背景:肝細(xì)胞癌是最常見的原發(fā)性肝癌,死亡率很高。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（LncRNA）最近已出現(xiàn)作為癌癥發(fā)展和進(jìn)程中的調(diào)節(jié)劑,并可作為新的治療靶標(biāo)。在本研究中,我們旨在探討LncRNA BZRAP1-AS1與肝細(xì)胞癌血管生成的關(guān)系。方法:采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)臨床肝細(xì)胞癌組織樣本及肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中LncRNA BZRAP1-AS1的表達(dá)情況;熒光原位雜交（FISH）、核質(zhì)分離法檢測(cè)BZRAP1-AS1在肝細(xì)胞癌細(xì)胞內(nèi)的定位;小管形成實(shí)驗(yàn)顯示體外血管生成情況;雞胚絨毛尿囊膜（CAM）血管生成試驗(yàn)顯示體內(nèi)血管生成情況。qRT-PCR檢測(cè)基因表達(dá)表達(dá),甲基化特異性PCR（MSP）、亞硫酸鹽修飾測(cè)序法（BSP）、RNA Pull-down、RNA免疫共沉淀（RIP）、雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）檢測(cè)BZRAP1-AS1、DNMT3b、THBS1的相互作用關(guān)系。采用BALB/C裸鼠構(gòu)建肝癌細(xì)胞移植瘤模型;蘇木素伊紅（HE）染色觀察腫瘤組織病理學(xué)改變;免疫組織化學(xué)染色、免疫熒光染色技術(shù)檢測(cè)體內(nèi)血管生成情況。結(jié)果:LncRNA BZRAP1-AS1在肝細(xì)胞癌組... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．３熒光原位雜交（ＦＩＳＨ）檢測(cè)ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１在肝細(xì)胞癌細(xì)胞內(nèi)的定位??ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??

?第一部分ＬｎｃＲＮＡＢＺＲＡＰｌ－ＡＳｌ在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其臨床意義???圖１．５?ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１在肝旁組織和肝細(xì)胞癌組織中的相對(duì)表達(dá)??

?第二部分?ＬｎｃＲＮＡＢＺＲＡＰｌ－ＡＳｌ、ＤＮＭＴ３ｂ、ＴＨＢＳ１?的相互作用關(guān)系???圖２．?７?ＨＣＣ芯片低表達(dá)基因Ｖｅｅｎ圖??ＧＳＥ４５２６７?ＧＳＥ４９５１５??４５０?１２?２３１??３??２１６?３??１０３??ＧＳＥ８９３７７??圖２．?８?ＧＳＥ４９５１５芯片數(shù)據(jù)中ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１與ＴＨＢＳ１表達(dá)的相關(guān)性分析??〇７ｉ?ｒ?＝?－０．６７２??Ｐ?＝?０．００１??０．６－??｜〇．５－?？??０．４－??ｎ?３－?．?．?．?．?ｉ?■??＇?１＾８?Ｔｏ?２２?２Ａ?Ｚ６?？８?？０??ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１??２．?２．?２?ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１對(duì)ＴＨＢＳ１基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的影響??ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果顯示ＴＨＢＳ１在ＨｕＨ７中的相對(duì)表達(dá)量顯著低于Ｌ－０２中的相對(duì)??表達(dá)量（圖２．?９，?Ｐ〈?０．?０５），在ＨｕＨ７細(xì)胞系中，敲低ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１明顯上調(diào)ＴＨＢＳ１??表達(dá)水平（圖２．?１０，Ｐ〈?０．０５）??３８??


本文編號(hào)：3448430