,可形成聲孔增加腫瘤細胞通透性,降低組織間隙液壓,正�；[瘤微血管,使化療藥物的遞送和釋放更為有效。同時,超聲激勵的微泡空化和以血管內(nèi)皮為靶點的化療藥物均會對腫瘤微血管產(chǎn)生毀損... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠Walker-256腫瘤二維超聲、CEUS及定量分析圖A.二維超聲圖像;B.腫瘤超聲造影圖，白線內(nèi)區(qū)為勾畫的感興趣區(qū)（ROI）;C.ROI時間-強度曲線

陸軍軍醫(yī)大學碩士學位論文17（7）組織化學檢查末次二維超聲及超聲造影結(jié)束后，以過量戊巴比妥鈉處死實驗動物后，沿腫瘤包膜與正常組織的邊界，完整剝離腫瘤組織，經(jīng)尾靜脈注射過量戊巴比妥鈉處死實驗動物。剝離的腫瘤用生理鹽水漂洗后，固定于4%多聚甲醛中，脫水后，石蠟包埋，制作為5μm的切片。隨后進行VEGFA、CD31、CD34免疫組織化學染色，在光學顯微鏡100×視野下篩選陽性染色最密集區(qū)，即“熱區(qū)”，隨后在該區(qū)域400×鏡下隨機計數(shù)3個視野內(nèi)的微血管數(shù)，取其平均值即為腫瘤微血管密度（microvesseldensity,MVD）（圖2）。圖2大鼠Walker-256腫瘤治療后MVD計數(shù)示意圖（VEGFA染色）A.微泡超聲恩度組腫瘤微血管，100×視野，圓形為所尋熱點”區(qū)域；B.微泡超聲恩度組腫瘤微血管，400×視野；C.假照組腫瘤，400×視野。（8）凋亡率檢測利用TUNEL法檢測試劑盒對各組石蠟切片進行檢測。對治療后的腫瘤細胞進行凋亡分析。顯微鏡下觀察細胞凋亡情況，每張切片選取5個400×視野，每個視野下計數(shù)200個細胞，在1000個細胞中，細胞核呈褐色深染的陽性細胞個數(shù)，記為凋亡指數(shù)（apoptosisindex,AI）。（9）透射電鏡觀察取部分腫瘤標本，切成1mm3左右的小塊，用4%戊二醛固定。處理后的標本用透射電鏡（transmissionelectronmicroscopy,TEM)進行觀察和拍照。（8）統(tǒng)計學分析采用SPSS25.0統(tǒng)計分析軟件。各組PI，AUC，腫瘤體積，MVD及AI數(shù)據(jù)為計量資料且符合正態(tài)分布，以±表示，并采用單因素方差分析進行比較，進一步組間比較采用LSD法。以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

陸軍軍醫(yī)大學碩士學位論文19表2.各組Walker-256腫瘤在不同時間點的曲線下面積(AUC)比較組別(n=15)曲線下面積治療前治療后1天治療后4天Endostar+MEUS7206.09±309.945526.29±445.964485.49±466.03Endostar7132.50±340.386244.41±485.675103.24±452.65MEUS7114.25±190.856197.28±445.365890.84±326.89ShamUS7124.18±199.706783.76±215.215901.06±424.49F值1.34832.16339.608p值0.718＜0.001＜0.001圖3各組Walker-256腫瘤治療前、治療后1天、治療后4天造影圖。白箭頭為腫瘤區(qū)域，Tx：treatment。圖4各組Walker-256腫瘤在不同時間點的PI與AUC柱狀圖。*與恩度組、微泡超聲組、假照組比較均有顯著差異，p＜0.05。#與假照組比較有顯著差異，p＜0.05。

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碩士論文
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本文編號：3456842