目的:檢測淋巴管內皮細胞標志物VEGFR3在腫瘤患者外周血單個核細胞來源的樹突狀細胞（Mo-DC）的表達情況;外源性給予VEGFR3的配體VEGF-C,檢測VEGF-C/VEGFR3通路的激活對DC功能的影響,同時檢測VEGF-C對DC表面TLR4表達量的影響,探討VEGF-C/VEGFR3通路導致DC失能的分子機制。方法:取50例腫瘤患者的富集外周血,利用rh GM-CSF和rh IL-4共同誘導單個核細胞,得到樹突狀細胞,給予TLR4的特異激動劑LPS刺激DC成熟,流式細胞術檢測DC表面VEGFR3的表達情況,免疫熒光方法驗證VEGFR3在DC的表達;檢測VEGF-C/VEGFR3通路對DC功能的影響:外源性給予VEGF-C,流式細胞術檢測VEGF-C對DC表型的影響;MTT方法檢測VEGF-C對DC刺激同種異體T淋巴細胞的影響;細胞計數方法檢測VEGF-C對DC存活率的影響;ELISA方法檢測VEGF-C對DC分泌細胞因子的影響;流式細胞術檢測VEGF-C/VEGFR3信號通路對DC表面TLR4表達量的影響。結果:腫瘤患者Mo-DC表達淋巴管內皮細胞標志物VEGFR3:未成熟DC... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

LPS對DC表面標志物的影響

碩士學位論文 一、VEGFR3 在腫瘤外周血來源的樹突 激動劑對 DC 細胞 VEGFR3 表達的影響系來源的 DC 與單核細胞有相同的起源，本實驗我們所用細胞誘導分化而來的，為保證論據的充分性和實驗結果測了貼壁 2 h 的單核細胞表面 VEGFR3 的表達情況，用 面標記物，流式細胞術同時標記 CD14 和 VEGFR3，發(fā)現(xiàn) 的表達為（1.03±0.52）%，說明單核細胞表面 VEGFR

圖 4 LPS 刺激后 DC 表面 VEGFR3 的表達升高Figure 4 The upregulation of VEGFR3 on DC by LPS stimulation3 免疫熒光驗證 VEGFR3 在樹突狀細胞的表達VEGFR3 的免疫熒光結果顯示：部分樹突狀細胞表達 VEGFR3，其胞顯著著色，并且 LPS 刺激后的陽性細胞數明顯多于未刺激組，DC 細胞。視野下還有部分 DC 細胞未見 VEGFR3 的表達（圖 5）。圖 5 免疫熒光顯示 VEGFR3 在 DC 的表達

【參考文獻】：
期刊論文
[1]外源性VEGF促小鼠造血干細胞動員[J]. 朱曉健,李翊,游泳,李青,曾辰,仲照東,鄒萍.  中國實驗血液學雜志. 2014(01)



本文編號：3436228