缺氧對骨髓源性抑制性細胞向腫瘤相關巨噬細胞分化的影響
發(fā)布時間:2021-10-10 17:05
目的探討缺氧條件下糖代謝對骨髓源性抑制性細胞(MDSCs)向腫瘤相關巨噬細胞(TAM)分化的影響。方法采用流式細胞術選出MDSCs,Western blot法檢測缺氧或非缺氧條件下MDSCs中缺氧誘導因子1α(HIF-1α)、信號轉導與轉錄激活因子3(STAT3)的蛋白表達。缺氧條件下加入HIF-1α抑制劑LW6 20μmol/L、2-脫氧-D-葡萄糖(2-DG)0.5、5 mmol/L或寡霉素A 0.5 mmol/L后,采用流式細胞術觀察MDSCs向巨噬細胞體外分化的情況。采用流式細胞術、RT-PCR和ELISA法檢測MDSCs分化的細胞具有TAM特征的情況。結果與非缺氧條件相比,缺氧條件下HIF-1α蛋白表達、MDSCs向巨噬細胞分化的比例增加(P<0.05),STAT3蛋白表達降低(P<0.05);而加入HIF-1α抑制劑LW6可逆轉上述各指標的變化過程(P<0.05)。2-DG 5 mmol/L和寡霉素A 0.5 mmol/L可下調缺氧條件下MDSCs向巨噬細胞分化(P<0.05)。在缺氧條件下,MDSCs分化的巨噬細胞特征為CD206陽性、Arg-1基...
【文章來源】:江蘇醫(yī)藥. 2020,46(11)
【文章頁數】:5 頁
【部分圖文】:
缺氧條件下HIF-1α和STAT3在MDSCs中的蛋白表達
與非缺氧條件相比,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細胞比例增加(P<0.05);而加入LW6后,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細胞比例降低(P<0.05)(圖2)。三、抑制糖酵解和氧化磷酸化對MDSCs向巨噬細胞分化的影響
CD206是TAM的特異性標記,利用流式細胞術檢測MDSCs分化的巨噬細胞CD206表達情況發(fā)現,分化得到的巨噬細胞高表達CD206(90.3%);進一步RT-PCR檢測MDSCs分化得到巨噬細胞與小鼠腹腔巨噬細胞相比,Arg-1基因表達升高(P<0.05);與未分化的MDSCs相比,MDSCs分化得到的巨噬細胞上清液中IL-10含量增加(P<0.05)(圖4)。圖4 缺氧條件下MDSCs分化的巨噬細胞具有TAM特征
本文編號:3428795
【文章來源】:江蘇醫(yī)藥. 2020,46(11)
【文章頁數】:5 頁
【部分圖文】:
缺氧條件下HIF-1α和STAT3在MDSCs中的蛋白表達
與非缺氧條件相比,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細胞比例增加(P<0.05);而加入LW6后,MDSCs在缺氧條件下培養(yǎng)7 d后的巨噬細胞比例降低(P<0.05)(圖2)。三、抑制糖酵解和氧化磷酸化對MDSCs向巨噬細胞分化的影響
CD206是TAM的特異性標記,利用流式細胞術檢測MDSCs分化的巨噬細胞CD206表達情況發(fā)現,分化得到的巨噬細胞高表達CD206(90.3%);進一步RT-PCR檢測MDSCs分化得到巨噬細胞與小鼠腹腔巨噬細胞相比,Arg-1基因表達升高(P<0.05);與未分化的MDSCs相比,MDSCs分化得到的巨噬細胞上清液中IL-10含量增加(P<0.05)(圖4)。圖4 缺氧條件下MDSCs分化的巨噬細胞具有TAM特征
本文編號:3428795
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